掌葉秋海棠組培快繁體系的建立.pdf

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1、中國(guó)園藝文摘2014年第6期掌葉秋海棠組培快繁體系的建立王輝(華北油田公司華盛綜合服務(wù)處，河北任丘062550)摘要：掌葉秋海棠(BegoniahemsleyanaHook．f．)作為一種野生的花卉資源，具有巨大的應(yīng)用潛力。研究掌葉秋海棠的組織培養(yǎng)體系：以芽作為外植體，采用常規(guī)消毒(自來(lái)水沖洗50rain、70％酒精處理50s、0．1％升汞處理8min)能夠獲得較好的消毒效果。以MS+6-BA1．0mg／L+NAA0．1mg／L作為分化培養(yǎng)基，分化率可達(dá)到70．00％。適宜的生根培養(yǎng)基為1／zMS+N^^0．1mg／L，生根

2、率達(dá)到100％。關(guān)鍵詞：掌葉秋海棠；分化；組織培養(yǎng)掌葉秋海棠(BhemsleyanaHook．f．)，系秋海棠科秋芽接種于培養(yǎng)基上，20d后比較NAA不同濃度的生根效果。海棠屬多年生中型草本植物，屬于我國(guó)第2批待評(píng)保護(hù)級(jí)形成根系后開(kāi)瓶煉苗2d，洗去根部附著的培養(yǎng)基，移栽植物。主要分布在云南(屏邊、金平、馬關(guān)、蒙自)、廣西到裝有滅菌沙土的塑料缽中，噴灑500倍甲基托布津，覆(那坡、德保)、四川(巴縣)，生于海拔1000～1300m蓋薄膜保濕7d。去膜，見(jiàn)植株開(kāi)始生長(zhǎng)后移栽。山坡陰處潮濕地帶、疏林中、山谷林內(nèi)石壁上和水邊一。2結(jié)

3、果與分析另外，在重慶縉云山等地也有零散分布。由于其葉片掌狀2．1不同外植體消毒效果的比較全裂為六“小葉”，葉柄及背部葉脈均為紫紅色，花潔白，從表1可以看出，以葉柄、葉片以及莖段作為外植體因此，具有較高的觀賞價(jià)值。在野生狀態(tài)下，掌葉秋海棠進(jìn)行常規(guī)消毒后污染率高、成活率較低。這主要是因?yàn)椋?1)的結(jié)實(shí)率低，種子萌發(fā)率更低，主要以無(wú)性繁殖為主，大莖段、葉柄有大量表皮毛，為材料的消毒帶來(lái)困難。(2)內(nèi)大降低了其繁殖效率。試驗(yàn)研究掌葉秋海棠組織培養(yǎng)體系，生菌的存在。切取外植體的部分植株體內(nèi)帶有細(xì)菌，接種旨在為以后的保護(hù)以及應(yīng)用打下基礎(chǔ)

4、。后污染表現(xiàn)為從切口處溢出菌膿。(3)葉片薄(膜質(zhì))，在1材料與方法消毒過(guò)程中容易被殺死。相比之下，采用未萌發(fā)的芽作外1．1試驗(yàn)材料植體的消毒效果最佳，并能夠取得較高的成活率。植株采自重慶縉云附近。表1不同外植體消毒效果1．2試驗(yàn)方法1．2．1無(wú)菌體系的建立分別選用葉柄、葉片，莖段，芽作為外植體。采用常規(guī)消毒，即自來(lái)水沖洗30min、70％酒精處理30S、0．1％升汞處理8min。葉柄、莖段剪成lcm，葉片剪成0．5cm的小塊，芽采用剝芽法剝得，然后接種于再生培養(yǎng)基上。2周后觀察統(tǒng)計(jì)結(jié)果，比較不同外植體的消毒效果及成活率。1

5、．2．2離體分化培養(yǎng)基的篩選參考其他關(guān)于秋海棠的組織培養(yǎng)研究【3一，設(shè)計(jì)以MS為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中分別附加6-BA0、0．5、1．0、2．0mg／L,NAA0、0．1、0．2、2．2分化培養(yǎng)基篩選結(jié)果0．5mg／L。采用L。()的正交設(shè)計(jì)進(jìn)行最適激素配比的接種后5d開(kāi)始出現(xiàn)愈傷并逐漸分化，20d后再生植篩選。共設(shè)計(jì)l6組處理組合，外植體選用上一步獲得的無(wú)株可以看到明顯的葉叢。40d的統(tǒng)計(jì)結(jié)果(見(jiàn)表2)表明，菌葉片，剪切大小同上。每個(gè)處理接種30個(gè)外植體。所有以葉片作為外植體在供試的6一BA0、0．5，1．0、2．0mg／L

6、培養(yǎng)基皆以6．0g／L的卡拉膠固化，添加蔗糖3％。pH值與NAA0、0．1、0．2、0．5mg／L不同配比的MS培養(yǎng)基5．8，培養(yǎng)溫度為(25土2)℃。光照1800～2500b(，每上均能分化出芽。但是不同的激素配比導(dǎo)致的分化率不同，天光照12～14h。接種40d后統(tǒng)計(jì)分化率。其中以MS附加6-BA1．0mg／L+NAA0．1mg／L的1．2．3生根培養(yǎng)與移栽以1／2MS為基本培養(yǎng)基，添加分化率最高，達(dá)到70．00％，且叢生芽數(shù)量多(見(jiàn)圖1、2)。濃度為0、0．1、0．2、0．5mg／L的NAA。將再生的不定激素濃度過(guò)高(6

7、一BA2．0mg／L、NAA0．5mg／L)或過(guò)低(6一BA0、0．5mg／L，NAA0mg／L)都不利于再生不定芽。作者簡(jiǎn)介：王輝(1979一)，男，助理農(nóng)藝師；主要從事礦區(qū)綠化種植、養(yǎng)護(hù)等方面的管理工作。-35-CHINESEHORTICULTUREABSTRACTS表2不同激素配比對(duì)分化率的影響圖2接種30d后再生情況2．3生根培養(yǎng)基的篩選結(jié)果表3不同濃度NAA對(duì)生根的影響在附加不同濃度NAA的1／2MS培養(yǎng)基上，不定芽7d開(kāi)始生根，12d后大多數(shù)不定芽生根。比較不同濃度的NAA對(duì)生根的影響，表3結(jié)果表明，NAA在4種

8、濃度下均能生根，其中0．1mg／L與0．2mg／LNAA生根率都達(dá)到100％。但是在0．1mg／L濃度時(shí)，不定芽生根多，根分支多，且無(wú)愈傷產(chǎn)生。0．2mg／L的NAA雖然能夠使不定芽生根，生根數(shù)多，但是卻容易產(chǎn)生愈傷，使移栽難以成活。2．4煉苗與移栽生根培養(yǎng)3周后，把已生根苗從培養(yǎng)室取出并