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1、宋福來(lái)等：殼聚糖即型水凝膠的體內(nèi)代謝研究文章編號(hào)：1001—9731(2014)14—14057—04殼聚糖即型水凝膠的體內(nèi)代謝研究宋福來(lái)，馬海楠，韓寶芹，邵凱，劉萬(wàn)順(1．中國(guó)海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東青島266003；2．青島博益特生物材料有限公司，山東青島266101)摘要：殼聚糖及其衍生物作為生物醫(yī)用高分子材2實(shí)驗(yàn)料已被廣泛應(yīng)用，研究其在動(dòng)物體內(nèi)的吸收降解是此類生物醫(yī)用材料應(yīng)用于人體的必要前提。殼聚糖即型2．1材料儀器水凝膠是以殼聚糖為主要材料制備的新型生物醫(yī)用材殼聚糖即型水凝膠(chitosan
2、basedinsituform—料，可在體內(nèi)降解吸收。以異硫氰酸酯(FITC)標(biāo)記法inghydrogel，ChG)，簡(jiǎn)稱殼聚糖水凝膠，實(shí)驗(yàn)室自制；研究了該水凝膠經(jīng)大鼠腹腔注射后的吸收、降解和分異硫氰酸酯熒光素(fluoresceinisothiocyanate，布，為該水凝膠應(yīng)用于體內(nèi)提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果FITC)，Sigma公司；熒光標(biāo)記的殼聚糖即型水凝膠顯示，殼聚糖即型水凝膠經(jīng)大鼠腹腔注射后能夠較快(FITC—ChG)，實(shí)驗(yàn)室制備，其中對(duì)改性殼聚糖進(jìn)行的被腹腔吸收，并經(jīng)血液轉(zhuǎn)運(yùn)至各代謝器官，在肝臟
3、內(nèi)有FITC標(biāo)記量為137mg／g；Wistar大鼠，雌雄各半，一過(guò)性的積累，在其它臟器內(nèi)分布較少，其主要代謝途(200±20)g，96只，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)徑是血液一肝臟一腎臟一尿液，在17d時(shí)，通過(guò)此途動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXK魯20080002；RF一530PC熒徑排出的量占注射量的88，排出體外的分子量均小光分光光度計(jì)，日本Shimadzu；Breeze1525高效液相于10kD。色譜系統(tǒng)，日本Shimadzu；磷酸鹽緩沖液(phosphate關(guān)鍵詞：殼聚糖；水凝膠；代謝bufferso
4、lution，PBS)，0．02mol／L，PH值一8．0。中圖分類號(hào)：R318．08i0629．9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A2．2實(shí)驗(yàn)方法DoI：10．3969／j．issn．1001—9731．2014．14．0112．2．1樣品濃度與熒光強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線用熒光分光光度計(jì)測(cè)定不同稀釋倍數(shù)的熒光素1引言(FITC)以及熒光素標(biāo)記的殼聚糖即型水凝膠(FITC殼聚糖是以D一氨基葡萄糖為結(jié)構(gòu)單元的天然高ChG)的熒光強(qiáng)度(E一490nm，E一520nm)，制作分子氨基多糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，F(xiàn)ITC溶液濃度
5、以及FITC—ChG溶液濃度與熒光強(qiáng)度在生物醫(yī)用材料領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景j。本實(shí)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。驗(yàn)室在殼聚糖改性基礎(chǔ)上制備了一種殼聚糖即型水凝2．2．2殼聚糖即型水凝膠的體內(nèi)代謝膠，可作為體內(nèi)可吸收止血材料。作為一種新型可吸實(shí)驗(yàn)大鼠分為3組，空白對(duì)照組、FITC組和殼聚收醫(yī)用材料，研究其在體內(nèi)的吸收代謝過(guò)程是必要的。糖水凝膠組(簡(jiǎn)稱水凝膠組)。空白對(duì)照組不作任何給多糖類高分子物質(zhì)由于結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣，大多無(wú)特藥處理，F(xiàn)ITC組的每只大鼠腹腔注射1mL濃度為征性色譜吸收，定性定量檢測(cè)手段相對(duì)較少，而放射性0．4m
6、g／mI的FITC溶液，水凝膠組每只大鼠腹腔注同位素標(biāo)記法的技術(shù)要求則較高，這些都在一定程度射1mLFITC標(biāo)記的殼聚糖即型水凝膠，F(xiàn)ITC組和上限制了多糖類物質(zhì)及制品的體內(nèi)代謝研究水平。水凝膠組分別在6，12h，1，2，3，4，5，6，7，9，11，14，18熒光素標(biāo)記法是抗體、酶等蛋白物質(zhì)常用的標(biāo)記研究和21d處設(shè)置檢測(cè)點(diǎn)采集實(shí)驗(yàn)樣品，空白對(duì)照組在最方法，由于殼聚糖分子中存在大量的NH，能夠與異后檢測(cè)點(diǎn)時(shí)采集樣品。另將注射剩余的FITC溶液和硫氰酸酯等熒光素分子聯(lián)接反應(yīng)，目前已經(jīng)越來(lái)越多FITC標(biāo)記殼
7、聚糖水凝膠溶液在室溫下避光保存(保存的被應(yīng)用于殼聚糖類物質(zhì)的標(biāo)記與研究。液)，與各檢測(cè)點(diǎn)采集的樣品一同進(jìn)行分析檢測(cè)，以排本文采用異硫氰酸酯熒光素(FITC)標(biāo)記法，研究除熒光衰減的干擾。了殼聚糖即型水凝膠在大鼠體內(nèi)的代謝情況，測(cè)定分在各檢測(cè)點(diǎn)，按以下方法采集樣品：析了該水凝膠在大鼠腹腔內(nèi)的吸收、分布和排泄情況，尿液：3組中各隨機(jī)選擇6只大鼠作為21d檢測(cè)為該多糖類水凝膠制品在體內(nèi)的應(yīng)用提供理論支持。點(diǎn)，單獨(dú)飼養(yǎng)在代謝籠中，每隔12h采集一次尿液。收集尿液記錄其體積，5000r／min離心，保存上清液。*基
8、金項(xiàng)目：國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)資助項(xiàng)目(2014AA093605)收到初稿日期：2013一l1一O6收到修改稿日期：20140122通訊作者：劉萬(wàn)順，E—mail：WanshunIiu@hotmail．CON作者簡(jiǎn)介：宋福來(lái)(1985一)，男，山東德州人，在讀博士，師承劉萬(wàn)順教授，從事海洋生物醫(yī)用材料研究。14o58助舷材料2014年第14期(45)卷腹腔液：大鼠腹腔中注射5mLPBS，沖洗充分后吸為原注射量的0
