耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（mrsa)檢測(cè)課件

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1、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA)檢測(cè)簡(jiǎn)介*金黃色葡萄球菌是臨床上常見(jiàn)的毒性較強(qiáng)的細(xì)菌。但有些金黃色葡萄球菌產(chǎn)生青霉素酶，對(duì)青霉素的耐藥。*后來(lái)研究出一種新的能耐青霉素酶的半合成青霉素，即甲氧西林(methicillin),效果很好。*1959年應(yīng)用于臨床后不久首次發(fā)現(xiàn)耐甲氧西林金黃色葡萄菌(MRSA),MRSA從發(fā)現(xiàn)至今感染幾乎遍及全球，已成為院內(nèi)感染的重要病原菌之一。MRSA是什么？金葡/表葡/腐生致病性強(qiáng)耐甲氧西林金葡葡萄球菌金黃色葡萄球菌MRSAMRSA的耐藥機(jī)理具有一個(gè)外源性基因mecA，能產(chǎn)生青霉素酶，能水解

2、β-內(nèi)酰胺環(huán)致病因子A表面及分泌蛋白（毒力因子EnterotoxinB、TSST-1等）；B和C，細(xì)胞膜橫截面基因示意圖http://www.jci.org/cgi/content/full/114/12/1693/F1金葡菌(MSSA)+mecA=MRSA定植與感染美國(guó)人群中，鼻部20-50%的人定植有MRSA，其中10-20%的人長(zhǎng)期定植。中國(guó)數(shù)據(jù)類(lèi)似。MRSA在全世界快速蔓延[1]1.GrundmannH,etal.Emergenceandresurgenceofmethicillin-resistantStaphy

3、lococcusaureusasapublic-healththreat.Lancet2006;368:874-885.2.汪復(fù)等.2009年中國(guó)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè).中國(guó)感染與化療雜志2010;10(5):325-334.2009中國(guó)CHINET2MRSA-52.7%MRCNS-71.7%MRSA在中國(guó)大陸：CHINET2009汪復(fù)等.2009年中國(guó)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè).中國(guó)感染與化療雜志2010;10(5):325-334.協(xié)和醫(yī)院40.3%北京醫(yī)院78.3%新疆醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院47.0%廣醫(yī)一附院33

4、.6%武漢同濟(jì)醫(yī)院63.2%重醫(yī)一附院61.9%甘肅省人民醫(yī)院54.2%浙大一附院49.8%昆明一附院72.9%華山醫(yī)院74.1%瑞金醫(yī)院62.5%2009年CHINET監(jiān)測(cè)網(wǎng)各醫(yī)院MRSA菌株檢出率MRSA分離率醫(yī)院4114株金葡MRSA檢出率52.7%朱德妹等，中國(guó)抗感染與化療雜志。2010，10（6）美國(guó)感染性疾病的死亡人數(shù)疾病估計(jì)死亡人數(shù)時(shí)間MRSA190002005AIDS157982004結(jié)核6622004病毒性肝炎57932002SRAS0All禽流感0AllClinicalInfectiousDisease

5、s2008;46:S344–9MRSA的感染現(xiàn)狀20世紀(jì)90年代以后北京、上海、廣州等地大型醫(yī)院MRSA的分離率都已超過(guò)了50％，而其他地區(qū)的報(bào)道也大部分在25％-60％之間。2004年上海MRSA的分離率已達(dá)到63.9％2006年上海各大醫(yī)院MRSA的檢出率最高達(dá)92．5％。1968→現(xiàn)在，逐年上升感染特征MRSA，乙肝及艾滋病同稱(chēng)為當(dāng)今世界上三大感染癥且被列為世界三大最難解決感染性疾患的第一位.“在美國(guó)，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）致死的患者數(shù)量甚至超過(guò)了艾滋病?！盡RSA從發(fā)現(xiàn)至今感染幾乎遍及全球，已成為院內(nèi)

6、感染的重要病原菌之一。定植定植于會(huì)陰部、手、其它如切口、痰液、靜脈留置部位3-5％醫(yī)護(hù)人員鼻前庭定植有MRSA定植中30-60%最終發(fā)展為MRSA感染感染皮膚和軟組織感染；骨骼和關(guān)節(jié)感染尿道感染；菌血癥和心內(nèi)膜炎骨骼和關(guān)節(jié)感染；呼吸道感染感染死亡率明顯高于MSSA死亡率(%)18/3222/548/328/5431.3%CarmenGonazalezetal.ClinicalInfectiousDiseases.1999;29:1171-1177.一項(xiàng)比較MRSA與MSSA死亡率的前瞻性研究結(jié)果顯示傳統(tǒng)的培養(yǎng)----從送檢

7、到出結(jié)果往往需要3-4天時(shí)間，有的更長(zhǎng)。MRSA檢測(cè)影響因素：1、標(biāo)本取材2、標(biāo)本運(yùn)送3、培養(yǎng)基的選擇4、人為操作技術(shù)基因時(shí)代改變MRSA的檢測(cè)基因改變了我們的生活也改變了細(xì)菌的檢測(cè)檢測(cè)原理---實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)使用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)；直接對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的特異性耐藥基因核酸片段進(jìn)行熒光檢測(cè)。檢測(cè)步驟——MRSAPCR1.2.3.4.標(biāo)本核酸提取試劑配制加樣PCR擴(kuò)增20min10min90min實(shí)驗(yàn)室只需2小時(shí)與其他方法比較21MRSA檢測(cè)臨床應(yīng)用美國(guó)加利福尼亞、新澤西、華盛頓、賓夕法尼亞等16個(gè)州政府立法，

8、要求所有住院患者強(qiáng)制性檢測(cè).易感人群及科室：ICU及燒傷科重點(diǎn)關(guān)注的人群呼吸科/移植外科/老干部科/腫瘤科入院時(shí)應(yīng)進(jìn)行MRSA檢測(cè)，陽(yáng)性者需考慮相對(duì)隔離治療過(guò)程中應(yīng)定期監(jiān)測(cè)MRSA，以便及時(shí)調(diào)整抗生素及治療方案治療過(guò)程中出現(xiàn)并發(fā)感染，需要定期監(jiān)測(cè)MRSAMRSA定值篩查臨床價(jià)值一、對(duì)易感人群檢測(cè)分流隔離