酶學考試重點電子教案.doc

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1、精品好文檔，推薦學習交流1.酶的特征：催化高效性，催化專一性。2.酶學委員會提出以酶所催化的化學反應(yīng)性質(zhì)作為酶的分類和命名規(guī)則的主要依。3.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是，碳源、氮源，碳氮比，其次是無機鹽、生長因子和產(chǎn)酶促進劑等。4．工業(yè)上最常用的是液體深層發(fā)酵5.酶的分離純化方法根據(jù)酶和雜蛋白的性質(zhì)差異，它們的分離方法可分為：(1)根據(jù)分子大小而設(shè)計的方法。如離心分離法、篩膜分離法、凝膠過濾法等。(2)根據(jù)溶解度大小分離的方法、如鹽析法、有機溶劑沉淀法、共沉淀法、選擇性沉淀法、等電點沉淀法等。(3)按分子所帶正負電荷多少分離的方法，如離子交換分離法、電泳分離法、聚焦層析法等。(4)按

2、穩(wěn)定性差異建立的分離方法，如選擇性熱變性法、選擇性酸堿變性法、選擇性表面變性法等。(5)按親和作用的差異建立的分離方法，如親和層析法、親和電泳法等。6.（1）凝膠過濾層析的原理a.小分子由于擴散作用進入凝膠內(nèi)部被截留；大分子被排阻在顆粒外，在顆粒間迅速通過。b.1.蛋白質(zhì)混合物上柱，2.洗脫開始，小分子擴散進入凝膠顆粒內(nèi)大分子被排阻在顆粒外，3.小分子被截留，大分子向下移動，大小分子分開，4.大小分子完全分開，5.大分子行程較短，已洗脫出層析柱，小分子尚在行進中。7.酶活力：指酶催化反應(yīng)的能力，它表示樣品中酶的含量。酶活力單位：即酶單位（U），是衡量酶活力的大小即酶含量的多

3、少的指標。在一定條件下，一定時間內(nèi)將一定量的底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量。（U/g或U/ml）比活力：指單位蛋白質(zhì)(毫克蛋白質(zhì)或毫克蛋白氮)所含有的酶活力(單位/毫克蛋白)。比活力是酶純度指標，比活力愈高表示酶愈純，即表示單位蛋白質(zhì)中酶催化反應(yīng)的能力愈大8.影響酶保存期的因素(1)溫度(2)pH與緩沖液(3)酶蛋白濃度(4)氧(5)穩(wěn)定劑9.固定化酶的定義：固定化酶(immobilizedenzyme)，是指在一定的空間范圍內(nèi)起催化作用，并能反復(fù)和連續(xù)使用的酶。10.固定化酶的優(yōu)點（1）同一批固定化酶能在工藝流程中重復(fù)多次地使用；（2）固定化后，和反應(yīng)物分開，有利于控制生產(chǎn)過程

4、，同時也省去了熱處理使酶失活的步驟；（3）穩(wěn)定性顯著提高；（4）可長期使用，并可預(yù)測衰變的速度；（5）提供了研究酶動力學的良好模型。11.酶的固定化方法有哪些？各有什么優(yōu)缺點？吸附法：分為物理吸附法優(yōu)點：操作簡單、價廉；條件溫和；載體可反復(fù)使用；酶與載體結(jié)合后，活性部位及空間構(gòu)象變化不大，固定化酶活力較高。缺點：由于靠物理吸附作用，酶和載體結(jié)合不牢固，在使用過程中容易脫落。和化學吸附法優(yōu)點：操作簡便、條件溫和、酶活力不易喪失等。此外，吸附過程同時可以純化酶。缺點：酶與載體的結(jié)合不夠牢固，易受環(huán)境因素如pH、離子強度、底物濃度等影響。包埋法：方法簡單，防止酶滲出，酶回收率高。

5、缺點：只適用于小分子底物和產(chǎn)物酶；高聚物網(wǎng)格或半透性膜對小分子物質(zhì)擴散的阻力可能導(dǎo)致固定化酶的動力學行為改變和活力的降低。共價鍵結(jié)合法：優(yōu)點：酶和載體之間的結(jié)合相當牢固，酶穩(wěn)定性好、可連續(xù)使用較長時間。缺點：載體活化的難度較大，操作復(fù)雜，反應(yīng)條件較劇烈，制備過程中酶直接參與化學反應(yīng)，易引起酶蛋白空間構(gòu)象變化。交聯(lián)法優(yōu)點：結(jié)合牢固、穩(wěn)定性好。缺點：酶活力損失大，交聯(lián)劑價格昂貴。3酶固定化后，酶活力降低的原因?①酶活性中心的重要氨基酸殘基與水不溶性載體相結(jié)合；②當酶與載體結(jié)合時，其構(gòu)象的改變導(dǎo)致了酶與底物結(jié)合能力或催化底物轉(zhuǎn)化能力的改變；③酶被固定化后，雖不失活，但酶與底物間的

6、相互作用受到空間位阻的影響。僅供學習與交流，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除謝謝4精品好文檔，推薦學習交流12.固定化酶的穩(wěn)定性增強主要表現(xiàn)在：（1）操作穩(wěn)定性（2）貯藏穩(wěn)定性（3）熱穩(wěn)定性（4）對蛋白酶的穩(wěn)定性（5）酸堿穩(wěn)定性13根據(jù)作用底物的不同.糖酶的分類：淀粉酶、乳糖酶、果膠酶、纖維素酶。14．α-淀粉酶作用方式：以隨機的方式作用于淀粉而產(chǎn)生還原糖。15．以直鏈淀粉為底物時，反應(yīng)一般按兩個階段進行：首先，直鏈淀粉快速分解，產(chǎn)生寡糖，粘度及與碘返生呈色反應(yīng)的能力很快下降；第二階段，寡糖緩慢水解生成最終產(chǎn)物葡萄糖和麥芽糖。以支鏈淀粉為底物時，產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖和一系列α-限制糊精

7、（由4個或更多葡萄糖基構(gòu)成的寡糖，含α-1.6糖苷鍵）α-淀粉酶的作用機制α-淀粉酶是內(nèi)切酶型，隨機作用于淀粉、糖原的α-1,4-糖苷鍵，對α-1,6-糖苷鍵則不能水解。16．水解直鏈淀粉時，先切開淀粉分子中間部分的α-1,4-糖苷鍵，使長鏈淀粉很快地分解成短鏈的糊精，糊精再繼續(xù)水解，最后產(chǎn)物為α-麥芽糖和少量的葡萄糖水解支鏈淀粉時，由于不能水解分支點的α-1,6-糖苷鍵，因此產(chǎn)物中不僅有α-麥芽糖和少量的葡萄糖，還產(chǎn)生異麥芽糖。異麥芽糖是支鏈淀粉分子的分支點，是由兩個葡萄糖以α-1,6-糖苷鍵相連的雙糖。17．1