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1、中國奄讓2014，35(3)：23-26ChinaSeticuIture·科學(xué)試驗(yàn)·柞蠶蛹蟲草水提物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖和凋亡的影響岳冬梅王林美李樹英(遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大連生物技術(shù)研究所，遼寧大連116024)摘要研究柞蠶蛹蟲草水提物(Aqueousextractfromcordycepmilitarisofantheraeapernyi，AEoAPC)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF一7生長(zhǎng)抑制與凋亡的作用。將不同濃度的AEoAPC分別作用于人乳腺癌細(xì)胞MCF一724、48、72h后，應(yīng)用倒置相差顯微鏡觀察人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的形態(tài)變化，噻唑藍(lán)比色法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制效應(yīng)，流
2、式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期變化及凋亡率。結(jié)果表明：AEoAPC能顯著抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF一7的增殖，且在一定的濃度范圍內(nèi)呈時(shí)間和濃度的依賴性；形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞形狀不規(guī)則、變暗、皺縮；FCM檢測(cè)結(jié)果顯示，作用72h后G0一G1期(DNA合成前期)的細(xì)胞分布有所增加，使細(xì)胞阻滯于G期(DNA合成后期)和S期(DNA合成期)；0．8g／LAEo—APC在24、48、72h凋亡率分別為8．65％、14．20％、26．30％，其凋亡程度與時(shí)間呈正相關(guān)。說明AEoAPC能明顯抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF一7的生長(zhǎng)，誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡。關(guān)鍵詞柞蠶；蛹蟲草；抑制作用；乳腺癌細(xì)胞；凋亡；細(xì)胞周期中圖分
3、類號(hào)$885．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007—0982(2014)03—0023—05乳腺癌在我國發(fā)病率較高且近年來有逐漸增加草的化學(xué)成分、營(yíng)養(yǎng)成分和藥用功能與冬蟲夏草非的趨勢(shì)¨，臨床上治療癌癥主要采用放療和化療，常相似，且蟲草素等主要活性物質(zhì)的含量高于野生其手段除了殺傷腫瘤細(xì)胞以外，對(duì)人體的免疫系統(tǒng)冬蟲夏草。目前，用蛹蟲草治療惡性腫瘤的研究已也會(huì)造成很大的傷害，因而尋找療效好、副作用低的有報(bào)道l1卜j，那么柞蠶蛹蟲草水提物(Aqueousex—治療藥物是近年來科研工作者研究的熱點(diǎn)之一l2J。tractfromcordycepmilitarisofantheraeapern
4、yi，AEo—蛹蟲草菌寄生在鱗翅目、鞘翅目、雙翅目等昆蟲蛹體APC)體外抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖及誘導(dǎo)凋上生成的～種蟲草混合體，隸屬真菌門(Eumycota；亡的作用如何，我們對(duì)其進(jìn)行了探討，試驗(yàn)結(jié)果如Mycobionta)、子囊菌亞門(Ascomycotina)、麥角菌下目(Clavicipitales)、麥角菌科(Clavicipitaceae)、蟲草1材料和方法屬(Cordyceps)，是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材，具有補(bǔ)肺益腎等多種功效，是扶正祛邪的良藥之一?，F(xiàn)代藥1．1試驗(yàn)材料理學(xué)研究證明，蛹蟲草主要通過調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功試驗(yàn)材料：人乳腺癌細(xì)胞株MCF一7，由大連醫(yī)
5、能而發(fā)揮其生物學(xué)活性效應(yīng)_3j。遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)科大學(xué)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室提供；柞蠶蛹蟲草，由遼寧省農(nóng)業(yè)院大連生物技術(shù)研究所柞蠶產(chǎn)品研發(fā)實(shí)驗(yàn)室成功地科學(xué)院大連生物技術(shù)研究所蟲草開發(fā)研究室培養(yǎng)提建立了以柞蠶蛹為宿主，大規(guī)模人工培育柞蠶蛹蟲供。草的技術(shù)體系[5-6]。檢測(cè)分析表明，柞蠶蛹蟲主要試劑和儀器：RPMI一1640培養(yǎng)液，購自GIBCO公司；胎牛血清，購自蘭州民海生物工程有收稿日期：2014-06-17：修回日期：2014—07一O1限公司；二甲基亞砜(DMSO)，購自天津科密歐試劑資助項(xiàng)目：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(編號(hào)CARS一22)。公司；染色劑噻唑藍(lán)(M1Tr)，購自S
6、igma公司。HE—作者簡(jiǎn)介：岳冬梅(1978一)，女，內(nèi)蒙古敖漢旗，碩士，助理研究員。RAcell150型CO培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限Tel：13190157575，E—mail：dongmeiyue78@163．eom公司產(chǎn)品；SW—CJ-IF型超凈工作臺(tái)，蘇州蘇凈集團(tuán)通訊作者：李樹英(1959一)，男，研究員。Tel：13804965751．E．mail：13804965751@163．eom產(chǎn)品；BIO—RAD型酶標(biāo)儀，奧地利Biocell公司產(chǎn)齲黼—瞄嘲注—嘲■———精■幽■■■■■—■—■■■_中國唇業(yè)品；LEICADM13000B型相差倒置熒光顯微鏡，德后
7、，1000r／rain離心5rain，棄上清液，重新懸浮于國Leica公司產(chǎn)品；JEM一1200EX型透射電子顯微1mL、4預(yù)冷的固定液(固定液組成：1．1g／L葡萄鏡，JEOL公司產(chǎn)品；AnkeTDL80—2B型臺(tái)式離心糖、8．0g／LNaC1、0．4g／LKC1、0．39g／LNa3機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品產(chǎn)品；EPICS—XL型流PO4·12H20、0．15g／LKH2PO4、0．08g／LMgSO4’式細(xì)胞儀，COULTER公司產(chǎn)品。7H0、0．16g／i=CaC1·2H0)中同定。緩慢加入1．2試驗(yàn)方法
