《苯酚-硫酸法測定花椒葉多糖含量》.pdf

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1、第33卷第4期食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報Vo1．33No．4402015年7月JournalofFoodScienceandTechnologyJu1．2015doi：10．3969／j．issn．2095—6002．2015．04．008文章編號：2095~002(2015)04—0040-07引用格式：齊素芬，張華峰，姚美，等．苯酚一硫酸法測定花椒葉多糖含量[J]．食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報，2015，33(4)：40—46．QISufen，ZHANGHuafeng，YAOMei，eta1．Developmentandap

2、plicationofphenol—sulfuricacidmethodfordeterminationofpolysaccharidesinZanthoxylumbungeanumleaves[J]．JournalofFoodScienceandTechnology，2015，33(4)：40—46．苯酚一硫酸法測定花椒葉多糖含量齊素芬，張華峰，姚美，程芳，王正齊，陳思雨(陜西師范大學(xué)食品工程與營養(yǎng)科學(xué)學(xué)院／藥用資源與天然藥物化學(xué)教育部重點實驗室／西北瀕危藥材資源開發(fā)國家工程實驗室，陜西西安710062)

3、摘要：建立了一種靈敏、特異、精確定量分析花椒葉多糖的苯酚一硫酸法，采用該方法測定了陜西大紅袍花椒葉中多糖的含量。該方法選擇半乳糖作為標(biāo)準(zhǔn)單糖，484am為工作波長。通過單因素實驗和正交試驗優(yōu)化得到了較佳顯色反應(yīng)條件是加樣次序為苯酚一樣品一濃硫酸，顯色溫度為25℃，質(zhì)量分數(shù)為5％的苯酚添加量為0．3mL，濃硫酸添加量為3．5mL，顯色時間為30min。’系統(tǒng)適應(yīng)性實驗顯示該方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0．0127x一0．0076(R=0．997)，線性范圍為10．O0—60．00I~g／mL，LOD和LOQ分別為

4、2．08g／mL和6．30g／mL，日內(nèi)、日間精密度分別在0．49％～3．64％，5．17％～6．05％之間，平均回收率為101．19％。樣品溶液在顯色反應(yīng)后的2h內(nèi)穩(wěn)定性較好。測定發(fā)現(xiàn)陜西大紅袍花椒葉中W(多糖)在8．11～8．89mg／g之間。該方法為花椒葉多糖的定量分析和花椒葉資源的開發(fā)利用提供了參考。關(guān)鍵詞：花椒葉；多糖；苯酚一硫酸法；顯色反應(yīng)中圖分類號：TS207．3文獻標(biāo)志碼：A蕓香科(Rutaceae)花椒屬(Zanthoxylum)植物花用多糖在濃硫酸作用下水解成單糖，并迅速脫水生椒(Zan

5、thoxylumbungeanum)的果皮是重要的傳統(tǒng)香成糠醛衍生物進而和苯酚縮合成有色化合物，以葡料，在我國的種植面積約有21萬hm。國內(nèi)外學(xué)萄糖為標(biāo)準(zhǔn)單糖在490nm波長下進行比色分析。者對花椒果皮中揮發(fā)性芳香油、生物堿、香豆素、類黃該方法操作簡便，快捷靈敏，無須大型儀器，但是其酮等的開發(fā)利用進行了廣泛研究，但是對花椒葉準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性受實驗條件(如顯色反應(yīng))的影響資源的研究相對較少?；ń啡~中含有蛋白質(zhì)、氨基較大。為了給花椒葉多糖的定量分析和花椒葉資源的開發(fā)利用提供依據(jù)，本研究對苯酚一硫酸法酸、脂肪、維生

6、素、類黃酮等多種營養(yǎng)素和生物活性物的實驗條件進行了優(yōu)化，然后采用系統(tǒng)適應(yīng)性實驗質(zhì)，在陜西省渭南市等很多地區(qū)作為蔬菜食用，但是進行了方法學(xué)評價，最終建立了靈敏、特異、精確的花目前對花椒葉多糖的研究卻較鮮見¨。我們實驗室椒葉多糖定量分析方法，并運用該方法測定了陜西大研究發(fā)現(xiàn)，花椒葉粗多糖具有抗氧化活性。準(zhǔn)確測定紅袍花椒葉中多糖的含量。花椒葉多糖的含量，系統(tǒng)分析花椒葉多糖的生物活性，對于花椒資源的科學(xué)開發(fā)和綜合利用具有一定的1材料與方法積極意義。植物多糖的定量分析方法包括苯酚一硫酸法、蒽酮一硫酸法和地衣酚一硫酸法

7、等，其中最常1．1儀器與試劑用的方法是苯酚一硫酸法。該方法的原理是利TU一1810型紫外可見分光光度計，北京普析通收稿日期：2014—07—14基金項目：中央高校基本科研業(yè)務(wù)費專項資金項目(GK201302048)；陜西省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(ex13063)。作者簡介：齊素芬，女，學(xué)士，研究方向為藥食兩用植物資源開發(fā)與利用；張華峰，男，副教授，博士，主要從事食品營養(yǎng)與安全方面的研究。通信作者。第33卷第4期齊素芬等：苯酚一硫酸法測定花椒葉多糖含量41用儀器有限責(zé)任公司；DL一4C型低速大容量離心1．

8、2．2．3顯色時間對吸光度的影響機，上海安亭科學(xué)儀器廠；HH一2型恒溫水浴鍋，北按照質(zhì)量分數(shù)為5％苯酚0．3mL、多糖溶液京科偉永興儀器有限公司；RE一52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，1．0mL、濃硫酸2．0mL的比例依次加樣，混勻后在上海安亭實驗儀器有限公司；BS224S型分析天平，室溫下分別顯色5，1O，20，25，30rain，測定吸光度。北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司。1．2．2．4濃硫酸添加量對吸光度的影響葡萄糖、半乳