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1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物眼底照相及熒光素眼底血管造影昭衍（蘇州）新藥研究中心眼科實(shí)驗(yàn)室-------眼科基礎(chǔ)知識(shí)可獲取眼底彩照及FFA的儀器臺(tái)式裂隙燈+前置鏡臺(tái)式眼底照相機(jī)手持式眼底照相機(jī)動(dòng)物眼底結(jié)構(gòu)-猴視網(wǎng)膜顳上動(dòng)脈視網(wǎng)膜顳上靜脈視網(wǎng)膜鼻上動(dòng)脈視網(wǎng)膜鼻上靜脈視網(wǎng)膜鼻下動(dòng)脈視網(wǎng)膜顳下動(dòng)脈視網(wǎng)膜顳下靜脈黃斑中心凹黃斑反光暈輪視盤食蟹猴眼底圖譜手持式眼底照相數(shù)據(jù)來源：昭衍（蘇州）新藥研究中心數(shù)據(jù)來源：昭衍（蘇州）新藥研究中心動(dòng)物眼底結(jié)構(gòu)-猴正常眼底圖A：神經(jīng)纖維反光B：豹紋狀眼底C：豹紋狀眼底ACB視盤視網(wǎng)膜靜脈視網(wǎng)膜動(dòng)脈動(dòng)物眼底結(jié)構(gòu)-兔新西蘭兔眼底圖譜兔：視盤
2、位于上方，主要?jiǎng)屿o脈從視盤中央進(jìn)入眼內(nèi)分為內(nèi)側(cè)支和鼻側(cè)支，動(dòng)脈位于表層，靜脈位于深層，動(dòng)靜脈平行或彼此交叉。脈絡(luò)膜血管手持式眼底照相加+60D前置鏡手持式眼底照相動(dòng)物眼底結(jié)構(gòu)-狗黃綠色透明毯層深色素層鼻下支動(dòng)脈鼻下支靜脈脈上支靜脈上支動(dòng)脈顳下支動(dòng)靜脈Beagle犬眼底圖譜視盤視網(wǎng)膜靜脈視網(wǎng)膜動(dòng)脈鼠：視盤位于視網(wǎng)膜中央，色淡紅，無明顯黃斑結(jié)構(gòu)，視網(wǎng)膜血管為全血管型，中央動(dòng)脈與中央靜脈相間排列。動(dòng)物眼底結(jié)構(gòu)-鼠SD大鼠眼底圖譜BN大鼠眼底圖譜視盤視網(wǎng)膜靜脈視網(wǎng)膜動(dòng)脈脈絡(luò)膜血管數(shù)據(jù)來源：昭衍（蘇州）新藥研究中心AA：視網(wǎng)膜色素紊亂、色素上皮萎縮紊亂
3、B：視網(wǎng)膜色素紊亂C:黃斑中心凹顳側(cè)見2個(gè)黃白色病灶，未見明顯出血。BC眼底異常圖片熒光素眼底血管造影一、原理：熒光素眼底血管造影（fundusfluoresceninangiography,FFA）最基本的原理是利用能發(fā)熒光的物質(zhì)，用特定波長的光線激發(fā)，產(chǎn)生可以觀察到得圖像，激發(fā)停止，熒光就消失。FFA采用的熒光染料是熒光素鈉，造影時(shí)將其快速注入靜脈內(nèi)，用藍(lán)色光照射，使眼底血管內(nèi)的熒光素鈉被激發(fā)出熒光，用高速照相及或攝像機(jī)進(jìn)行拍攝或錄像，了解實(shí)時(shí)的眼底情況。熒光素眼底血管造影柵濾光片激發(fā)濾光片眼光源照相機(jī)閃光燈465—490nm500—53
4、0nm熒光素眼底血管造影熒光素眼底血管造影關(guān)于熒光素鈉1.熒光素鈉藥理熒光素鈉（sodiumfluorescein）：分子量為376.27，pH=8時(shí)熒光最強(qiáng)。激發(fā)光波長在紫藍(lán)色波段（465—490nm），激發(fā)發(fā)出的熒光波長在黃綠色波段（500—530nm）分布：60%--80%的熒光素鈉在血液中與白蛋白結(jié)合不能發(fā)出熒光，大約20%游離在血液中可被藍(lán)光激發(fā)出熒光。靜脈注射后1min，熒光素鈉即散布全身組織。排泄：24h內(nèi)經(jīng)肝、腎排出。注射后2—4h皮膚顯黃色，2天內(nèi)尿液呈黃色。多飲水可加速熒光素鈉排出。2.熒光素鈉的應(yīng)用熒光素鈉一般經(jīng)靜脈注射
5、，少數(shù)情況可口服給藥。(目前我們使用的是10%熒光素鈉，0.08ml/kg）3.熒光素鈉的副作用二、熒光造影眼底血管造影技術(shù)操作1.造影前準(zhǔn)備確認(rèn)儀器能正常使用動(dòng)物的精神狀態(tài)（特別是進(jìn)行過）醫(yī)療垃圾袋、生理鹽水，開瞼器2.造影過程過敏試驗(yàn)：目前試驗(yàn)中動(dòng)物未進(jìn)行過敏試驗(yàn)。造影：先拍攝彩色眼底像，應(yīng)盡量包括全部眼底，突出病變部位。注射熒光素鈉，食蟹猴一般使用10%熒光素鈉，0.08ml/kg。注射完畢開始計(jì)時(shí)并開始拍片，前30s連續(xù)拍片，每秒1-2張，30s后可每5秒一張。如果雙眼病變需要雙眼同時(shí)造影。造影早期盡量多照一些圖像，中晚期一邊觀察一邊
6、拍攝，注意細(xì)節(jié)。熒光素眼底血管造影三、眼底熒光造影所見的正常熒光形態(tài)內(nèi)界膜ILM神經(jīng)纖維層NFL神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層GCL內(nèi)叢狀層IPL內(nèi)顆粒層INL外叢狀層OPL外顆粒層ONL外界膜OLM感光細(xì)胞層IS/OS色素上皮層RPE視網(wǎng)膜分層熒光素眼底血管造影眼底組織的屏障功能血-視網(wǎng)膜屏障：血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接+壁內(nèi)周細(xì)胞組成屏障，其他血管沒有此屏蔽功能。脈絡(luò)膜—視網(wǎng)膜屏障：RPE間閉鎖小帶色素上皮細(xì)胞玻璃膜脈絡(luò)膜毛細(xì)血管閉鎖小帶熒光素眼底血管造影臂-視網(wǎng)膜循環(huán)時(shí)間（arm-retinacirculationtime，A-RCT）熒光素：肘中靜脈→右心→
7、肺循環(huán)→主動(dòng)脈→頸總動(dòng)脈→頸內(nèi)動(dòng)脈→眼動(dòng)脈→眼底A-RCT大體在10～15s影響A-RCT的各種因素注射部位、速度、注射處的血管粗細(xì)、血液粘度與速度、心臟的排血功能，血管管徑和阻力，燃料濃度與劑量。甲亢和貧血可使染料加速到眼底而紅細(xì)胞增多癥和心排量減低等反之。頸動(dòng)脈狹窄等熒光素眼底血管造影視網(wǎng)膜循環(huán)的熒光形態(tài)及分期層流與軸流現(xiàn)象熒光素的血液前鋒呈分層流動(dòng)，稱為層流。遇到分支后，熒光素沿一側(cè)前進(jìn)，稱為層流。動(dòng)脈層流熒光素眼底血管造影靜脈層流染料排空靜脈：周邊充盈→全部充盈→周邊排空→全部排空動(dòng)脈：中央充盈→全部充盈→中央排空→全部排空染料可以再
8、循環(huán)2-3次。五六分鐘后熒光素均勻分布于周身所有血液內(nèi)，此時(shí)就見不到再循環(huán)了。熒光素眼底血管造影背景熒光與殘余熒光背景熒光：在動(dòng)脈前期脈絡(luò)膜毛細(xì)血管很快充盈并融合形
