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《豬胸膜肺炎放線桿菌apxiv-elisa鑒別診斷試劑盒的研制與應(yīng)用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報JournalofAgriculturalBiotechnology2007,15(6):911~917·研究論文·豬胸膜肺炎放線桿菌Apx郁ELISA鑒別診斷試劑盒的研制與應(yīng)用*1111211**賈凡,?胡軍勇,王建銀,?石碧,李樹清,?陳煥春,周銳(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點實驗室,武漢430070;2.上海出入境檢驗檢疫局,上海200135)摘要:胸膜肺炎放線桿菌(,APP)是一種嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)的重要病原菌,至少有15種血清型,根據(jù)所有血清型菌株僅在感染豬體內(nèi)產(chǎn)生外毒素Apx郁的特點
2、,建立了一種能夠區(qū)分感染豬與免疫豬的鑒別診斷方法Apx郁ELISA。研究在反應(yīng)條件方面加以優(yōu)化,將該診斷方法進(jìn)一步研制成試劑盒,對其特異性、敏感性、重復(fù)性和穩(wěn)定性進(jìn)行了測試,與間接血凝試驗及IDEXX公司的CHEKITAPPAPX郁試劑盒進(jìn)行了對比研究,并用該試劑盒檢測了來自中國、英國、丹麥、美國、加拿大、澳大利亞等國的臨床豬血清1453份。結(jié)果表明,Apx郁ELISA試劑盒具有很高的特異性和敏感性,與CHEKITAPPAPX郁試劑盒的檢測符合率為91.37%;3批試劑盒的批內(nèi)和批間重復(fù)性良好(變異系數(shù)均<15%);試劑盒在2~8
3、℃保存9個月內(nèi)穩(wěn)定性良好。所檢種豬血樣中,來自中國豬場1、中國豬場2、美國、加拿大、丹麥、澳大利亞和英國的Apx郁抗體陽性率分別為30.05%、70.69%、39.72%、0.64%、42.22%、1.85%和93.94%;所檢我國2個規(guī)模化豬場的仔豬ApxIV抗體陽性率分別為21.77%和27.15%,育肥豬的陽性率分別為5.51%和11.07%。研究表明,Apx郁ELISA試劑盒能夠有效區(qū)分APP感染豬與三價滅活疫苗或亞單位疫苗免疫豬。關(guān)鍵詞:胸膜肺炎放線桿菌;Apx郁ELISA;鑒別診斷試劑盒中圖分類號:S188文獻(xiàn)標(biāo)識碼:
4、A?文章編號:10061304(2007)06091107DevelopmentandApplicationofApx郁ELISADifferentiatingDiagnostic?Kitfor?JIAFan?1,HUJunyong?1,WANGJianyin?1,SHIBi?1,LIShuqing?2,?CHENHuanchun?1,ZHOURui?1**?(APP)isthecausativeagentofporcinecontagiouspleuropneumoniawhichcausesgreateconomiclosse
5、sinthepigindustryworldwide.Thereareatleast15serotypesofAPPsothatitisverydifficulttodiagnoseandcontrolthisdisease.AnApx郁ELISAwhichcoulddistinguishthevaccinatedpigsfromAPPinfectedoneswasestablishedbasedonthefactthatthetoxinApx郁expressesonly?inAPPinfectedpigs.Adifferenti
6、atingdiagnostickitwasdevelopedbythe?optimizationofconditions,whosespecificity,sensitivity,repeatabilityandstabilitywereevaluatedandcomparedwithananalogousELISAkit(CHEKITAPPAPX郁)fromthecompanyIDEXXandtheindirecthaemagglutinationassay(IHA).Atotalof1453clinicalserafromCh
7、ina,UK,Denmark,USA,CanadaandAustraliawerescreenedusingtheApx郁ELISAkit.TheresultsshowedthattheApx郁ELISAkithadveryhighspecificity,sensitivity,repeatability[theinterandintrabatchimprecision(CV%)<15%]andstability(verystableat4~8℃for9months).Comparedwith?CHEKITAPPAPX郁,theo
8、verallagreementratewasupto91.37%.?TheApx郁antibodypositiveratiosofsowsfromChinaFarm1(CN1),ChinaFarm2(CN2),USA,Canada,Denmark,