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《一貫煎誘導骨髓間充質(zhì)干細胞分化為肝細胞樣細胞的實驗研究-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國中西醫(yī)結(jié)合雜志2014年3月第34卷第3期CJITWM，March2014，Vo1．34，No．3一貫煎誘導骨髓問充質(zhì)干細胞分化為肝細胞樣細胞的實驗研究平鍵陳紅云。周揚成揚徐列明，摘要目的體外實驗觀察一貫煎誘導分離培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bonemarrowmesen—chymalstemcell，BMSC)定向分化肝細胞的作用。方法采用全骨髓貼壁法分離原代大鼠BMSC，第3代細胞采用流式細胞儀分析表面細胞因子、誘導分化為脂肪細胞鑒定其干細胞特征；采用肝細胞生長因子聯(lián)合成纖維細胞生長因子和一貫煎含藥血清2種誘導方案連續(xù)培養(yǎng)BMSC共21天
2、，PCR檢測細胞甲胎蛋白(僅一fetoprotein，AFP)、白蛋白(albumin，AIb)、肝細胞核因子4or(hepatocytenuclearfactor4e，HNF4僅)mRNA表達情況，細胞免疫熒光檢測細胞AFP和細胞角蛋白18(cytokeratin18，CK18)的表達，染色高碘酸一希夫反應法觀察細胞糖原形成，Westernblot法檢測細胞CK18、Wnt35、oL．catenin蛋白的表達情況。結(jié)果全骨髓貼壁法分離的BMSC高表達白細胞分化抗原(clusterofdifferentiation，CD)90、29、44，低表達
3、CD34和CD11b，成脂誘導2周后油紅O染色可見大量脂滴。一貫煎藥物血清和細胞因子誘導均可提高BMSC表達AIb、AFP、HNF4o~mRNA表達水平，促進CK18蛋白表達，誘導21天后可檢測到AFP和CK18的表達，可見細胞合成糖原顆粒，觀察到BMSC內(nèi)Wnt3or和B—catenin表達下調(diào)。結(jié)論一貫煎可誘導大鼠BMSC向肝細胞樣細胞分化，其機制與下調(diào)Wnt／13．catenin信號通路有關(guān)。關(guān)鍵詞一貫煎；骨髓間充質(zhì)干細胞；轉(zhuǎn)分化EfectofYiguanDecoctiononDiferentiationofBoneMarrowMesenc
4、hymaIStemCellsintoHepa—tocyte-likeCells：anExperimentaIResearchPINGJian‘’。，CHENHong—yun。，ZHOUYang。，CHENGYang?！?，andXULie—ming1InstituteofLiverDiseases，ShuguangHospitalAffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai(201203)，China；2KeyLaboratory，Min-istrvofEdu
5、cationonLiverandKidneyDiseases。ShanghaiUniversityofTraditiona
6、ChineseMedicine。Shanghai(201203)，China；3DepartmentofTraditionalChineseMedicine，ChanghaiHospital，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai(200433)，China；4DepartmentofLiverCirrhosis，ShuguangHos-pitalAffiliatedtoShangh
7、aiUniversityofTraditionafChineseMedicine。Shanghai(201203)，ChinaABSTRACTObiectiveToobservetheeffectofYiguanDecoction(YGD)ondi仟erentiationofbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)intohepatocyte—likecellsfnvitro．MethodsRatBM—SCswereisolatedusingwholebonemarrowadherentmethod．Thepro
8、pertiesofBMSCswereidentifiedbyanalyzingtheexpressionofsurfacecytokinesbyflowcytometry．Thethirdpassagecellsweredifferentia—tedintofatcellstoidentifytheirfeatures．BMSCswereincubatedwithhepatocytegrowthfactor(HGF)plusfibroblastgrowthfactor4(FGF4)orYGDcontainingserumYGDfor21days．
9、ThemRNAexpressionofor．．fetoprotein(AFP)，albumin(AIb)，andhepatocytenu
