氨氮脅迫對(duì)蟹免疫功能的影響

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1、第37卷第3期海洋與湖沼Vol137,No132006年5月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAMay,2006氨氮脅迫對(duì)中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)*免疫功能的影響黃鶴忠李義宋學(xué)宏王永玲楊彩根(蘇州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院蘇州大學(xué)水產(chǎn)科學(xué)研究所蘇州215006)提要在實(shí)驗(yàn)室條件下構(gòu)建不同氨氮濃度環(huán)境和養(yǎng)殖時(shí)間的組間差異,研究氨氮脅迫對(duì)中+華絨螯蟹免疫功能的影響。結(jié)果表明,中華絨螯蟹在NH4-N310mg/L10天或110mg/L20天+時(shí),其血淋巴血細(xì)胞密度極顯著地低于對(duì)照組(P<0101)。NH4-N210mg/L

2、和310mg/L無論10天或20天,血細(xì)胞吞噬百分率均分別為顯著(P<0105)和極顯著(P<0101)地低于對(duì)照+組。NH4-N310mg/L10天或210mg/L20天,血細(xì)胞吞噬指數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0105)。+NH4-N110mg/L和210mg/L分別20天時(shí),血清溶菌酶(LSZ)活力分別為顯著(P<0105)和極+顯著(P<0101)地低于對(duì)照組。NH4-N110)510mg/L10天時(shí),血清酚氧化酶(PO)活力均極+顯著(P<0101)下降;但NH4-N110)410mg/L20天時(shí),血清PO活力水平均比10天時(shí)有所+上升。NH4-N

3、310)410mg/L10天或110)210mg/L20天,以及510mg/L10天或310)510mg/L20天時(shí),超氧化物歧化酶(SOD)活力分別為顯著(P<0105)和極顯著(P<0101)地低于對(duì)照組。上述結(jié)果表明,隨著氨氮脅迫濃度的增加和脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),會(huì)引起中華絨螯蟹血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞吞噬能力、溶菌酶活力、酚氧化酶活力和超氧化物歧化酶活力等的逐漸下降,使機(jī)體非特異性免疫防御系統(tǒng)遭到損傷,同時(shí)機(jī)體清除自由基的能力下降,機(jī)體細(xì)胞和組織受到傷害甚至出現(xiàn)死亡。關(guān)鍵詞中華絨螯蟹,氨氮脅迫,血細(xì)胞,免疫功能中圖分類號(hào)Q48在集約化養(yǎng)殖系統(tǒng)中,由于養(yǎng)殖動(dòng)

4、物的排泄體質(zhì)下降、各種蟹病不斷發(fā)生。例如,傳統(tǒng)的中和殘餌的氨化作用,造成氨氮不斷積累,影響?zhàn)B華絨螯蟹靜水充氣育苗中后期即便通過大量換水殖生物的生長(zhǎng),甚至發(fā)生毒害。氨氮已成為水產(chǎn)改善水質(zhì),水中的氨氮含量仍然高達(dá)2197mg/L,是養(yǎng)殖系統(tǒng)中最普遍的毒性物質(zhì),但人們很少了解導(dǎo)致成活率下降的重要原因(王武等,1999)。目氨氮對(duì)甲殼動(dòng)物免疫系統(tǒng)的影響(Gillesetal,前還未見到國(guó)內(nèi)外有關(guān)氨氮脅迫對(duì)中華絨螯蟹2000)。已有報(bào)道表明,氨氮能對(duì)水生生物的許免疫功能影響的研究報(bào)道。本試驗(yàn)中作者采用多器官造成損傷,是十分有害的物質(zhì)(Coltetal,實(shí)驗(yàn)生態(tài)學(xué)

5、方法,研究了養(yǎng)殖中華絨螯蟹在不同1981)。中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)是目前我氨氮脅迫環(huán)境條件下10天和20天以后血淋巴血國(guó)內(nèi)陸水域中最重要的名特優(yōu)養(yǎng)殖品種之一,其細(xì)胞數(shù)、吞噬細(xì)胞吞噬能力、血清酚氧化酶(PO)養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大、養(yǎng)殖產(chǎn)量不斷提高。但許多活力、血清溶菌酶(LSZ)活性、血清超氧化物歧化養(yǎng)殖地區(qū)盲目追求產(chǎn)量、片面地增加放養(yǎng)密度和酶(SOD)5種非特異性免疫指標(biāo)的變化情況,為投餌量而忽視了養(yǎng)殖水質(zhì)的保護(hù),導(dǎo)致氨氮等有中華絨螯蟹的環(huán)境生理和免疫機(jī)制以及養(yǎng)殖水害物質(zhì)在水中大量積累,引起養(yǎng)殖蟹生長(zhǎng)緩慢、環(huán)境調(diào)控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理

6、論依據(jù)。*江蘇省科技廳社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目,BS2002016號(hào);蘇州市重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目,ZN0308號(hào)。黃鶴忠,副教授,E-mai:lhuanghz@suda.edu.cn、suda-shu@i163.com收稿日期:2005-01-10,收修改稿日期:2005-08-153期黃鶴忠等:氨氮脅迫對(duì)中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)免疫功能的影響1991材料與方法115血清酚氧化酶(PO)活力的測(cè)定111實(shí)驗(yàn)用蟹與用水以L-dopa為底物,參照(Ashida,1971)的方中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)于2004年3法進(jìn)行。將3

7、ml011mol/L的pH為610的磷酸緩月20日取自江蘇省常熟市水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)池塘養(yǎng)殖沖液與011ml0101mol/L的L-dopa及011ml待測(cè)的健康個(gè)體,體重(65132?3146)g,至分組實(shí)驗(yàn)血清于室溫下混勻,每次間隔1min讀取在490nm前在養(yǎng)殖生態(tài)室PVC水槽內(nèi)適應(yīng)性暫養(yǎng)2周,暫波長(zhǎng)下的光吸收值。以A490對(duì)反應(yīng)時(shí)間作圖。以養(yǎng)期間水溫逐漸升至21e并保持恒定,氣石連續(xù)試驗(yàn)條件下A490每分鐘增加01001定義為1個(gè)酶充氣,每天吸污換水1/4池水,餌料投喂采取上活力單位(Unit)。午為泡軟的玉米粒,傍晚為新鮮洗凈的螺螄肉,116血清溶菌

8、酶(LSZ)活力的測(cè)定確保攝食充足。養(yǎng)殖環(huán)境安靜,無攀爬出水面和取溶壁微球菌(Micrococ