煙草角斑病菌拮抗細(xì)菌篩選及抗菌活性物質(zhì)研究-論文.pdf

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1、第45卷第6期東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)45(6):16-232014年6月JournalofNortheastAculturalUniversityJune2014網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間2014—6—1116:10:16[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20140613.0953.003.html煙草角斑病菌拮抗細(xì)菌篩選及抗茵活性物質(zhì)研究文景芝,趙黎明,楊曉敏,孫劍萍2劉振平。(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,哈爾濱150030;2.牡丹江煙草科學(xué)研究所,黑龍江牡丹江1570113.黑龍江省職工電化教育中

2、心,哈爾濱150001)摘要:研究從黑龍江省健康煙草植株及其根際土壤和海南三亞采集的2O種雜草中分別分離到287和98個(gè)細(xì)菌分離物,篩選出對(duì)煙草角斑病菌有拮抗活性的菌株22個(gè),其中來(lái)自三亞稗草葉片中的一株細(xì)菌PA一2的抑茵效果最好,抑菌效果穩(wěn)定。經(jīng)形態(tài)學(xué)、生理生化及分子生物學(xué)鑒定,PA一2為銅綠假單胞桿菌(Pseudomonasaeruginosa)。篩選出最佳實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵配方:氮源1%(牛肉膏:蛋白胨=5:3),葡萄糖0I3%,NaC10.5%,KNO,0.3%;最佳培養(yǎng)條件:發(fā)酵溫度28℃,培養(yǎng)基pH7.0—7.5,接種量4%,裝液量為

3、250mL三角瓶中裝液50mL。PA一2優(yōu)化發(fā)酵液的田間防效達(dá)69.77%,比農(nóng)用鏈霉素防效提高24.47%。采用硫酸銨分級(jí)沉淀法分離抑茵活性物質(zhì),結(jié)果表明,在fNH4):s0濃度為30%一90%各濃度梯度下均有抑菌活性物質(zhì)沉淀,其中60%一70%(不含60%)是抑菌活性物質(zhì)的最適鹽析飽和度。抑茵活性物質(zhì)具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性、較好的蛋白酶耐受性、較好的耐堿性、較差的耐酸性,能溶于部分有機(jī)溶劑,經(jīng)乙醇、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和丙酮萃取后,該抑菌活性物質(zhì)抑菌活性下降范圍為1.4%一4%。確定該抑茵活性物質(zhì)為小分子堿性、水溶性脂肽類(lèi)物質(zhì)。關(guān)

4、鍵詞:煙草角斑?。晦卓辜?xì)菌;16SrDNA鑒定;發(fā)酵條件優(yōu)化;抑茵活性物質(zhì)中圖分類(lèi)號(hào):S476.9文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1005—9369(2014)06—0016—08文景芝,趙黎明,楊曉敏,等.煙草角斑病菌拮抗細(xì)菌篩選及抗菌活性物質(zhì)初步研J】_東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2014,45(6):16—23.WenJingzhi,ZhaoLiming,YangXiaomin,eta1.Screeningofantagonisticba~edalstrainagainstPseudomonassyringaepv.tabaciandstudieso

5、nantagonisticactivesubstances[J].JournalofNo~heastAgriculturalUniversity,2014,45(6):16-23.(inChinesewithEnglishabstract)ScreeningofantagonisticbacterialstrainagainstPseudomonassyringaepv.tabacjandstudiesonantagonisticactivesubstances/wENJingzhi’,ZHAOLiming’,YANGXiaomin’,S

6、UNJianping,LIUZhenping。(1.SchoolofAgriculture,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China;2.TobaccoResearchInstituteofMudanjiang,MudanjiangHeilongjiang157011,China;3.WorkersEducationalTechnologyCenterofHeilongjiangProvince,HarI)in150001,China)Abstract:Inthepresents

7、tudy.287and98bacterialstrainswereisolatedfr0mhealthytobaccoplantsandtheirrhizosphedcsoilsamplesaswellas20kindsofweedsfromHainanProvince.inwhich22strainshadantibacterialactivityagainstPseudomonass~ngaepv.tabaci.ThestrainPA-2thatwasidentifiedasPseudomonasaeruginosabymorphol

8、ogical,physiologicalandbiochemicalaswellasmolecularbiologytestswasisolatedfr0mtheleafofEchinochl

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