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1、第七章 細(xì)菌學(xué)衛(wèi)生檢驗(yàn)種類及標(biāo)準(zhǔn)邵麗軍1主要內(nèi)容第一節(jié)體液、分泌物及排泄物細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第二節(jié)各種環(huán)境標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)及衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（自學(xué)）2臨床感染性疾病的診斷和治療應(yīng)用良好的檢測(cè)技術(shù)和方法，提供準(zhǔn)確的結(jié)果或報(bào)告確定檢查目的和方法正確規(guī)范的采集和運(yùn)送標(biāo)本臨床檢驗(yàn)流程第一節(jié)體液、分泌物及排泄物細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)3細(xì)菌學(xué)鑒定方法1、形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查2、細(xì)菌生長(zhǎng)特性檢查如菌落3、生化試驗(yàn)4、血清學(xué)試驗(yàn)5、藥敏試驗(yàn)6、細(xì)菌毒素檢測(cè)7、分子生物學(xué)檢測(cè)8、噬菌體分型試驗(yàn)9、動(dòng)物試驗(yàn)4臨床標(biāo)本常規(guī)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序標(biāo)本選擇標(biāo)本采集與運(yùn)送觀察標(biāo)本、前處理直接涂片快
2、速檢驗(yàn)分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)可疑菌落血清學(xué)鑒定藥物敏感試驗(yàn)生化反應(yīng)形態(tài)觀察結(jié)果報(bào)告5細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告原則分級(jí)報(bào)告一級(jí)報(bào)告：直接涂片染色結(jié)果及培養(yǎng)結(jié)果二級(jí)報(bào)告：分離培養(yǎng)及藥敏結(jié)果三級(jí)報(bào)告：細(xì)菌種屬、藥敏結(jié)果、結(jié)果評(píng)價(jià)和建議67無菌原則正確采樣時(shí)間正確采樣部位足夠樣本量多樣性采集做好記錄標(biāo)本采集的一般原則8一、血液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)二、腦脊液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)三、穿刺液和引流液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)四、尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)五、膿液和分泌物標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)六、痰液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)七、生殖道標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)八、糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)9一、血液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)種類常見病原
3、菌G+球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌G+桿菌結(jié)核分枝桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌、陰道加特納菌G-球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布蘭漢菌G-桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞苗、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動(dòng)桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、嗜血桿菌真菌念珠菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌10（一）血液標(biāo)本的采集與送檢1.采樣時(shí)間：發(fā)熱期、用藥之前、病情發(fā)展2.采樣部位及頻率：多部位、高頻率例1：亞急性心內(nèi)膜炎：24h內(nèi)在三個(gè)不同部位采集3次血標(biāo)本，兩次間隔
4、不少于15分鐘，如培養(yǎng)陰性，就再采3次血標(biāo)本。例2：急性膿毒血癥：在10分鐘內(nèi)在不同部位采2～3次血標(biāo)本。113.樣本采集的量：成人血量5～10ml，嬰兒1ml～2ml，兒童3ml～5ml；當(dāng)懷疑為真菌感染時(shí)，應(yīng)采集雙份量，分別作雙相培養(yǎng)(37℃/28℃)。4.樣本的送檢：盡快，室溫5.操作：直接采血注入含増菌肉湯的培養(yǎng)瓶或用不含防腐劑的肝素抗凝管至實(shí)驗(yàn)室接種，需同時(shí)做需氧和厭氧培養(yǎng)12血培養(yǎng)一級(jí)報(bào)告二級(jí)報(bào)告三級(jí)報(bào)告“檢出***菌”，藥敏試驗(yàn)結(jié)果；7天仍無生長(zhǎng)現(xiàn)象，報(bào)告為“7天培養(yǎng)無細(xì)菌生長(zhǎng)”（結(jié)核可培養(yǎng)8周報(bào)告陰性）13（
5、二）細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)14（一）標(biāo)本的采集與送檢1.采樣：腰椎穿刺術(shù)無菌采集腦脊液3-5ml，床邊接種或放入無菌試管中，立即送檢（采樣到送檢不超過1h）；2.注意保溫，不可置冰箱保存，因?yàn)闀?huì)使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟氏菌、肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌；3、腦膿腫吸出物尚須檢測(cè)厭氧菌和寄生蟲培養(yǎng)基選擇：普通血培養(yǎng)瓶、厭氧血培養(yǎng)瓶、血平皿、中國藍(lán)平皿、流感嗜血桿菌平皿等。二、腦脊液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)15（二）細(xì)菌學(xué)檢查1．涂片檢查：革蘭染色：查找一般細(xì)菌，尤其腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和鏈球菌多見。抗酸染色：查找結(jié)核分枝桿菌。墨汁染色：查找新
6、型隱球菌。2．細(xì)菌培養(yǎng)：腦脊髓液培養(yǎng)多數(shù)需3～4天，在此期間如有細(xì)菌生長(zhǎng)，經(jīng)鑒定報(bào)告“××菌”，同時(shí)報(bào)告藥敏試驗(yàn)結(jié)果。16床邊接種離心涂片，同時(shí)增菌不染色鏡檢革蘭、抗酸、墨汁染色單菌落涂片染色離心沉淀物或増菌培養(yǎng)物腦脊液報(bào)告單17三、穿刺液和引流液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集與送檢1、標(biāo)本來源：胸腔積液、腹水、心包積液、關(guān)節(jié)液、膽汁、鞘膜液深部組織液等2、標(biāo)本量：心包積液、關(guān)節(jié)液為1-5ml，胸腔積液、腹水為5-10ml3、收集送檢：無菌收集并置于無菌抗凝試管送檢，無法立即送檢可冷藏；標(biāo)本還可床邊接種或置厭氧運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送
7、檢，無法立即送檢可室溫保存。18（二）細(xì)菌學(xué)檢查1、標(biāo)本處理：①漿液離心沉淀物涂片；②膿液直接涂片；③含血細(xì)胞，加等量蒸餾水破壞紅細(xì)胞后，離心沉淀物涂片2、涂片檢查：這類標(biāo)本因原部位是無菌的，只要檢出細(xì)菌即可診斷感染的類型，故直接涂片很重要。革蘭染色：查找一般細(xì)菌。抗酸染色：查找結(jié)核分枝桿菌。3、分離培養(yǎng)及鑒定：離心沉淀物分別接種增菌肉湯、血瓊脂平板、中國藍(lán)或麥康凱瓊脂平板、厭氧血瓊脂平板。如有細(xì)菌生長(zhǎng)，需進(jìn)一步鑒定和藥敏試驗(yàn)后報(bào)告。19四、尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集與送檢1、采集方法：防止尿液被尿道口菌群污染，采用
8、中段尿采集法、導(dǎo)尿法和膀胱穿刺法采集標(biāo)本無菌導(dǎo)尿管采集尿液，在排出15ml尿液后收集，有潛在引入尿道菌的危險(xiǎn)；留置導(dǎo)尿管采尿，先以75%酒精消毒導(dǎo)管口，用無菌注射器收集10ml；長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿管患者，應(yīng)在更換新尿管時(shí)留取尿標(biāo)本。202、采集時(shí)間：通常應(yīng)采集早晨起床后第一次尿液，在抗菌藥物應(yīng)用
