大杯蕈子實體多糖提取優(yōu)化及抗氧化活性分析-論文.pdf

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1、第36卷第3期泰山學院學報Vo1．36N0．32014年5月JOURNALOFTAISHANUNIVERSITYMay．2014大杯蕈子實體多糖提取優(yōu)化及抗氧化活性分析張晨，趙法茂2，胡春龍，劉正帥，劉貴芬2，賈曉(1．山東農(nóng)業(yè)大學作物生物學國家重點實驗室，山東泰安271000；2．泰山學院生物與釀酒工程學院，山東泰安271021)【摘要]探析大杯蕈子實體多糖的適宜提取條件，明確其抗氧化活性．以大杯蕈子實體為材料，利用Hackeu—Burman(PB)實驗和響應面分析法(RSM)優(yōu)化子實體多糖(FPS)的分離提取條件；以總還原力、羥基自由基、超氧陰離子自由基和二苯代苦味肼(DPP

2、H)自由基為指標，測定FPS抗氧化活性．結(jié)果表明，F(xiàn)iX3最佳提取條件是乙醇倍數(shù)3．55，醇沉時間28．77h，提取次數(shù)2．57次，F(xiàn)PS理論得率是2．549％．為操作方便，調(diào)整為乙醇倍數(shù)3．6，醇沉時間29h，提取次數(shù)3．00，在此條件下，多糖的理論得率是2．329％，實際得率為2．015％．當FPS濃度為5000trg／mL時，大杯蕈子實體多糖的總還原力為0．629，對于羥基自由基、超氧陰離子自由基、DPPH的清除率分剮為27．19％、60．101％和69．7％．隨著FPS濃度的增加，其還原力逐漸增強，對羥基自由基、超氧陰離子自由基和DPPH的清除率也逐漸增大，證明大杯蕈子實

3、體多糖具有潛在的抗氧化活性．[關(guān)鍵詞]大杯草；子實體多糖；提取優(yōu)化；體外抗氧化活性[中圖分類號】Q939．5[文獻標識碼】A[文章編號】1672-2590(2014)03-0037一lO大杯蕈(Clitocybemaxima)在真菌分類學上，屬擔子菌綱(Basidiomycetes)、口蘑科(Tricholomatace—ae)．大杯蕈營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)含量豐富，必需氨基酸的數(shù)量及組成比一般食用菌更接近模式蛋白．另還含有多種人體必需的礦物元素，如鋅、鉬、鈷等微量元素．經(jīng)全國各地引種栽培，大杯蕈已實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，市場前景廣闊．近幾年來，食用菌多糖在人體醫(yī)療保健中的作用13益引起人們的

4、關(guān)注．食藥用多糖的組成和結(jié)構(gòu)主要有以下幾種類型：(1)葡聚糖，是食用菌多糖中的主要構(gòu)成部分，其主鏈是由13—1，3糖苷鍵連接，支鏈由B一1，6糖苷鍵連接，如香菇多糖；(2)甘露聚糖，其主鏈是由—l，4糖苷鍵連接，如靈芝多糖；(3)雜多糖；(4)糖蛋白和多糖肽等¨．食用菌多糖是能夠控制細胞分裂分化，調(diào)節(jié)細胞生長衰老的一類活性多糖，主要由幾丁質(zhì)和B一(1，3)一D一葡聚糖構(gòu)成，它主要是從擔子菌與子囊菌子實體、菌絲體和發(fā)酵液中分離出的具有生物活性的天然高分子多聚物．藥理實驗表明，食用菌多糖具有調(diào)節(jié)人體機能、提高免疫力、增強骨髓造血功能及抗輻射、抗癌、抗病毒、抗腫瘤、延緩衰老、降血脂、促

5、進兒童生長發(fā)育等生理功能；還可通過非特異性途徑，提高機體對抗原或微生物病原體的特異性反應j，因而被稱為“生物應答調(diào)節(jié)劑”．目前國內(nèi)外對大杯蕈研究主要集中在探討其生物學特性、化學組成成分、營養(yǎng)價值及高產(chǎn)栽培技術(shù)等，但對其含有的生物活性成分尤其是多糖的研究比較缺乏-6J．本實驗擬利用Plackett—Burton實驗(PB實驗)和響應面分析法(Responsesurfacemethodology，RSM)優(yōu)化大杯蕈子實件多糖(Frutingbodypolysaccharide，F(xiàn)PS)的分離提取條件，并對其體外抗氧化活性作初步分析，旨在為大杯蕈子實體多糖提取工藝的優(yōu)化及構(gòu)效關(guān)系的深人

6、研究提供理論基礎(chǔ)．[收稿日期]2014一o4-03[基金項目]山東省自然科學基金項目(ZR2010CM034)；2013年全國大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目[作者簡介]張晨(1991一)，女，山東泰安人，山東農(nóng)業(yè)大學作物生物學國家重點實驗室碩士研究生．38泰山學院學報第36卷1材料和方法1．1實驗材料大杯蕈(Clitocybemaxima)子實體，由山東農(nóng)業(yè)大學微生物實驗室提供．1．2實驗方法1．2．1大杯蕈子實體多糖PB實驗(1)大杯蕈子實體多糖的提取大杯蕈烘干后于粉碎機中粉碎成粉末，一4~C冰箱保存?zhèn)溆茫褂肈X8Trial軟件繪制大杯蕈子實體多糖PB實驗表格(表1)，采用9因素

7、3水平的方案，各因素對應項目如表1．分別稱取0．5g大杯蕈子實體粉末放入編號為1—17的離心管中．按照表1所示實驗項目進行實驗，得到17組大杯蕈多糖提取物．向l7只離心管中加入20rnl水，70~C左右水浴，直至溶解．3600×g離心15min．取lml上清液置于試管中，稀釋lO倍，分別取1ml稀釋液設置三組平行試驗．分別向每支平行試管中加人1ml去離子水，1ml新配苯酚溶液，5ml濃硫酸．反應20min，于490nm下測定OD值．表1大杯蕈子實體多糖的PB試驗因素水平及編碼(2