去甲斑蝥素對白血病細(xì)胞系K562的增殖、凋亡、細(xì)胞周期及NF-κB活性的影響.pdf

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1、·406·臨床腫瘤學(xué)雜志2015年5月第20卷第5期ChineseClinicalOncology，May2015，Vo1．20，No．5去甲斑蝥素對白血病細(xì)胞系K562的增殖、凋亡、細(xì)胞周期及NF—KB活性的影響515041廣東汕頭汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院血液腫瘤科{I9鎧濤，陳江聲，陳春莉【摘要】目的探討去甲斑蝥素(NCTD)對白血病細(xì)胞系K562的增殖、凋亡、細(xì)胞周期及核因子(NF)．KB活性的影響。方法采用CCK-8試劑盒檢測不同濃度NCTD(0、10、25、50、100~mol／L)處理K562細(xì)

2、胞24、48、72、96h后的增殖抑制率，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度NCTD處理24、48h后的細(xì)胞凋亡率和處理48h后的細(xì)胞周期，采用原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Tunne1)檢測不同濃度NCTD處理24、48h后的細(xì)胞凋亡指數(shù)，采用Westernblotting檢測不同濃度NCTD處理48h后的NF-KBp65及IKB一0【水平以評價NF—KB活性的變化。結(jié)果在10~100}Lmol／L范圍內(nèi)，NCTD可呈時間和濃度依賴的方式升高K562細(xì)胞的增殖抑制率，各濃度間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P

3、ol／L相比，其余各濃度處理24、48h后的凋亡率和凋亡指數(shù)均升高，處理48h后的G0／G期細(xì)胞比例升高，s、G／M期細(xì)胞比例均降低，NF．KBp65水平降低，IKB．o／．水平升高，以上差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P

4、norcantharidinontheproliferation，apoptosis，cellcycleandactivityofNF—KBonhumanleuke-miacelllineK562YAOKaitao，CHENfiangsheng，CHENChunli．DepartmentofHematologyandOncology，theSecondAfiliatedHospitalofShantouUniversityMedicafCollege，Shantou515041，China【Abstract】

5、ObjectiveToinvestigatetheeffectofnorcantharidin(NCTD)onproliferation，apoptosis，cellcycleandtheac—tivityofnuclearfactor(NF)一KBonhumanleukemiacelllineK562．MethodsTheK562cellwastreatedwithdifferentconcentrationsofNCTD(0，10，25，50，100I~moVL)andtheproliferationin

6、hibitionratesweremeasuredbyCCK一8kitat24，48，72，96hpost—treatment．Theapoptoticratesat24and48htogetherwithcellcycleat48hafterNCTDtreatmentswereevaluatedviaflowcytometry．Theinsitucelldeathdetectionkit(Tunne1)wasappliedtomeasurethelevelsofapoptosisat24and48hpost

7、—treatment．AsfortheactivityofNF-KB．1evelsofp65subunitofNF—KBandIKB一僅weredetectedbyWesternblottingat48hpost—treatment．ResultsNCTDintherange10to100pumol／LcouldincreasetheproliferationinhibitionratesonK562cellsinadose-andtime·-dependentman-ner(P<0．05)．Incompar

8、isonwith0txmol／LNCTD，therewereelevatedapoptoticratesandindicesat24and48hpost—treatment(P<0．05)．ThetreatmentwithNCTD(10—100pumol／L)resultedinahigherproportionofcellswithinG0／G1phasebutalowerproportionof