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1、免疫診斷Immunodiagnosis p229-2401免疫診斷(Immunediagnosis)概念利用免疫學(xué)原理進(jìn)行臨床疾病的診斷或輔助診斷2抗原抗體反應(yīng)的特異性抗原抗體反應(yīng)的可見性一、抗原或抗體的檢測(cè)（一）、抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)利用已知抗體檢測(cè)病人的未知抗原，如HBVsAg利用已知抗原檢測(cè)病人的抗體，如抗HIV抗體、抗核抗體等3抗原抗體反應(yīng)的影響因素：親和力（affinity)親合力(avidity）YKeq=104AffinityY106AvidityYYYYY1010Avidity4抗原抗體比例合適溫度酸堿度電解質(zhì)抗原抗體反應(yīng)的影響
2、因素：5（二）、檢測(cè)抗原或抗體的方法1.凝集反應(yīng)（agglutination)：顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成凝集團(tuán)塊直接凝集反應(yīng)：顆粒性抗原+相應(yīng)抗體間接凝集反應(yīng)：可溶性抗原+顆粒載體+相應(yīng)抗體672.沉淀反應(yīng)(precipitation)：可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)沉淀物單向免疫擴(kuò)散：可用于檢測(cè)血清中Ig的含量雙向免疫擴(kuò)散：抗原抗體的定性分析免疫電泳：常用于血清蛋白種類分析免疫比濁：8AgConcentrationDiameter2AgAgAgAgAbingel單向免疫擴(kuò)散9雙向免疫擴(kuò)散10Ag+-AgAb免疫電泳114.用標(biāo)記的抗原或抗體
3、進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)12免疫熒光法：熒光素與抗體連接熒光抗體直接免疫熒光：熒光素標(biāo)記的抗體直接作標(biāo)本染色間接免疫熒光：一抗與標(biāo)本中的抗原結(jié)合，再用熒光素標(biāo)記的二抗染色13AgYFluorochromeLabeledAbTissueSection直接免疫熒光14AgYYFluorochromeLabeledAnti-IgTissueSectionUnlabeledAb間接免疫熒光15酶免疫測(cè)定：酶標(biāo)記抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行。它將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶
4、的高效催化作用相結(jié)合，通過酶作用于底物后顯色來判定結(jié)果。雙抗體夾心法檢測(cè)待測(cè)抗原間接法檢測(cè)待測(cè)抗體BAS-ELISA（生物素-親和素系統(tǒng)-ELISA）酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)(ELISPOT)免疫組化技術(shù)1617181920二、免疫細(xì)胞的測(cè)定分析免疫細(xì)胞的數(shù)量和功能，評(píng)價(jià)病人的免疫功能包括CD分子測(cè)定、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、吞噬實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)等21（一）、淋巴細(xì)胞的分離與類型鑒定分離方法：密度梯度離心單個(gè)核細(xì)胞磁珠分離：抗體與磁珠交聯(lián)免疫吸附分離法：將已知抗體包被培養(yǎng)皿，加入淋巴細(xì)胞懸液熒光激活細(xì)胞分選儀分離法（FACS）抗原肽-MHC分子四聚體技術(shù)22磁珠
5、分離法23流式細(xì)胞分選儀（FACS）24RedFluorescenceIntensityGreenFluorescenceIntensityTwoParameterHistogramGreenFluorescenceIntensityGreenFluorescenceIntensityUnstainedcellsNumberofCells流式細(xì)胞儀2526（二）、免疫細(xì)胞功能測(cè)定：T細(xì)胞功能測(cè)定B細(xì)胞功能測(cè)定吞噬細(xì)胞功能測(cè)定27T細(xì)胞功能測(cè)定T細(xì)胞增殖試驗(yàn)細(xì)胞毒試驗(yàn)細(xì)胞因子檢測(cè)皮膚試驗(yàn)28淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，鏡下觀察3H-TdR摻入法：氚標(biāo)記的胸腺嘧
6、啶核苷2.MTT法3-（4，5-二甲基-2-噻唑）-2，5-二苯基溴化四唑29細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞形態(tài)：臺(tái)盼藍(lán)染色51Cr的釋放LDH釋放凋亡細(xì)胞檢測(cè)法：細(xì)胞形態(tài)：瓊脂糖電泳FACSTUNEL3031細(xì)胞因子的檢測(cè)生物活性檢測(cè)法CTLL細(xì)胞株——IL-2依賴免疫學(xué)檢測(cè)：ELISAELISPOT323334B細(xì)胞功能測(cè)定Ig定量：?jiǎn)蜗颦傊瑪U(kuò)散、免疫比濁法、ELISAB細(xì)胞增殖試驗(yàn)抗體形成細(xì)胞測(cè)定：溶血空斑實(shí)驗(yàn)ELISPOT35吞噬細(xì)胞功能測(cè)定趨化功能測(cè)定（Boyden小室）吞噬功能測(cè)定（硝基藍(lán)四氮唑NBT、熒光標(biāo)記的生物顆粒）36三、免疫學(xué)檢測(cè)方法的
7、應(yīng)用疾病的診斷：感染性疾病超敏反應(yīng)性疾病自身免疫病免疫缺陷病腫瘤免疫學(xué)監(jiān)測(cè)：37第二十三章 免疫學(xué)防治Immunoprophylaxisandimmunotherapyp241-25138一、免疫預(yù)防疫苗的基本要求:安全有效實(shí)用自然免疫：機(jī)體感染病原體后建立的特異性免疫，包括胎兒或新生兒經(jīng)胎盤或乳汁從母體獲得抗體。疫苗（vaccine）：一些能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫的人工主動(dòng)免疫制劑如細(xì)菌性制劑、病毒性制劑以及類毒素等統(tǒng)稱為疫苗。人工主動(dòng)免疫:用疫苗接種機(jī)體使之產(chǎn)生特異性免疫,從而預(yù)防感染的措施。人工被動(dòng)免疫：給人體注射含特異性抗體的免疫血清
8、或細(xì)胞因子等制劑，以治療或緊急預(yù)防感染的措施。39滅活疫苗：狂犬病、傷寒、流感疫苗減毒活疫苗：脊髓灰質(zhì)炎、麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎疫苗類毒素：細(xì)菌的外毒素經(jīng)
