三疣梭子蟹蛻殼后肝胰腺消化酶活力變化特征研究-論文.pdf

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1、第31卷第4期海洋學研究Vo1.31NO.42013年12月JoURNALoFMARINESCIENCESDec.,2013文章編號:1001—909X(2o13)04—0074—06三疣梭子蟹蛻殼后肝胰腺消化酶活力變化特征研究林鵬,劉華,余作奔,母昌考,宋微微,李榮華,王春琳(寧波大學海洋學院,浙江寧波31521I)摘要:消化酶是反映機體消化生理狀況及對營養(yǎng)物質(zhì)利用能力的重要指標。本文對三疣梭子蟹蛻殼后不同時間肝胰腺消化酶活力進行了研究,結(jié)果顯示,蛻殼后肝胰腺中胃蛋白酶、胰蛋白酶和淀粉酶活力在第4~6天達到最高;脂肪酶活力在第6天時達到最高;纖維素酶活力

2、總體較低,在第10~12天達到最高;幾丁質(zhì)酶活力在蛻殼后第4天時酶活力最高。研究表明,三疣梭子蟹蛻殼后,胰蛋白酶和胃蛋白酶活力相對較高,而纖維素酶和淀粉酶活力較低,可能與三疣梭子蟹本身的肉食性特征有關;另外,整個實驗期間,三疣梭子蟹肝胰腺脂肪酶活力較低,可能與測定條件有一定的關系。與其他時間點相比,蛻殼后4~6d(蛻殼周期中間階段)各種酶活力處于較高水平,表明此階段對食物的消化能力比其他時間更強,這為養(yǎng)殖過程中餌料的合理投喂提供了參考依據(jù)。關鍵詞:三疣梭子蟹;蛻殼;肝胰腺;消化酶活力中圖分類號:$968.25文獻標識碼:A力;胡毅等]先后報道了金屬離子和N

3、aC1對三疣0引言梭子蟹消化酶活力的影響。關于蛻殼周期中消化酶蛻殼是節(jié)肢動物和其他相關物種生命周期中的活力的研究,未見相關報道。由于肝胰腺是甲殼動物必須環(huán)節(jié)l-】],是個體正常生長的需要。蛻殼過程伴隨主要的消化器官,是消化酶的主要來源。因此,本甲殼動物個體發(fā)育的始終_[2]。三疣梭子蟹蛻殼周期研究以蛻殼后三疣梭子蟹肝胰腺為材料,進行消化酶分為蛻殼后期、蛻殼間期、蛻殼前期和蛻殼期]。蛻活力變化分析,以期為三疣梭子蟹養(yǎng)殖過程不同階段殼前期,三疣梭子蟹停止攝食,直到蛻殼后期重新開的營養(yǎng)供給提供科學依據(jù)。始攝食,期間主要依靠體內(nèi)儲存的物質(zhì)進行能量供1材料與方法給。

4、消化酶活性是反映動物攝食、營養(yǎng)條件、生理狀況的指標,是聯(lián)系動物營養(yǎng)狀態(tài)和生長發(fā)育的中間指1.1實驗材料標,其活性的高低直接影響了動物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收實驗用三疣梭子蟹為寧波鑫億鮮活水產(chǎn)有限公利用程度]。因此,進行蛻殼周期中三疣梭子蟹消化司人工養(yǎng)殖,于2012年8月獲得,體重為25~30g。酶活力研究將有助于了解其蛻殼周期的營養(yǎng)代謝特實驗期間,利用單個體筐養(yǎng)方式進行三疣梭子蟹人工征。潘魯青等報道了三疣梭子蟹幼體消化酶活繁育苗種的養(yǎng)殖,以冷凍保存的野雜魚為餌料,每日收稿日期:2013—04-01修回日期:2013-1卜O5基金項目:國家自然科學基金項目資助(4I

5、106123);浙江省公益性技術(shù)應用研究計劃項目資助(2011C33025);浙江省海水養(yǎng)殖重點科技創(chuàng)新團隊項目資助(2010R50025—08);國家富民強縣科技專項資助(2011F012);浙江省水產(chǎn)育種專項資助(2012C12907—3);浙江省教育廳高??蒲杏媱濏椖抠Y助(Z201121258);寧波市農(nóng)業(yè)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)重點項目資助(2o11c92014);寧波市海蟹類產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新團隊項目資助(201IB81003)作者簡介:林鵬(1989一),女,湖南婁底市人,主要從事蝦蟹養(yǎng)殖技術(shù)研究。*通訊作者:母昌考,副教授,E—mail:muchangkao@nb

6、u.edu.cn林鵬等:三疣梭子蟹蛻殼后肝胰腺消化酶活力變化特征研究·75·投喂量為體重的3~5(蛻殼前期停止攝食,不需變化如圖2所示,蛻殼完成后三疣梭子蟹肝胰腺中投喂,蛻殼完成12h后開始投喂)。養(yǎng)殖過程中觀察胰蛋白酶活力呈先上升后下降的趨勢,蛻殼后4~6記錄三疣梭子蟹的生長及蛻殼情況,分別于蛻殼完成d達到最高,到第12天(蛻殼前期),下降到相對較后0,2,4,6,8,1O和12d(蛻殼完成至下一次蛻殼開低的水平。始前)取肝胰腺(雄雌各3只),用液氮保存帶回實驗2.2三疣梭子蟹蛻殼后脂肪酶活力變化情況室進行消化酶活力測定。三疣梭子蟹蛻殼后第4天,脂肪酶活

7、力最低,而1.2測定方法到第6天時達到最高,而后降低,從第8天至第12取肝胰腺組織1g左右,按質(zhì)量(g):體積(mL)天,活性一直維持在較低水平(圖3)。一1:9的比例加入4℃冷卻的勻漿緩沖液,冰浴條2.3三疣梭子蟹蛻殼后碳水化合物酶(淀粉酶、纖維件下勻漿,2500r/rain離心10min,取上清液進行酶素酶和幾丁質(zhì)酶)活力變化情況活力測定。幾丁質(zhì)酶活力測定樣品制備勻漿緩沖液三疣梭子蟹肝胰腺淀粉酶活力在剛蛻殼后o~2為0.1mol/LPBS(pH7.O),其余樣品處理用質(zhì)量分d內(nèi)處于較低水平,顯著低于其他取樣時間;在蛻殼數(shù)為0.9的生理鹽水作勻漿緩沖液。

8、胰蛋白酶、胃后4~6d酶活力達到最高,其后又有所下降(圖4)。蛋白

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