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《檢測犬瘟熱病毒的單克隆抗體膠體金試紙條的制備.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)2011，19(2)：26—30ChineseJoumalofAnimaIInfie：ctiousDiseases·研究論文·檢測犬瘟熱病毒的單克隆抗體膠體金試紙條的制備房超，張泉，易海華，吳萍蘭，徐波，吳亞力(1．徐州出入境檢驗(yàn)檢疫局，徐州221006：2．揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，揚(yáng)州225009)摘要：將從水貂中分離的犬瘟熱病毒(Caninedistempervirus，CDV)HB株經(jīng)培養(yǎng)和純化后免疫小鼠，制備分泌抗CDV—HB的雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為2El和7F3，ELISA測定腹水效價(jià)均大于l0。亞類鑒定結(jié)果表明單抗2El的分子亞類為IgM，7F3的分子亞類
2、為lgG1，間接免疫熒光試驗(yàn)表明，這兩株單抗均可以與CDV-HB特異性結(jié)合。采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒并標(biāo)記2E1單克隆抗體，獲得檢測貂犬瘟熱病毒抗原的膠體金免疫層析試紙，且鑒定證明制備的檢測CDV的膠體金試紙條具有良好的的特異性。關(guān)鍵詞：犬瘟熱病毒；單抗；膠體金試紙條中圖分類號(hào)：$858．292．265．96文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1674—6422(2011)02—0026—05DEVELoPMENToFCoLLoIDALGoLDIMMUNoCHRoMAToGRAPHICTESTSTRIPBYMoNoCLoNALANTIBoDYAGAINSTCDVFANGChao’，Z
3、HANGQuan，YIHai—hua，WUPing—lan，XUBo，WUYa—lifiXuzhouEntry-一ExitInspectionandQuarantineBureau．JiangS~'uProvince，Xuzhou221006．China；2．YangZhouUniversiO；CollegeoJVeterinaryMedicine．Yangzhou225009．Chinn)Abstract：Thecaninedistempervirus(CDV-HB)isolatedfromminkwasculturedandpurified．Thesplenocytesfrom
4、miceimmunizedwithpurifiedCDV-HBwerefusedwithSP2／0myelomacells．PosflivehybridomawasscreenedbyindirectELISA．a(chǎn)ndtwomonoclonalantibodiesagainstCDV-HBweregeneratedanddesignatedas2Eland7F3．TheELISAtitersofthetwOmltibodiesinascitesweremorethan10．Thesubtypeidentificationoftheantibodiesdemonstratedthat
5、the2E1belongedtoIgM．a(chǎn)ndthe7F3waslgG1ThespecificinteractionbetweenCDV-HBvirusandmonoclonal【antibodieswascertifiedbyindirectIFATheMAbof2Elwaspurifiedand1abeledwithgoldparticles，whichwaspreFaredbysodiumcitratemethod，todevelopacolloidMgoldimmuno—chrolnatOgraphicteststripforCDVdetection，andtheresul
6、tsindicatedthatthestriphadthegoodspecificityforCDVdetection．Keywords：Caninedistempervirus；monoclonalantibody；colloidalgoldimmunochromatographicteststrip犬瘟熱(caninedistemper，CD)是由傳染性犬的不足，導(dǎo)致動(dòng)物感染CDV的診斷延誤，錯(cuò)過適瘟熱病毒(Caninedistempervirus，CDV)引起的急宜的控制時(shí)機(jī)，會(huì)給毛皮經(jīng)濟(jì)動(dòng)物產(chǎn)業(yè)帶來巨大損性、高度接觸性傳染病，目前已成為危害我乃至失，嚴(yán)重阻礙該產(chǎn)業(yè)的順利發(fā)展
7、。因此，對(duì)水貂犬全世界養(yǎng)犬業(yè)、皮毛動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)和野生動(dòng)物保護(hù)業(yè)瘟熱進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的檢驗(yàn)對(duì)水貂養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)最嚴(yán)重的疫病之一隨著經(jīng)濟(jì)動(dòng)物倒養(yǎng)業(yè)的集約展非常重要?；⒁?guī)?；?jīng)濟(jì)動(dòng)物疫病尤其是水貂犬瘟熱等傳CDV的實(shí)驗(yàn)室診斷具有怏速、準(zhǔn)確和特異性染病會(huì)形成暴發(fā)流行，同時(shí)，由于缺乏有效的現(xiàn)場強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可以在疾病早期確診，提高疾病的治愈檢測手段以及養(yǎng)殖單位對(duì)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物感染CDV認(rèn)識(shí)率，但目前常用的RT—PCR方法對(duì)專業(yè)技術(shù)要求高，收稿日期：2()IO-08-,)5基金項(xiàng)目：江蘇檢
