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1、第六講二、三級(jí)菌種制作技術(shù)《食用菌生產(chǎn)技術(shù)》課程組二、三級(jí)菌種制作技術(shù)一.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的配制二.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的滅菌三.二、三級(jí)菌種的接種四.二、三級(jí)菌種的培養(yǎng)五.二、三級(jí)菌種的質(zhì)量鑒定原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn),無(wú)論是培養(yǎng)基成分,配制方法和滅菌方法基本上是相同的。1)原種:是由試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種作種源接種而成,主要用于繁殖栽培種,也可直接用于生產(chǎn)。(母種→原種)2)栽培種:由原種作種源擴(kuò)大而成,只能用于生產(chǎn)。(原種→栽培種)二、三級(jí)菌種制作流程配制培養(yǎng)基滅菌二級(jí)菌
2、種培養(yǎng)接種培養(yǎng)接種滅菌配制培養(yǎng)基三級(jí)菌種一級(jí)菌種二級(jí)菌種(二、三級(jí)菌種制作過程大同小異)原種、栽培種的制作流程按配方稱取原料→拌料→裝瓶(袋)→打洞(孔徑1cm深至瓶底)→滅菌(1.5kg/cm2,1.5~2h)→冷卻→接種(接入黃豆大小一塊)→培養(yǎng)(25℃~27℃)→菌絲長(zhǎng)滿瓶(袋)→培養(yǎng)7d~8d→擴(kuò)大成栽培種。一.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的配制(一)配制總原則1.選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)間配制的比例要恰當(dāng)。3.選擇經(jīng)濟(jì)實(shí)用、來源廣泛的原料。4.適宜的pH值和含水量。培養(yǎng)基(料)配制原則⑴
3、掌握碳氮比例食用菌對(duì)碳和氮的需要有一個(gè)比例,簡(jiǎn)稱碳氮比(C/N)。菌絲體生長(zhǎng)階段:C/N=20∶1;子實(shí)體形成階段:C/N=30~40∶1;C/N過高,菌絲體生長(zhǎng)過旺,而子實(shí)體小、產(chǎn)量低。⑵選好培養(yǎng)材料①首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑杉、松、樟等樹種,含酚、酯、精油等殺菌物質(zhì),會(huì)抑制食用菌生長(zhǎng)。要用必須經(jīng)過處理,如:蒸煮、曬等。②根據(jù)食用菌的喜好選木屑如:培養(yǎng)香菇用樺木屑就比椴木屑好;培養(yǎng)金針菇用構(gòu),楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。⑶注意物理性狀培養(yǎng)原料要注意顆粒粗細(xì)、質(zhì)地軟硬程度,以及持水性能等物理性
4、狀。⑷調(diào)節(jié)酸堿度各種食用菌需要的pH值不同,配制培養(yǎng)料時(shí),應(yīng)選用NaOH、石灰、鹽酸或過磷酸鈣等物質(zhì)調(diào)節(jié)pH值。霉菌比食用菌喜歡更低的pH值,生產(chǎn)上有時(shí)為了控制這類雜菌的發(fā)生,往往將pH值適當(dāng)調(diào)高0.5~1。原料選擇的注意事項(xiàng)(幾點(diǎn)說明)⑴木屑:樹種:除松樹、杉樹、柏樹、樟樹、蕓香屬、按屬等樹種之外,絕大多數(shù)闊葉樹和木屑都可以利用。(因其中含有酚、酯、精油等殺菌物質(zhì))粗細(xì):不宜過細(xì),以免培養(yǎng)基過濕或通氣不良。選擇:根據(jù)食用菌分解能力選擇,分解能力較強(qiáng)的食用菌采用硬質(zhì)闊葉樹木屑,反之采用軟質(zhì)樹種木
5、屑。如:金針菇分解能力較弱,以含單寧較少木屑為宜,木屑越陳越好;茯苓菌分解能力較強(qiáng),可采用顆粒粗的松木屑或松木釘。⑵米糠、麩皮作用作用:補(bǔ)充氮源和維生素。稻草、麥秸、木屑、棉籽殼等纖維素原料,含氮量低。如:木屑含氮量0.03%以下。麩皮:含氮量比米糠多,但維生素不如米糠。米糠:含氮量比麩皮少。用量:一般10%~20%,過多易引起污染。⑶加糖的作用①初期補(bǔ)充碳源,用量1%~5%。②誘導(dǎo)胞外酶的產(chǎn)生。纖維素原料,食用菌利用緩慢。加入少量白糖作為食用菌初期補(bǔ)充碳源,促進(jìn)菌絲快速生長(zhǎng),同時(shí)誘導(dǎo)纖維素酶的
6、產(chǎn)生,更好地利用纖維素。⑷Ca2+作用①提供食用菌鈣離子:原料中加石膏、CaCO3或過磷酸鈣、骨粉提供食用菌鈣離子;②鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機(jī)酸;③鈣還能中和單寧;④減少過量K、Mg對(duì)菌絲中毒,促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)。1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法培養(yǎng)料木屑——米糠培養(yǎng)料:木生菇類,如:木耳、銀耳、香菇;草莖或草糞——廄肥培養(yǎng)料:草生菇類,如:蘑菇、草菇;棉籽殼——米糠培養(yǎng)料:多種菇類。(二)培養(yǎng)基常用的配方⑴糞草培養(yǎng)基(適用于蘑菇)稻草或麥秸20kg、糞肥(干)30kg、石膏500g、水適量。方法:稻
7、草切成2cm長(zhǎng)+糞肥→混合發(fā)酵+石膏→調(diào)水→裝瓶→滅菌1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法⑵稻草麩皮培養(yǎng)基(草菇)干稻草78%、麩皮或米糠20%、蔗糖1%、過磷酸鈣1%、水適量方法:稻草切成2cm長(zhǎng)→發(fā)酵→+蔗糖+麩皮+過磷酸鈣⑶木屑米糠培養(yǎng)基(香菇、木耳、猴頭、平菇等)木屑78%、麩皮或米糠20%、石膏1%、蔗糖1%、水適量。⑷木屑、麩皮、黃豆粉培養(yǎng)基(銀耳)木屑50kg、麩皮15kg、黃豆粉1kg、蔗糖0.75kg、MgSO40.25kg、水70~75kg。⑸棉籽殼培養(yǎng)基(平菇、猴頭、金針菇)棉籽
8、殼99.7%、蔗糖0.1%、石膏0.2%、水適量。1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法(三)培養(yǎng)基配制步驟稱料拌料調(diào)節(jié)pH值分裝培養(yǎng)料清潔(洗或擦)瓶、袋外壁封口1.不溶性主、輔料混拌均勻2.可溶性輔料溶于水后拌入主輔料3.注意檢查含水量(手測(cè)法等)比實(shí)際要求的pH值調(diào)高1左右容器:菌種瓶、菌種袋要求:上緊下松,外緊內(nèi)松,中間一個(gè)洞二.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的滅菌1.滅菌方法及要求高壓蒸汽滅菌:壓力1.5kg/cm2,溫度126-128℃,時(shí)間1-2h(谷粒和經(jīng)過堆制發(fā)酵的糞草培養(yǎng)基應(yīng)達(dá)到2-2.5h)。