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《去甲斑蝥素誘導(dǎo)人紅白血病K562細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第8卷第1期中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志Vol.8No.11999年3月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYTOCHEMISTRYmar.1999去甲斑蝥素誘導(dǎo)人紅白血病K562*細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究*******孫震曉趙天德魏育林李家實(shí)(山東聊城師范學(xué)院,聊城252059;**中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所***北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院,北京100029)-1摘要體外實(shí)驗(yàn)證明10μg.ml去甲斑蝥素作用于人紅白血病K562細(xì)胞24h,可誘導(dǎo)K562細(xì)胞發(fā)生凋亡。提取加藥組細(xì)胞DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳呈現(xiàn)典型的DNA“梯子”,同時(shí)加藥組細(xì)胞出現(xiàn)核固縮
2、、碎裂及胞漿濃縮等形態(tài)學(xué)變化。流式細(xì)胞測試結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察,特別是細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察,證明去甲斑蝥素誘導(dǎo)-1的K562細(xì)胞凋亡大部分發(fā)生在細(xì)胞周期的M期,也有部分發(fā)生在間期。免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果表明,10μg.ml去甲斑蝥素作用于人紅白血病K562細(xì)胞24h,與對(duì)照組相比,加藥組細(xì)胞中bcl-2蛋白表達(dá)增強(qiáng),而Bax蛋白表達(dá)減弱,兩組間有顯著性差異(P<0.001)。關(guān)鍵詞去甲斑蝥素細(xì)胞凋亡K562細(xì)胞Bcl-2BaxSTUDYONAPOPTOSISOFK562HUMANMYELOIDLEUKEMIACELLSINDUCEDBYNORCANTHARIDIN*******SunZ
3、henxiao,ZhaoTiande,WeiYulin,LiJiashi**(LiaochengTeacher'sCollege,Liaocheng252059;China-Japan***FriendshipInstituteofClinicalMedicalSciences;BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing100029China)-1It'sprovedthat10μg/mlNCTDcaninduceapoptosisinK562humanmyeloidleukemiacellsinvitro
4、after24h.AcharacteristicDNA"ladder"wasdetectedbyusingagarosegelelectrophoresis.SometreatedK562cellswerefoundcondensedwithnuclearchromatincom-pactionandbreakingup.ByFACSanalysisandmorphologialobservation,especiallybyul-trastructuralobservation,weprovedthatmostapoptosisofK562cellsoccurredi
5、nmitosisphaseandsomeothersinitiatedininterphaseofcellcycle.It'sfoundtheexpressionofbcl-2oncoproteinwasdecreasedwhileBaxincreasedinthetreatedK562cellsbyimmunocy-tochemicalstaining,whichwasinstrikingcontrastwiththecontrolgroup(P<0.001).KeyWordsNorcantharidin;Apoptosis;K562;bcl-2;Bax去甲斑蝥素(N
6、orcantharidine,NCTD)是在反復(fù)研究抗腫瘤活性成分斑蝥素(Canthari-dine,CA)構(gòu)效關(guān)系的基礎(chǔ)上,由呋喃及順丁烯二酸酐經(jīng)Diels-Alder反應(yīng)人工全合成的一種化合物,與斑蝥素相比,缺少1、2位的兩個(gè)甲基,兩者立體構(gòu)型相同。臨床上用于治療多種[1-3]癌癥,以原發(fā)性肝癌為主,顯示了較好療效。藥理實(shí)驗(yàn)及臨床實(shí)踐還表明,NCTD對(duì)正常[4,5]骨髓細(xì)胞沒有抑制作用,反而有很好的升白效果,是一種抗腫瘤機(jī)理頗為獨(dú)特的藥物。細(xì)胞凋亡是一種有別于細(xì)胞壞死的細(xì)胞主動(dòng)參與并遵循一定程序的自我消亡過程,具有*高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助項(xiàng)目第1期孫震曉
7、等.去甲斑蝥素誘導(dǎo)人紅白血病K562細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究93特殊的形態(tài)和生化特征。越來越多的實(shí)驗(yàn)表明,藥物等對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用與誘導(dǎo)其產(chǎn)生[6]凋亡有關(guān)。既然抗腫瘤藥物可通過引起腫瘤細(xì)胞凋亡來發(fā)揮其治療作用,而細(xì)胞凋亡又是一個(gè)可被抑制或激活的可調(diào)節(jié)過程,那么對(duì)藥物引起細(xì)胞凋亡機(jī)制的深入研究,必有助于臨床上提出新的治療方案,使腫瘤治療走出低谷。本文以人紅白血病K562細(xì)胞為靶細(xì)胞,研究了NCTD對(duì)K562細(xì)胞的殺傷作用及其引發(fā)細(xì)胞死亡的方式,并運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)的方法對(duì)NCTD誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的特點(diǎn)及可能機(jī)制進(jìn)行了初步探討。材料和方法1.細(xì)
