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《橡膠樹熱研8-79原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)JOURNALOFSOUTHERNAGRICULTURE2013，44(12)：2040—2045ISSN2095—1191；CODENNNXAABhttp：／／www．nfny)【b．enDOI：10．39696：issn．2095—1191．2013．12．2040橡膠樹熱研8—79原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株戴雪梅，李哲，華玉偉，黃天帶，孫愛花，周權(quán)男，黃華孫+(中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院橡膠研究所／農(nóng)業(yè)部橡膠樹生物學(xué)與遺傳資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室悃家橡膠樹育種中心，海南儋州571737)摘要：【目的】?jī)?yōu)化橡膠樹熱研8．79原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)條件，建立橡膠樹
2、原生質(zhì)體培養(yǎng)植株高效再生體系，為橡膠樹體細(xì)胞雜交育種奠定基礎(chǔ)?！痉椒ā恳韵鹉z樹熱研8．79花藥愈傷組織建立的胚性細(xì)胞懸浮系為試驗(yàn)材料，設(shè)計(jì)不同酶組合、酶解時(shí)間和懸浮細(xì)胞繼代時(shí)間進(jìn)行原生質(zhì)體分離，采用不同培養(yǎng)基、看護(hù)細(xì)胞濃度和接種密度進(jìn)行原生質(zhì)體培養(yǎng)，對(duì)原生質(zhì)體分裂發(fā)育的小愈傷組織進(jìn)行體細(xì)胞胚誘導(dǎo)及植株再生培養(yǎng)，統(tǒng)計(jì)原生質(zhì)體的產(chǎn)量、分裂頻率、體胚數(shù)及體胚萌發(fā)率?！窘Y(jié)果】酶組合為纖維素酶1．50％+果膠酶0．15％+離析酶0．50％、酶解時(shí)間為12hH寸，繼代培養(yǎng)第5d的胚性懸浮細(xì)胞達(dá)最高產(chǎn)量(3．6x107個(gè)／mLPCV)；用酶解細(xì)胞和看護(hù)細(xì)胞繼代培養(yǎng)基分
3、別作為原生質(zhì)體液體培養(yǎng)基和看護(hù)培養(yǎng)基，比使用KPR培養(yǎng)基更有利于原生質(zhì)體的分裂，當(dāng)看護(hù)細(xì)胞濃度為5％、接種密度為5x105個(gè)／mL時(shí)原生質(zhì)體的分裂頻率最高，達(dá)54％。原生質(zhì)體持續(xù)分裂形成肉眼可見的小愈傷組織增殖后經(jīng)體胚發(fā)生途徑發(fā)育成完整的小植株?！窘Y(jié)論】通過優(yōu)化橡膠樹熱研8．79胚性懸浮細(xì)胞原生質(zhì)體分離的酶組合、酶解時(shí)間、繼代培養(yǎng)時(shí)間及看護(hù)培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基組成、看護(hù)細(xì)胞濃度和接種密度等影響因素，可以建立橡膠樹原生質(zhì)體培養(yǎng)植株高效再生體系。關(guān)鍵詞：橡膠樹；熱研8—79；胚性懸浮細(xì)胞；原生質(zhì)體；看護(hù)培養(yǎng)；植株再生中圖分類號(hào)：$794．1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)
4、：2095—1191(2013)12—2040—06PlantregenerationfromprotoplastcultureofReyan8-79(HeveabrasiliensisMiill．Arg．)DAIXue—mei，LIZhe，HUAYu—wei，HUANGTian—dai，SUNAi-hua，ZHOUQuan—nan．HUANGHua—sun4(RubberResearchInstitute，ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences／KeyLaboratoryforBiologyandGen
5、eticResourcesUtilizationofRubberTree，MinistryofA—culture／StateRubberTreeBreedingCenter，Danzhou，Hainan571737，China)Abstract：【Objective】TheeffeetfactorsonprotoplastisolatiouandcultureofReyan8-79wereoptimizedtoestablishanefficientprotocolforplantregenerationfromprotoplastculture．whi
6、chwasthepremiseforsomatichybridizationinrub—ber．【Method】TheembryogeniccellsuspensionderivedfromanthercalliofReyan8-79wasusedasexperimentalmateri—als．Differentenzymecompositions．exposuretimeandtimeaftersubcultureofsuspensioncellweredesignedforprotoplastisolation，anddifferentmedium
7、compositions，concentrationofnursecellsandplantingdensitywereusedforprotoplastculture．7l'hemicrocalliformedfromprotoplastswereinducedforsomaticembryogenesisandsubsequentlyplantregenera-tion．Protoplastyieldanditsdivisionfrequency．numberofsomaticembryoandgerminationratewerecounted．【
8、Result】Theresultsshowedthehighestyieldof
