資源描述：
《糞大腸菌群檢驗(yàn)記錄.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、糞大腸菌群檢查實(shí)驗(yàn)記錄品名批號(hào)物料編碼規(guī)格來(lái)源取樣日期代表量檢驗(yàn)日期報(bào)告日期檢驗(yàn)編號(hào)檢驗(yàn)依據(jù)1、糞大腸菌群檢驗(yàn)記錄儀器設(shè)備名稱：電熱恒溫培養(yǎng)箱儀器設(shè)備型號(hào)：DHP-500生理鹽水的配制：8.5g氯化鈉加1000ml蒸餾水溶解待用（121℃滅菌30min）。（1）恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃。（2）冰箱：2℃～5℃。（3）恒溫水浴箱：46℃±1℃。（4）天平：感量0.1g。（5）無(wú)菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭。（6）無(wú)菌錐形瓶：容量500mL。（7）無(wú)菌
2、培養(yǎng)皿：直徑90mm。（8）pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。1、操作步驟（1）初發(fā)酵選擇適宜的三個(gè)連續(xù)稀釋度的樣品勻液。每個(gè)稀釋度接種三管月桂基磺酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯，每管接種1mL（如接種量需要超過(guò)1mL，則用雙料LST肉湯）。36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h，檢查倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生或輕搖試管時(shí)是否有密集連續(xù)的細(xì)小氣泡從管底逸出，如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48h±2h。記錄在24h和48h內(nèi)產(chǎn)氣的LST肉湯管數(shù)。未產(chǎn)氣者為糞大腸菌群陰性；對(duì)產(chǎn)氣者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。（2）復(fù)發(fā)酵用接種環(huán)從所有48h±2
3、h內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于已提前預(yù)溫至45℃的EC肉湯管中。將所有接種的EC肉湯管放入于帶蓋的44.5℃±0.2℃恒溫水浴箱內(nèi)，水浴的水面應(yīng)高于肉湯培養(yǎng)基液面，培養(yǎng)24h±2h，記錄EC肉湯管的產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣管為糞大腸菌群陽(yáng)性，不產(chǎn)氣為糞大腸菌群陰性。（1）取225ml生理鹽水于標(biāo)簽為1:10的300ml錐形瓶中，取9ml生理鹽水于標(biāo)簽為1:100的50ml錐形瓶中。（2）LST溶液的配制：取LST7.1g加水100ml（雙料），溶解至透明，倒入10ml于3只標(biāo)有1g的并放有聚
4、氣管的試管中;剩余溶液加一倍水配成單料倒入標(biāo)有0.01g，0.001ml的6只試管中，每只10ml,并放有聚氣管(試管要求180×18mm)。（3）以上1和2；同時(shí)一起滅菌，滅菌起始時(shí)間(噴氣開(kāi)始計(jì)時(shí))：壓力表指針回零后打開(kāi)放氣閥，開(kāi)蓋取出，冷至常溫。（4）樣品稀釋：于225ml滅菌的生理鹽水中加入樣品25g，混勻，配成1:10的稀釋樣；從1:10的稀釋樣中取1ml到入標(biāo)有1:100的9ml滅菌的生理鹽水中混勻，配成1:100稀釋樣;從1:100的稀釋樣中取1ml到入標(biāo)有1:1000的9ml滅菌的生理鹽
5、水中混勻，配成1:1000稀釋樣;（5）初發(fā)酵試驗(yàn)：每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽蛋白胨（LST）肉湯。取1:10的稀釋樣1ml于標(biāo)有0.1g的3只試管中，取1:100的稀釋樣1ml于標(biāo)有0.01g的3只試管中，取1:1000的稀釋樣1ml于標(biāo)有0.001g的3只試管中，（6）BGLB溶液復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：配制BGLB溶液，稱取BGLB4g溶液100ml水中，均分倒入對(duì)應(yīng)產(chǎn)氣標(biāo)號(hào)的標(biāo)有標(biāo)示并放有聚氣管的試管中，放入滅菌鍋滅菌15min。用接種針粘一環(huán)產(chǎn)氣管液于標(biāo)有對(duì)應(yīng)的以滅菌的BGLB溶液的試管中，于36℃的
6、培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h稀釋度接種量產(chǎn)氣情況BGLB肉湯培養(yǎng)后產(chǎn)氣情況陰性對(duì)照原液0.1g（ml）0.01g（ml）0.001g（ml）檢索MPN表結(jié)論：備注：檢驗(yàn)員：復(fù)核員：
