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1、利用RIL群體對(duì)精米氨基酸含量的QTL定位 摘要：通過(guò)一個(gè)重組自交系及已構(gòu)建好的遺傳圖譜，研究稻米氨基酸含量的ＱＴＬ定位。結(jié)果表明，通過(guò)Ｗｉｎｑｔｌｃａｒｔ軟件發(fā)現(xiàn)多個(gè)控制不同氨基酸合成的區(qū)段，其中位于第一染色體的ＲＭ２５９～ＲＭ５８０片段影響了多種氨基酸的含量。通過(guò)氨基酸含量相關(guān)ＱＴＬ定位的研究，為將來(lái)的分子標(biāo)記輔助選擇改良稻米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)打下了基礎(chǔ)?！ ￡P(guān)鍵詞：水稻；重組自交系；氨基酸；賴(lài)氨酸；數(shù)量性狀基因座；營(yíng)養(yǎng)品質(zhì) 中圖分類(lèi)號(hào)：Ｓ７８６文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８11416－340
2、8-04 ?。桑洌澹睿簦椋妫椋悖幔簦椋铮睿铮妫眩裕蹋妫铮颍粒恚椋睿铮粒悖椋洌茫铮睿簦澹睿簦椋睿停椋欤欤澹洌遥椋悖澹猓遥桑獭 。冢龋希眨兀酰螅瑁澹睿?，ＨＥＹｕ－ｑｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ：TheｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｌｏｃｉanalysisforａｍｉｎｏａｃｉｄcontentinＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．wascarriedoutaccordingtotheｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅanditsgeneticmap.Theresultsshowed
3、thatseveralsectionsforcontrolingdifferentａｍｉｎｏａｃｉｄs’sythesiswerefoundbysoftwareofWinqtlcart.TheＱＴＬｉｎｔｈｅｉｎｔｅｒｖａｌｏｆＲＭ２５９～ＲＭ５８０ｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ１ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄsomecontentsofａｍｉｎｏａｃｉｄs．Asaresult，rｅｓｅａｒｃｈｉｎｇonＱＴＬｏｆａｍｉｎｏａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔprovidedａｐａｔｈｗａｙｔｏｉｍｐｒｏｖｅｎｕｔｒｉｔｉｏｎｔ
4、ｒａｉｔｏｆｒｉｃｅｂｙmarker-assistedselection． ?。耍澹鳎铮颍洌螅海希颍幔螅幔簦椋觯幔蹋?；ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅ；ａｍｉｎｏａｃｉｄ；lｙｓ；ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｌｏｃｉ；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎｔｒａｉｔ 水稻是我國(guó)主要糧食作物之一，隨著人民生活水平的提高，人們對(duì)稻米的營(yíng)養(yǎng)功能越來(lái)越重視。人體主要通過(guò)食物攝取所需的氨基酸，尤其Ｌｙｓ在谷物中含量較低，且在加工過(guò)程中易被破壞而缺乏，因此被稱(chēng)為第一限制性氨基酸，也是衡量稻米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的
5、重要指標(biāo)［１，２］。但是由于營(yíng)養(yǎng)性狀的復(fù)雜性，容易受到環(huán)境的影響以及測(cè)定方法的復(fù)雜性，對(duì)于稻米氨基酸含量的改良一直比較困難。隨著分子標(biāo)記及遺傳圖譜的研究深入［３，４］，復(fù)雜性狀的遺傳研究成為可能［５，６］。同時(shí)由于ＱＴＬ定位的準(zhǔn)確性很高，因此一些科學(xué)家建議將初步定位的ＱＴＬ直接用于育種，大幅降低育種成本［７，８］。利用中國(guó)香稻以及川香２９Ｂ為親本構(gòu)建重組自交系群體，研究控制精米氨基酸含量的ＱＴＬ，為稻米氨基酸含量的遺傳研究打下基礎(chǔ)，也為將來(lái)的分子標(biāo)記輔助選擇改良稻米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)提供理論依據(jù)。 ?。辈牧?/p>
6、與方法 １．１試驗(yàn)材料及田間管理 研究所利用的群體是由水稻親本材料川香２９Ｂ和中國(guó)香稻雜交后利用單粒傳培育的２３５個(gè)Ｆ９、Ｆ１０重組自交系。親本之一川香２９Ｂ是由四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院培育而成的優(yōu)良保持系，其不育系川香２９Ａ具有香味，開(kāi)花習(xí)性好和異交結(jié)實(shí)率高等特點(diǎn)。中國(guó)香稻是中國(guó)水稻研究所培育而成的香稻優(yōu)質(zhì)晚秈品種。 水稻親本材料川香２９Ｂ和中國(guó)香稻及其雜交后利用單粒傳培育的２３５個(gè)Ｆ９、Ｆ１０重組自交系分別于２００８年、２００９年種植于華中農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)，每個(gè)株系種植１行，每行１０株，株行距為
7、１６．５ｃｍ×２６．４ｃｍ?！ 。保残誀畹目疾臁 。保玻泵追鄣闹苽涞久捉?jīng)自然干燥后室溫保存３個(gè)月，于４℃冰箱中保存。?。玻担缱笥业牡竟让摎?，碾出精米，再打成精米粉，將米粉過(guò)１００目篩，裝入封口塑料袋中，置于－２０℃冰箱中保存。 ?。保玻簿装被岬臏y(cè)定樣品須保證均勻，過(guò)６０～８０目篩。根據(jù)樣品粗蛋白質(zhì)含量，確定大體稱(chēng)樣量，稱(chēng)取５０～１００ｍｇ左右樣品于水解管中，加入６～８ｍＬ的６ｍｏｌ／Ｌ鹽酸。液氮冷卻，充入氮?dú)?，封口。１１０℃烘箱處理２２ｈ。消化后的樣品過(guò)濾后，去離子水定容至５０ｍＬ。
8、?。玻埃唉蹋虡悠?，真空干燥后加入２００μＬ０．０２ｍｏｌ／Ｌ的鹽酸，振蕩均勻。離心后吸１５０μＬ上清液于內(nèi)插管內(nèi)，以氨基酸測(cè)定儀檢測(cè)?！ 。保尺B鎖圖譜和ＱＴＬ的定位 利用Ｍａｐｍａｋｅｒ／ＥＸＰ３．０軟件構(gòu)建了一張包含１４４個(gè)ＳＳＲ標(biāo)記的分子標(biāo)記遺傳連鎖圖譜［９－１２］。以構(gòu)建好的分子標(biāo)記遺傳連鎖圖譜為基礎(chǔ)，利用ＷｉｎＱＴＬＣａｒｔ軟件對(duì)１７種氨基酸性狀進(jìn)行ＱＴＬ定位。采用ＬＯＤ值２．０作為閾值來(lái)判斷ＱＴＬ存在與否，若標(biāo)記區(qū)間ＬＯＤ≥２．０則認(rèn)為該區(qū)間存在１個(gè)控制該性狀的ＱＴＬ
