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1、黃曲霉拮抗菌株的篩選、鑒定及其活性物質(zhì)的初步研究學(xué)位論文完成日期:呈Q!圣:壘:壘指導(dǎo)教師簽字:答辯委員會成員簽字:碎善盤綻登盞青島科技大學(xué)研究生學(xué)位論文黃曲霉拮抗菌株的篩選、鑒定及其活性物質(zhì)的初步研究摘要食品安全問題倍受世界各國的高度重視,真菌產(chǎn)生的毒素是造成食品污染的重要來源。黃曲霉(彳spergillusflavus)是污染花生等農(nóng)產(chǎn)品的主要菌種,黃曲霉孢子能侵染植物及其產(chǎn)品,從而污染到各種食品和飼料,對人類和禽類健康造成很大的影響。黃曲霉產(chǎn)生的黃曲霉毒素是一類毒性極強(qiáng)的物質(zhì),廣泛地分布在發(fā)霉糧食及制品中,特別
2、是花生、花生油、玉米及其制品;乳制品和飼料中也含有較多的黃曲霉毒素。黃曲霉毒素是所有真菌毒素中毒性最強(qiáng)的,具有致突變、致癌和致畸的作用。然而,目前的黃曲霉毒素污染控制方法都存在各種局限性。黃曲霉毒素的污染嚴(yán)重威脅到人類健康和經(jīng)濟(jì)。目前對黃曲霉及其毒素的防治,國內(nèi)外的研究主要集中在利用微生物的次生代謝產(chǎn)物和植物提取物來獲得具有抗菌或降解毒素特性的物質(zhì)。本研究采用稀釋分離法從土壤中篩選出17株具有黃曲霉拮抗活性的菌株,利用拮抗菌的發(fā)酵產(chǎn)物來達(dá)到控制和防治黃曲霉,同時考察了17株菌對黃曲霉毒素的降解效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:(1
3、)根據(jù)菌株的形態(tài)學(xué)、生理生化特性及16SrDNA序列分析等對拮抗菌進(jìn)行了初步鑒定,采用分子生物學(xué)軟件進(jìn)行了多樣性分析,結(jié)果顯示,17株菌分屬8個類群:Y-21.1.2、Y-32.1.1、Y-32.1.2屬于枯草芽孢桿菌,Vl一4屬于耐鹽短桿菌,Y-17.3屬于空氣芽孢桿菌,Y-8.3、Y-18.2屬于高地芽孢桿菌,Y41.2、Y-43—2、Y-2.3和Y-17.1屬于蘇云金芽孢桿菌,Y-9.1屬于巨大芽孢桿菌,Y-40.1屬于韓國芽孢八疊菌,Y-38.3.1、Y-38.3—2、Y-27.2、Y-1一l屬于紡錘形賴氨酸
4、芽孢桿菌。(2)選取抑菌活性最強(qiáng)的菌株Y.17.3作進(jìn)一步研究,當(dāng)發(fā)酵液中加入硫酸銨的飽和度達(dá)到70%時,沉淀物抑菌活性最強(qiáng),該物質(zhì)對酸堿敏感,水浴溫度超過50℃時,其抑菌活性消失。(3)以香豆素為惟一碳源進(jìn)行黃曲霉毒素降解菌株的篩選,其中Y-21.1.2和Y-17.3對香豆素的降解效率最高;以黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)品為對照,考察了兩株菌對黃曲霉毒素的降解能力,結(jié)果顯示菌株Y.21.1.2和Y-17.3的降解效果良好,72h對黃曲霉毒素的降解率分別達(dá)到86.7%和90%。關(guān)鍵詞:芽孢桿菌黃曲霉黃曲霉毒素拮抗降解青島科技大學(xué)研
5、究生學(xué)位論文SCREENINGANDIDENTIFYOFANTAGONISTICBACTERIAAGAINST么&PE尺G兒三【胳刪y乙靨ANDCHARACTERIZATIONOFTHEACTIVECOMPOUNDSABSTRACTManycountrieshavepaidhighlyattentiontothefoodsafetyissue,thetoxinsproducedbyfungiisanimportantsourcewhichcausedthefoodpollution.Aspergillusflavus
6、isthemainfungiwhichpolluteproductproduce,forexamplepeanut.Itcausedgreatinfluenceonhumanandpoultryhealth.ThesporeofA.flavuscouldcontaminateplantandtheirproducts,SOthatpollutefoodandfeed.Aflatoxinisakindofhighlytoxicsubstanceswhichiswidelydistributedinthemoldyfoo
7、dandproducts.Especially,peanuts,peanutoil,comandtheseproductS;dairyproductsandfeedsalsocontainaflatoxin.ItiSthemosttoxicmycotoxinswhichcouldinducetheeffectsofmutagenic,teratogenicandcarcinogenic.Itthreatenshumanhealthandthedevelopmentofeconomyseriously.However,
8、existentmethodsarealwayslimitedtocontrolaflatoxinspollutionsofcrops.Therefore,wehopetofindnewwaytosolvetheseproblems.17strainswhichhaveobviousantagonisticeffectonA.flavushav