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《大豆Usp1基因的克隆和表達分析-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第31卷第4期大豆科學VoI．3lNO．42012年8月SOYBEANSCIENCEAug．2012大豆Vspl基因的克隆和表達分析黃姍，王偉旗，侯文勝(中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所，國家農(nóng)作物基因資源與基因改良重大科學工程，農(nóng)業(yè)部北京大豆生物學重點實驗室，北京100081)摘要：在對大豆根系鹽脅迫抑制差減雜交文庫EST序列分析的基礎(chǔ)上，利用RT—PCR技術(shù)克隆得到了一個大豆一基因，命名為GmUspl，其編碼一個包含164個氨基酸殘基的多肽鏈。多序列比對和編碼蛋白結(jié)構(gòu)分析表明，GmUspl屬于泛應(yīng)激蛋白(UniversalStressProtein)家族成員之一。其氨基酸序列
2、與蠶豆VLenodl8序列相似度最高，屬于MJ-0577類中含有ATP結(jié)合位點的UspA亞族，與MJ-0577有相似的蛋白二級結(jié)構(gòu)。分別采用250mmol·LNaC1、100I,zmol·LABA和30％PEG6000進行脅迫處理，耐鹽品種文豐7號和鹽敏感品種Union的GmUspl均被誘導表達，二者對脅迫誘導響應(yīng)時間和表達量存在差異，說明GmUspl可能參與大豆對非生物逆境脅迫的應(yīng)答調(diào)控。關(guān)鍵詞：大豆；；序列分析；基因表達中圖分類號：$565．1文獻標識碼：A文章編號：1000—9841(2012)04-0546-06CloningandExpressionAnalysis
3、ofUsp1GenefromSoybeanHUANGShan，WANGWei—qi，HOUWen—sheng(MOAKeyLaboratoryofSoybeanBiology，NationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement，InstituteofCropScience，ChineseAcademyofAgncuhuralSciences，Beijing100081，China)Abstract：AccordingtotheESTsequencesoftheSuppressionSubtractiveHy
4、bridization(SSH)cDNAlibraries，asoybeanVspagenenamedbyGmUsplwasclonedfromthesoybeanbyRT—PCR．ThecompletecDNAofGmUsplwas1047bp，itencodedapeptidewhichcontained164aminoacidresidues．The495bpCDSshowedthatitbelongedtotheuniversalstressprotein(Us—pA)family，byusingtheBLASTptoolofNCBIdatabase．Homology
5、analysisshowedGmUsplhadthehi【ghentsimilaritywiththebeanVfenodl8，anditbelongedtothegroupofVspa，whichrepresentedbytheATP—bingingstructureoftheMJ-0577protein_fromMethanococcusjannaschii．ItalsohadthesimilarproteinsecondarystructurewithMJ-0577．InthesaltsensitivevarietyU—nionandtolerantvarietyWen
6、fengNo．7，theexpressionofGmUsplwasinducedby250mmol·L～NaC1，100p~mol·LABAand30％PEG一600treatment，however，ithaddifferentresponsetimeandexpressionleve1．SoGmUw1mightbeinvolvedinplantstressadaptation，itsuggestedthatGmUsplmayplayaroleinsaltstressadaptationinsoybean．Keywords：Soybean；WpA；Sequenceanaly
7、sis；Geneexpression泛應(yīng)激蛋白(Universalstressprotein，UspA)是Escherichiacoli的UspA家族蛋白。David等分一類在細胞質(zhì)中普遍存在的小分子蛋白，通常由析了擬南芥基因組44個UspA家族蛋白，認為擬南l11—167個氨基酸殘基組成。UspA最早在大腸桿芥中的該家族蛋白全部由近似于1MJH(MJ0577)的菌中發(fā)現(xiàn)，其表達受多種脅迫影響。研究表明該類祖先演變而來。蛋白在碳、氮、磷、硫酸鹽、氨基酸等缺乏時，以及在大豆是世界上重要的糧油兼用作物，具有
