北沙參中香豆素的提取工藝研究-論文.pdf

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1、時珍國醫(yī)國藥2014年第25卷第2期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2014VOL．25NO．2北沙參中香豆素的提取工藝研究馮子晉，盧小玲，張建鵬，劉靖堂，劉小宇，焦炳華，鄭珩h(1．中國藥科大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇南京210009；2．中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)，上海200433)摘要：目的研究北沙參中香豆素的提?。甕-藝，為更好的提取北沙參中的香豆素成分提供依據(jù)。方法使用乙醇超聲提取方法，考察了溶媒量，溶媒濃度，提取時間對提取北沙參中總香豆素含量的影響，運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝參數(shù)，利用HPLC檢測總香豆素的含量。結(jié)果確定提取工藝為：北沙參

2、藥材粉末過80目篩，溶媒用量為7．5倍物料量(ml／g)的75％乙醇，超聲45rain，總香豆素的提取量達(dá)到0．0191mg／g。結(jié)論工藝穩(wěn)定、合理、可行。關(guān)鍵詞：北沙參；提取工藝；補(bǔ)骨脂素；歐前胡素；異歐前胡素；花椒毒素D0I標(biāo)識：doi：10．3969／j．issn．1008-0805．2014．02．01l中圖分類號：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1008-0805(2014)02-0282-02北沙參為常用中藥，《中國藥典)2010年版收載為傘形科植度，搖勻，制成補(bǔ)骨脂素0．10mg／ml、歐前胡素0．10mg／ml、異歐物珊瑚菜GlehnialittoralisFr．Schmi

3、dtexMiq．的干燥根，其性前胡素0．11mg／ml、花椒毒素0．10mml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，備用。甘、微苦、微寒，歸肺、胃經(jīng)，有養(yǎng)陰清肺、益胃生津的功效，主要用分別取四種標(biāo)準(zhǔn)品的儲備液，精密吸取1，0．5，0．1，0．05，于肺熱燥咳、勞嗽痰血、熱病津傷等癥。研究表明香豆素(COH—0．025ml于2ml容量瓶中，加甲醇至刻度。精密吸取上述各溶液marin)為其重要的活性成分，具有抗高血壓、抗HIV、抗癌、抗菌20I~1，按上述色譜條件進(jìn)行分析，見圖1。以樣品峰面積值為縱等多種生物活性。因此北沙參中所含的香豆素量已成為評價坐標(biāo)(Y)，以進(jìn)樣濃度(mg／m1)為橫坐標(biāo)()作圖，得回歸方程：北沙參

4、質(zhì)量的重要依據(jù)。日=101771X+4．8501，R=0．9989，結(jié)果表明，補(bǔ)骨脂素對于常見藥材中有關(guān)總香豆素的提取，傳統(tǒng)方法多采用乙醇在0．00125—0．05mml呈線性關(guān)系；Y政=66488X+或有機(jī)溶劑提取，再進(jìn)行后續(xù)的工藝研究，其缺點(diǎn)是提取時間較1I．066，R=0．9997，結(jié)果表明，歐前胡素在0．00125～0．05mg／長，工藝繁瑣且純度低。采用超聲預(yù)處理工藝條件溫和，可減少ml呈線性關(guān)系；y異歐前胡素=13120X一6．844，R=0．9993，結(jié)果表熱敏性有效成分的破壞。本課題以歐前胡素、異歐前胡素、補(bǔ)骨明，異歐前胡素在0．00137～0．055mg／ml呈線性關(guān)系；《：

5、脂素、花椒毒素的提取含量為考察指標(biāo)，研究了北沙參中香豆素103214X+16．013，R=0．9999，結(jié)果表明，花椒毒素在0．00125的提取工藝?！?．05mg／ml呈線性關(guān)系。1儀器與試藥表1色譜洗脫程序1．1儀器Agilentl100型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；KQ一250E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；電子天平(Bel公司)。1．2試藥HPLC級乙腈，純凈水，歐前胡素(批號：110826—201214)、異歐前胡素(批號：110827—201109)、補(bǔ)骨脂素(批號：110739—201115)均購于中國藥品與生物制品檢定所，花椒毒素由本實(shí)驗(yàn)室自制(含量>98％)

6、。北沙參藥材購自遼寧，經(jīng)第二軍醫(yī)大學(xué)生藥教研室秦路平教授鑒定為傘形科珊瑚菜屬珊瑚菜2．3樣品溶液制備稱取9份遼寧產(chǎn)北沙參藥材各2．Og，置具塞的干燥根。乙醇與其他試劑均為分析純。錐形瓶中，加入一定濃度的適量乙醇，稱定重量，超聲處理(功率2方法與結(jié)果250W，頻率40KHz)，放冷，再稱定重量，用一定濃度的乙醇補(bǔ)足2．1色譜條件色譜柱為AgilentSB—C柱(250mm×4．6inn，減失的重量，搖勻，用0．45I~m濾膜過濾后進(jìn)樣分析。見圖2。5p,m)；流動相為乙腈一水(洗脫程序見表1)；體積流量為1．0本研究采用了正交試驗(yàn)對香豆素的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，選ml／min；檢測波長250Flm

7、；柱溫30oC；進(jìn)樣量20l。取溶媒量(A)，超聲時間(B)，乙醇濃度(C)三個影響因素，分別2．2歐前胡素、異歐前胡素、補(bǔ)骨脂素、花椒毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪在3個水平進(jìn)行正交優(yōu)選，按L。(3)正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，因素水平制分別精密稱取干燥至恒重的補(bǔ)骨脂素、歐前胡素、異歐前胡安排見表2。素、花椒毒素對照品適量，置10ml棕色容量瓶中，加甲醇至刻表2因素和水平收稿13期：2013-o45；修訂日期：2013-