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《豬胸膜肺炎放線桿菌16srdna基因的克隆及序列分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、豬胸膜肺炎放線桿菌16SrDNA基因的克隆及序列分析湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)2011,(15):154～156,161HunanAculturalSciences豬胸膜肺炎放線桿菌16SrDNA基因的克隆及序列分析沈萍,王喜軍(1.湖南生物機(jī)電職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)科系,湖南長(zhǎng)沙410127;2.長(zhǎng)沙市動(dòng)物防疫監(jiān)督站,湖南長(zhǎng)沙410012)摘要:為了闡明豬胸膜肺炎放線桿菌16SrDNA基因的遺傳變異情況,選擇豬胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)的16SrDNA基因設(shè)計(jì)引物,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增
2、APP的16SrDNA基因的部分序列,將該產(chǎn)物克隆到pMD18一T載體上,重組質(zhì)粒通過菌落PCR鑒定后,對(duì)陽(yáng)性菌落進(jìn)行序列測(cè)定并進(jìn)行序列分析.結(jié)果表明:本研究得到的長(zhǎng)沙(cs)株與血清3,5,7型同源性為99.4%～99.6%,與李氏放線桿菌,脲放線桿菌,馬駒放線桿菌,莢膜放線桿菌同源性分別為97.8%,96.3%,97.3%,96.3%.該結(jié)果為APP分子流行病學(xué)調(diào)查,親緣性關(guān)系的研究提供了依據(jù),同時(shí)為APP的監(jiān)控奠定了基礎(chǔ).關(guān)鍵詞:豬胸膜肺炎放線桿菌;16SrDNA基因;克隆及序列分析中圖分類號(hào):S185文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):10
3、06—060X(2011)15—0154—03CloningandSequenceAnalysisof16SrDNAGeneofActinobacilluspleuropneumoniaeSHENPing',WANGXi—iun(1.DepartmentofanimalScience,HunanBiological&ElectromechanicalPolytechnic,Changsha410127,PRC;2.ChangshaAnimalEpidemicPreventionandSuperviseStation,Changs
4、ha410012,PRC)Abstract:Thisstudyaimedtoclarifythegeneticvariationsituationof16SrDNAofAetinobacilluspleuropneumoniae(APP).The16SrDNAgeneofAPPwasselectedtodesignprimers,thepartialsequencesof16SrDNAgeneofAPPwereamplifiedbyusingpolymerasechainreaction(PCR),andtheobtainedprodu
5、ctswereclonedintopMD18一Tvector.AftertherecombinantplasmidswereidentifiedbycolonyPCR,thepositivecoloniesweresequencedandanalyzed.TheresultsshowedthatthehomologybetweenobtainedChangshastrain(CS)andserum3,5,7typewas99.4%-99.6%;thehomologybetweenCSandActinobacilluslignieresi
6、i,Actinobacillusurea,Actinobacillusequuli,Actinobacilluscapsulatuswas97.8%,96_3%,97-3%,96_3%,respectively.TheseresultsprovidebasisforstudiesonmolecularepidemiologyandphylogeneticrelationshipofAPP,aswellaslaidthefoundationformonitoringAPP.Keywords:Actinobacilluspleuropneu
7、moniae(APP);16SrDNAgene;cloningandsequenceanalysis豬胸膜肺炎放線桿菌(APP)為革蘭氏陰性桿菌,可引起豬傳染性胸膜肺炎(porcinecontagiouspleuropneumoniae,PCP),該病由Pattison首次報(bào)道,現(xiàn)已在美國(guó),墨西哥,瑞士,丹麥,澳大利亞,加拿大,泰國(guó),韓國(guó),日本等國(guó)家廣泛流行【-21;該病在我國(guó)也早已廣泛存在,并有擴(kuò)大蔓延之勢(shì).APP血清型較多,我國(guó)豬場(chǎng)中存在的就有3,5,7,8,10型,其中以3型和7型為最多_3I.發(fā)病時(shí),病豬出現(xiàn)心衰和循環(huán)障礙,精神
8、委頓,食欲廢絕;晚期出現(xiàn)嚴(yán)重的體溫下降和呼吸困難;臨死前從嘴,鼻孑L流出血性泡沫樣液體.病豬于發(fā)病后24—36h內(nèi)死亡,死亡率高達(dá)80%-100%.16SrRNA為原核生物的一種核糖體RNA,在收稿日期:2
