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《抗牛病毒性腹瀉病毒單克隆抗體的制備及雙抗夾心ELISA檢測方法的建立.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第34卷第12期中國預防獸醫(yī)學報Vo1．34．NO．122012年12月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineDec．2012doi：10．3969~．issn．1008—0589．2012．12．10抗牛病毒性腹瀉病毒單克隆抗體的制備及雙抗夾心ELISA檢測方法的建立蔣穎，，林燕清，"，陶潔，孟祥升，段小麗，王娟，王銀，張信軍，王建業(yè)，朱國強(1．揚州大學獸醫(yī)學院，江蘇揚州225009；2．中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京100081；3．浙江諾倍威生物技術有限公司，浙江杭州310018)摘要：為建
2、立牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)~；bL夾心ELISA檢測方法，本研究將BVDV890病毒株(BVDV．21濃縮并純化后免疫BALB／c小鼠，經(jīng)常規(guī)技術進行細胞融合并篩選得到一株穩(wěn)定分泌IgG的雜交瘤細胞株，命名為3F9。以BVDV單克隆抗體(MAb)IgM為捕獲抗體，生物素標記的3F9為檢測抗體，初步建立BVDV特異的雙抗體夾心ELISA檢測方法(BAS．ELISA)。采用建立的BAS．ELISA方法檢測35份臨床病牛血清樣品，檢出陽性樣本13份；與RT．PCR的符合率達到94．29％；表明本研究所建立的BAS．ELISA方法可用于BVDV感
3、染的臨床診斷，為BVDV的免疫學研究奠定了基礎。關鍵詞：牛病毒性腹瀉病毒；E2蛋白；單克隆抗體；雙抗體夾心ELISA中圖分類號：$852．65文獻標識碼：A文章編號：1008．0589(2012)12．0972．04PreparationofmonoclonalantibodiesagainstbovineviraldiarrheavirusandthedoubleantibodysandwichELISAdevelpomentJIANGYingt，LINYan—qing1,3十，TAOJie，MENGXiang—sheng，DUANXiao
4、．1．．i，WANGJuan，WANGYin，ZHANGXin-jun，WANGJian—ye，ZHUGuo-qiang(1．CollegeofVeterinaryMedicine，YangzhouUniversity，Yangzhou225009，China；2．ChinaInstituteofVeterinaryDrugsControl，Beijing100081，China；3．Zh~iangEbvacBio—techCo．Ltd．，Hangzhou310018，China)Abstract：Toestablishadoublemono
5、clona1antibodyrMAb)一mediatedsandwichELISA(DAS．ELISA)fordetectionofbovineviraldiarrheavirus(BVDV)，theMAb3D8(IgM)andbiotin—labelled3F9(IgG)wereusedascaptureantibodyanddetectionantibodyrespectivelyafterobtainingahybridomacelllinestablysecretingantibody(3F9)．Thirty-fiveclinical
6、lysuspectedserasamplesweredetectedbythismethodandtheresultsof13sampleswerepositive．ComparedwithRT．PCRintheparalledexperimentwith11samplespositive，thecoincidenceratewas94．25％．ItissuggestedthattheDAS-ELISAwasapotentiallyvaluablemethodwithhighsensitivityandspecificityagainstBV
7、DV．KeyWOrds：bovineviraldiarrheavirus；E2protein；monoclonalantibody；sandwichELISA*Correspondingauthor；tEqualcontributors收稿日期：2012．06．09基金項目：江蘇中美國際科技合作項目(BZ2005032)；江蘇省農(nóng)業(yè)支撐項目(BE2008363)；重大動物疫病防控技術弓進(國家農(nóng)業(yè)部948計劃，201003012)十共同第一作者：蔣~,(1982一)，女，江蘇溧陽人，碩士研究生，主要從事病原微生物致病機理和免疫機理研究：林燕清
8、(1984‘)，女，福建福州人，碩士研究生，主要從事病原微生物致病機理和免疫機理研究．通信作者：E-mail：yzgqzhu@hotrnail．corn；yzgqz
