離體蛙心灌 離體蛙心灌流 離體蛙心灌流.doc

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1、機能學(xué)實驗課教案離體蛙心灌流生理教研室：盧娜2004-9-20新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院實驗課教案首頁課程名稱：機能實驗學(xué)授課教師姓名及職稱：盧娜一、題目離體蛙心灌流二、對象2002級本科各個專業(yè)三、單元教學(xué)目標與課時分配1.理論講解1學(xué)時:40min2.學(xué)生操作4學(xué)時:160min共:200min四、授課重點心肌細胞的生理特征五、授課難點1.學(xué)習(xí)離體蛙心灌流的實驗方法。2．觀察Na、K、Ca三種離子及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。六、授課形式小班實驗課七、授課方法與課前準備認真?zhèn)湔n；采用啟發(fā)式教學(xué)；了解學(xué)生已學(xué)課程，醫(yī)學(xué)生物學(xué)、生物化學(xué)，同期課程生理學(xué)內(nèi)容圍繞

2、重點、難點，深入淺出八、教材與參考文獻《生理學(xué)實驗方法》李東亮主編《生理學(xué)實驗指導(dǎo)》朱思明主編《醫(yī)用機能實驗學(xué)》常全忠主編《病理生理學(xué)》第五版《病理生理學(xué)實驗》孫銀平主編《藥理學(xué)》第五版九、思考題1．給人體快速靜脈注射鉀離子，會有什么樣的結(jié)果?2．蛙心插管內(nèi)灌流液是心臟的什么負荷?3．正常體內(nèi)腎上腺素、乙酰膽堿等化學(xué)物質(zhì)來自何處?十、教研室審查意見主任簽字新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室2004年9月20日離體蛙心灌流[實驗?zāi)康腯1．學(xué)習(xí)離體蛙心灌流的實驗方法。2．觀察Na、K、Ca三種離子及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。[實驗原理]1．心臟的正常節(jié)律性活

3、動需要一個適宜的內(nèi)環(huán)境，內(nèi)環(huán)境的變化直接影響著心臟的正?；顒?。本實驗在蛙心的灌流液內(nèi)人為地加入一些物質(zhì)而改變心臟活動的內(nèi)環(huán)境，觀察心臟活動有何變化。2．心肌細胞分類收縮性興奮性傳導(dǎo)性自律性非自律細胞，心房肌，心室肌細胞有有有無自律細胞，p細胞，浦肯野細胞無有有有快反應(yīng)細胞：心房肌，心室肌，浦肯野細胞：主要由快鈉通道被激活，Na快速內(nèi)流引發(fā)動作電位，去極速度快慢反應(yīng)細胞：竇房結(jié)細胞，房室交界區(qū)細胞：主要由慢鈣通道被激活，Ca內(nèi)流引發(fā)動作電位，去極速度慢3．心肌細胞的生理特征：電生理特征：自律性，興奮性，傳導(dǎo)性機械生理特征：收縮性影響心肌細胞電生理因素影響心肌細

4、胞興奮性因素（心室肌細胞）影響心肌細胞自律性因素（竇房結(jié)細胞）影響心肌細胞傳導(dǎo)性因素（房室交界區(qū)細胞）靜息電位水平與閾電位水平之間的差距4期自動除極的速度結(jié)構(gòu)因素：直徑鈉通道狀態(tài)最大復(fù)極電位水平與閾電位水平之間差距動作電位0期去極速度和幅度鄰近部位膜的興奮性心肌細胞興奮－收縮耦聯(lián)過程所需的Ca要從細胞外液轉(zhuǎn)運，細胞興奮時，膜上Ca通道開放，因此：細胞外液Ca濃度↑――細胞興奮時內(nèi)流Ca↑――心肌收縮力↑反之亦然４．1％KCl：即１３４ｍｍｏｌ/L（正常：４ｍｍｏｌ／Ｌ）輕，中度高鉀：細胞外K↑――Ｋ與Ｃａ在細胞膜上有競爭性抑制――Ｋ抑制細胞膜對Ｃa轉(zhuǎn)運――進

5、入細胞內(nèi)Ca↓――心肌的興奮收縮聯(lián)過程減弱――心肌收縮力↓[K]↑――膜內(nèi)外ｋ濃度梯度減小――靜息電位絕對值減小――興奮性↑[K]↑――細胞膜對k通透性增加――K通道失活V↓――自動去極化V↓――自律性↓[K]↑――細胞膜對k通透性增加――K外流增加――最大復(fù)極電位↑――自律性↓[K]↑――Ca內(nèi)流受抑制――0期去極速度和幅度降低――傳導(dǎo)性降低重度高鉀：[K]↑↑――RP↓――Ｎａ通道失活――興奮性喪失５．2％CaCl2：　即１８０ｍｍｏｌ/L（正常：２ｍｍｏｌ／Ｌ）細胞膜外Ｎａ與Ｃａ有競爭性抑制細胞外液Ca濃度↑――細胞興奮時內(nèi)流Ca↑――心肌收縮力↑快反

6、應(yīng)細胞：高Ｃａ――Ｎａ內(nèi)流抑制――０期去極化速度及幅度下降――傳導(dǎo)性↓慢反應(yīng)細胞：高Ｃａ――Ca易進入細胞，Ｃａ內(nèi)流增加――０期去極化速度增加――傳導(dǎo)性↑?。叮.65％NaCl?。骸。保保保恚恚铮欤碳毎釩a↓――2期內(nèi)流Ca↓――胞漿Ca濃度↓――心肌收縮↓[Ｃａ]↓――Ｃａ內(nèi)流減少――０期去極化速度減慢――傳導(dǎo)性↓　[Ca]↓――Ca不易進入細胞――4期自動除極的速度減慢――自律性↓7：腎上腺素正性變化腎上腺素與心肌細胞膜上的β1受體結(jié)合――心肌細胞和肌漿網(wǎng)膜Ca通透性↑――肌漿中Ca濃度增加――心肌收縮↑使K通道，Ｎａ通道，Ca通道都開放，---

7、---慢Ca通道-----8：乙酰膽堿負性變化乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M受體結(jié)合――心肌細胞膜K通道的通透性↑――促k外流――1：竇房結(jié)細胞復(fù)極時K外流↑――最大復(fù)極電位水平↑――自律性↓2：復(fù)極時K外流↑――AP2,3期縮短――Ca進入細胞內(nèi)↓――心肌收縮↓乙酰膽堿可直接抑制Ca通道――Ca內(nèi)流↓――心肌收縮↓[實驗對象]青蛙或蟾蜍[實驗器材和藥品]1．器材生物信號采集系統(tǒng)、機械換能器、蛙類手術(shù)器械1套、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、雙凹夾、萬能支架、滴管、150ml小燒杯4個、任氏液。2．藥品O.65％氯化鈉、2％氯化鈣、1％氯化鉀、1：10000腎上腺素、

8、1，10000乙酰膽堿等。[實驗步驟]1離體蛙心的制