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1、微波輔助法提取穿破石總黃酮工藝優(yōu)化 摘要：以乙醇溶液為提取溶劑，采用微波輔助法從穿破石（RadixCudramiae）中提取總黃酮，在單因素試驗的基礎(chǔ)上采用正交試驗考察乙醇溶液體積分數(shù)、料液比、微波功率及微波處理時間對總黃酮提取率的影響。結(jié)果表明，4個因素對總黃酮提取率的影響由大到小依次為微波功率、乙醇溶液體積分數(shù)、微波處理時間、料液比，優(yōu)化的微波輔助法提取穿破石中總黃酮的最佳條件為乙醇溶液的體積分數(shù)60%、料液比m穿破石∶V乙醇=1∶50（g/mL）、微波功率560W、微波處理時間90s，此條件下穿破石中總黃酮提取率為1.96%。關(guān)
2、鍵詞：穿破石（RadixCudramiae）；總黃酮；微波輔助提取中圖分類號：R284.2文獻標識碼：A文章編號：0439-8114（2013）13-3134-03穿破石（RadixCudramiae）為?？浦参飿?gòu)棘（Cudraniacohinchinensis）或柘樹（C.7tricuspidata）的根，具有祛風利濕、活血通經(jīng)功效，能治療風濕關(guān)節(jié)疼痛、跌打損傷、黃疸及疔瘡癰腫等病癥，是民間常用本草中藥[1-4]。近年來，微波輔助提取法被廣泛應(yīng)用于植物有效成分的提取，該法具有設(shè)備簡單、提取效率高、安全環(huán)保等優(yōu)點[5]。本研究以穿破石干
3、粉為原料，采用微波輔助法提取其中的總黃酮，考察乙醇溶液體積分數(shù)、料液比、微波功率及微波處理時間對穿破石總黃酮提取率的影響，優(yōu)化提取工藝條件，為更好地開發(fā)和利用穿破石資源提供理論依據(jù)[6，7]。1材料與方法1.1材料與儀器穿破石采自中越邊境廣西壯族自治區(qū)崇左市龍州縣彬橋鄉(xiāng)小青山。清洗干凈，置于60℃烘箱中烘干，粉碎后過60目篩，貯藏于干燥箱中備用。蘆丁標準品為美國Bioszune公司產(chǎn)品，生化試劑，純度≥98%；亞硝酸鈉（NaNO2）、硝酸鋁（Al（NO3）3）、氫氧化鈉（NaOH）、乙醇等均為分析純。主要儀器設(shè)備有UV-1601型紫外可
4、見分光光度計（北京瑞利分析儀器公司）、101-2型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海躍進醫(yī)療器械廠）、FW800型高速萬能粉碎機（天津市泰斯特儀器有限公司）、AR124CN型電子天平（奧豪斯儀器（上海）有限公司）、KJ23B-AN型美的微波爐（廣東美的微波爐制造有限公司）、SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）、DKS-12型不銹鋼新型電熱恒溫水浴鍋（杭州藍天化驗儀器廠）。1.2試驗方法1.2.1蘆丁標準曲線的繪制精確稱取經(jīng)102℃干燥至恒重的蘆丁標準品25.07mg，加80%（體積分數(shù)，下同）的乙醇溶液溶解，并定容于100mL
5、容量瓶中，得到標準液。精確吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和12.0mL標準液分別于50mL容量瓶中，加50mg/mL的NaNO21.5mL，混勻，放置6min，加0.1g/mL的Al（NO3）31.5mL，混勻，放置6min，加40mg/mL的NaOH20mL，再加80%的乙醇溶液至刻度，搖勻，放置15min，以80%的乙醇溶液為空白對照，在510nm波長處測定溶液的吸光度，得到蘆丁濃度（C//mg/mL）對吸光度（A）的標準曲線（圖1），回歸方程為A=11.533C+0.008，r=0.9998。1.2.2穿破石總黃
6、酮的提取稱取1g穿破石干粉，加入一定體積分數(shù)的乙醇溶液作提取劑，在60℃恒溫水浴1h后進行微波處理，提取液真空抽濾并收集濾液于100mL容量瓶中定容，然后吸取1.0mL濾液于50mL容量瓶中，按“1.2.1”方法測定總黃酮濃度，計算穿破石總黃酮提取率。1.2.3單因素試驗設(shè)計單因素試驗分別考察乙醇溶液體積分數(shù)、料液比（m穿破石∶V乙醇，g/mL，下同）、微波功率、微波處理時間4個因素對穿破石總黃酮提取率的影響。①乙醇溶液體積分數(shù)。取5份各1g穿破石干粉，加入40mL體積分數(shù)分別為50%、55%、60%、65%、70%的乙醇溶液，60℃恒
7、溫水浴1h后以400W的微波功率處理60s，計算總黃酮提取率。②料液比。取5份各1g穿破石干粉，分別加入30、40、50、60、70mL體積分數(shù)60%的乙醇溶液，607℃恒溫水浴1h后以400W的微波功率處理60s，計算總黃酮提取率。③微波功率。取5份各1g穿破石干粉，加入60mL體積分數(shù)60%的乙醇溶液，60℃恒溫水浴1h后分別以80、240、400、560、800W的微波功率處理60s，計算總黃酮提取率。④微波處理時間。取5份各1g穿破石干粉，加入60mL體積分數(shù)60%的乙醇溶液，60℃恒溫水浴1h后以400W的微波功率分別處理60
8、、70、80、90、100s，計算總黃酮提取率。1.2.4正交試驗設(shè)計正交試驗進一步考察乙醇溶液體積分數(shù)、料液比、微波功率、微波處理時間4個因素對穿破石總黃酮提取率的影響。正交試驗因素與水平見表1。2結(jié)果與
