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1、山東農(nóng)業(yè)科學(xué)2013，45(11)：7～i1ShandongAgriculturalSciences麻核桃CBF基因的克隆與生物信息學(xué)分析張建朋，張士剛，陳新，徐麗，賈建云。，張力思。，劉慶忠(1．龍口市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，山東龍口265701；2．泰安市農(nóng)業(yè)局，山東泰安271000；3．山東省果樹(shù)研究所／山東省果樹(shù)生物技術(shù)育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東泰安271000)摘要：CBF基因是植物CBF抗冷途徑的樞紐，對(duì)增強(qiáng)植物抗冷能力極為重要。本研究根據(jù)已知的核桃CBF基因序列設(shè)計(jì)通用性引物，對(duì)麻核桃cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，成功
2、獲得麻核桃CBF基因全長(zhǎng)序列，命名為JhCBF。JhCBF全長(zhǎng)820bp，包含一個(gè)645bp的開(kāi)放讀碼框(ORF)，編碼214個(gè)氨基酸。序列分析表明JhCBF與其他物種來(lái)源的CBF具有較高的同源性，其中，與樺木科白樺的同源性最高，為61．22％；JhCBF含有一個(gè)預(yù)測(cè)的AP2結(jié)構(gòu)域及CBF特有的兩段短肽序列。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明JhCBF與樺木科白樺的親緣關(guān)系最近，最先聚為一類(lèi)。關(guān)鍵詞：麻核桃；CBF基因；克??；生物信息學(xué)分析中圖分類(lèi)號(hào)：Q785文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001—4942(2013)11—0007—0
3、5CloningandBioinformaticAnalysisofCBFGenefromJuglanshopeiensisHuZhangJianpeng，ZhangShigang，ChenXin，XuLi，JiaJianyun，ZhangLisi，LiuQingzhong(1．LongkouAgriculturalTechnologyPromotionCenter，Longkou265701，China；2．TaianAgriculturalBumau，Taian271000，China；3．ShandongIn
4、stituteofPomology／ShandongPr~inciaKeyLaboratoryofFruitTreeBiotechnologyBreeding，Taian271000，China)AbstractCBFgeneplaysacentralroleinCBFcold—responsepathwayinplant．Itisveryimportantinincreasingplantcoldtolerance．Universalprimersweredesignedaccordingtopublishedw
5、alnutCBFgenes，andthenPCRamplificationwascarriedoutusingJuglanshopeiensiscDNA．Finally，theJuglanshopeiensisCBFgenewasobtained，namedJhCBF．Thefull—lengthofJhCBFwas820bp，containinganopeningread-ingframe(ORF)of645bp．Thededucedproteinhad214aminoacids．Sequenceanalysis
6、showedthatJh—CBFsharedhighhomologywithCBFfromotherplants．Amongthem，thehomologywithCBFfromBetulaplatyphylla(Betulaceae)wasthehighestof61．22％．JhCBFcontainedapredictedAP2domainandtwopep-tidesequenceswhichwerespecifictoCBF．PhylogenetictreeanalysisindicatedthatJhCB
7、Fhadtheclosestre-lationshipwithCBFfromBetulaplatyphylla(Betulaceae)，andtheywereclusteredintoonegroupfirstly．KeywordsJuglanshopeiensisHu；CBFgene；Clone；Bioinformaticanalysis麻核桃(JuglanshopeiensisHu)屬胡桃科核桃中屬于最高檔次的品種。低溫凍害是影響核(Juglandaceae)胡桃屬(Juglans)，主要分布在河桃生長(zhǎng)發(fā)育、造
8、成核桃產(chǎn)量和質(zhì)量下降的主要因北、天津、山西和北京的部分山區(qū)。麻核桃集紋路素之一。南方的泡核桃引種到北方種植時(shí)，多數(shù)多變、皮質(zhì)良好、造型優(yōu)美等優(yōu)點(diǎn)于一身，在文玩因低溫脅迫致死，而我國(guó)獨(dú)有的麻核桃能夠在河收稿日期：2013—07—29基金項(xiàng)目：科技部科技基礎(chǔ)工作資助項(xiàng)目“國(guó)家核桃板栗種質(zhì)資源平臺(tái)”(2013—048)；農(nóng)業(yè)部種質(zhì)資源保護(hù)項(xiàng)目(2013—26)；山
