一例雞多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)-論文.pdf

《一例雞多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)-論文.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、·42·《上海畜牧獸醫(yī)通訊》2014年第4期一例雞多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)趙飛飛孟薇薇吳海珍牛衛(wèi)衛(wèi)李士成(山東華宏生物工程有限公司山東濱州256600)【摘要】從某養(yǎng)殖場的病死雞中分離獲得1株巴氏桿菌，血清型鑒定為A型。攻毒試驗(yàn)中，試驗(yàn)雞表現(xiàn)出巴氏桿菌病的典型臨床癥狀；采集病死試驗(yàn)雞的心臟、肝臟病料，以同樣方法分離到巴氏桿菌。以柯氏法則及藥敏試驗(yàn)結(jié)果診斷該雞場發(fā)生巴氏桿菌病且菌株的致病力較強(qiáng)。本研究為該病的實(shí)驗(yàn)室診斷及防控提供了方法。關(guān)鍵詞：巴氏桿病；分離；鑒定；藥敏試驗(yàn)禽巴氏桿菌病又名禽霍亂、禽出

2、血性敗血癥，司，氯化鈉購自煙臺市雙雙化工有限公司，藥敏片是由多殺性巴氏桿菌(Pasteurellamultocida)引起購自北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司。的雞、火雞、鴨、鵝等多種禽類的傳染病。本病常呈1．1．3試驗(yàn)動物：4月齡SPF雞，購自山東省實(shí)驗(yàn)現(xiàn)敗血癥過程，發(fā)病率和死亡率很高，也見慢性經(jīng)動物中心。過。一年四季均可發(fā)生，但以冷熱交替、氣候劇變、1．2方法悶熱、潮濕、多雨時期發(fā)生較多?？山?jīng)消化道、呼吸1．2．1病料鏡檢：剖檢病死雞，取肝臟、肺臟制作道感染，也可經(jīng)破損的皮膚黏膜感染，帶菌禽是主病料涂片，革蘭氏染

3、色后鏡檢。要傳染源。一般為散發(fā)，有時可呈地方性流行，呈1．2．2細(xì)菌分離培養(yǎng)。：無菌條件下取送檢病料的世界性分布，是嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的重要細(xì)菌性傳染肝臟，劃線接種于鮮血馬丁瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊病之一。。脂平板，37℃培養(yǎng)24h，觀察分離菌在鮮血馬丁瓊2014年2月某養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的10000羽肉雞出脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂平板的生長情況?，F(xiàn)食欲不振，體溫升高，呼吸困難，鼻孔、口腔流黏1．2．3細(xì)菌形態(tài)觀察：挑取鮮血馬丁瓊脂培養(yǎng)基液，伴有腹瀉的現(xiàn)象。發(fā)病初期死亡10～20羽／d，上的單個菌落，制作細(xì)菌涂片，并進(jìn)行革蘭氏染

4、色、之后死亡數(shù)上升至100羽／d左右，給養(yǎng)殖場造成了鏡檢。巨大的損失。筆者對該起病例進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，由1．2．4生化試驗(yàn)：取純化的菌落接種微量鑒定死亡雞體內(nèi)分離獲得1株巴氏桿菌，利用分離純化管中，置37℃溫箱培養(yǎng)48h，觀察試驗(yàn)結(jié)果。菌進(jìn)行攻毒試驗(yàn)和藥敏試驗(yàn)，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果匯報1．2．5血清型的鑒定：取標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，采用玻片如下。凝集的方法測定分離菌株的血清型。1材料和方法1．2．6動物攻毒試驗(yàn)：將鮮血馬丁瓊脂培養(yǎng)基上1．1材料培養(yǎng)24h的菌落，用滅菌生理鹽水洗下來，按5％的1．1．1病料來源：病死雞，由山東濰

5、坊某養(yǎng)殖場比例加入到200mL含5血清的馬丁肉湯中，培養(yǎng)送檢。18h。平板計(jì)數(shù)法測定菌液的濃度為1．5×1．1．2主要試劑：麥康凱瓊脂購自北京奧博星生lOCFU／mL。實(shí)驗(yàn)組：a組原菌液(1．5×物技術(shù)有限責(zé)任公司，改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基、改良1O。CFU／mL)1．0mE／羽，胸肌注射3羽；b組原液馬丁培養(yǎng)基均購自青島市高科園海博生物技術(shù)有進(jìn)行2×10倍稀釋(75個菌／mL)1．0mE／羽，胸肌限公司，革蘭氏染液購自北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公注射3羽；c組原液進(jìn)行2×1O倍稀釋(7．5個菌／mE)1mE／羽，胸肌注

6、射3羽。對照組：取含5血清的*為通訊作者馬丁肉湯1．0mE／羽，胸肌注射3羽。觀察并記錄《上海畜牧獸醫(yī)通訊》2014年第4期·43·攻毒雞的臨床癥狀，剖檢病死雞，觀察病理變化，并頭孢哌酮(舒巴坦)、頭孢唑啉鈉、恩諾沙星、頭孢噻取其肝臟做細(xì)菌分離培養(yǎng)。吩、環(huán)丙沙星、頭孢氨芐高度敏感藥物(抑菌圈>1．2．7藥敏試驗(yàn)“：將分離菌的純培養(yǎng)物用滅菌生15mm)，對阿米卡星、呋喃妥因、氟羅沙星、諾氟沙理鹽水稀釋后涂布于鮮血馬丁瓊脂培養(yǎng)基上，采用星、妥布霉素、新霉素、利福平中度敏感(10≤抑菌Kirby—Bauer紙片擴(kuò)散

7、法對28種抗生素進(jìn)行藥敏試圈≤15mm)，對氧氟沙星、甲氧嘧啶、卡那霉素、林驗(yàn)。判定標(biāo)準(zhǔn)為抑菌圈直徑>15mm為高敏，10≤可霉素、頭孢哌酮、紅霉素、氨芐西林、青霉素、頭孢抑菌圈≤15mm為中敏，6<抑菌圈<10mm為呋辛、阿莫西林、慶大霉素不敏感。該菌株對11種低敏。藥物出現(xiàn)耐藥性。2結(jié)果3討論2．1病料鏡檢結(jié)果3．1根據(jù)養(yǎng)殖場雞群的臨床癥狀、死亡趨勢、病死剖檢可見心冠脂肪出血，肝臟表面出現(xiàn)白色壞雞的病理剖檢變化、細(xì)菌的分離鏡檢以及生化試死灶，腸道鼓氣并伴有出血，肺臟出血嚴(yán)重，腎臟腫驗(yàn)，可確定該雞場雞群感染

8、多殺性巴氏桿菌且血清大。病料涂片經(jīng)革蘭氏染色后鏡檢，可見兩級濃染型為A型。的紅色短桿菌。3．2據(jù)攻毒試驗(yàn)中試驗(yàn)雞的死亡及剖檢變化，可2．2細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果以看出該株巴氏桿菌具有較強(qiáng)的致病力。可選擇麥康凱瓊脂上未長菌；鮮血馬丁瓊脂培養(yǎng)基上藥敏試驗(yàn)中頭孢哌酮(舒巴坦)、頭孢曲松、頭孢噻呈灰白色、光滑、隆起、邊緣整齊的中等大小菌落。肟等高度敏感的藥物進(jìn)行治療。2．3細(xì)菌形態(tài)觀察結(jié)果3．3禽巴氏桿菌病是嚴(yán)重