資源描述：
《最新4細(xì)胞破碎911and913解析ppt課件.ppt》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、4細(xì)胞破碎911and913解析細(xì)胞結(jié)構(gòu)動物細(xì)胞：大多無細(xì)胞壁，其培養(yǎng)產(chǎn)物大多分泌在培養(yǎng)液中。植物細(xì)胞：多為胞內(nèi)產(chǎn)物。微生物：大多數(shù)小分子代謝產(chǎn)物分泌在胞外；大多數(shù)大分子產(chǎn)物和基因重組產(chǎn)物為胞內(nèi)產(chǎn)物，如胰島素、干擾素、白細(xì)胞介素-2等均為胞內(nèi)產(chǎn)物。對于胞內(nèi)產(chǎn)物，首先必須將細(xì)胞破碎，使產(chǎn)物得以釋放，才能進(jìn)一步提取。TABLE4.0-1.ChemicalCellDisintegrationTechniquesMethodTechniquePrincipleStressCostExamplesChemicalOsmot
2、icshockOsmoticruptureofmembraneGentleCheapRuptureofredbloodcellsEnzymedigestionCellwalldigested,providingdisruptionGentleExpensiveEgglysosymeSolubilizationDetergentssolubilizecellmembraneGentleModerate-expensiveBilesaltsactingonE.coliLipiddissolutionOrganicso
3、lventdissolvesincellwallModerateCheapToluenedisruptionofyeastAlkalitreatmentSaponificationoflipidssolubilizesmembraneHarshCheap方法技術(shù)原理效果成本舉例化學(xué)法滲透沖擊滲透壓破壞細(xì)胞溫和便宜血紅細(xì)胞的破壞酶消化法細(xì)胞壁被消化，使細(xì)胞破碎溫和昂貴增溶法表面活性劑溶解細(xì)胞壁溫和適中膽鹽作用于大腸桿菌脂溶法有機(jī)溶劑溶解細(xì)胞壁并使之失穩(wěn)適中便宜甲苯破碎酵母細(xì)胞堿處理法堿的皂化作用使細(xì)胞壁融解劇烈便宜
4、MethodTechniquePrincipleProductCostExamplesMechanicalHomogenization(bladetype)CellschoppedinWaringblenderModerateModerateAnimaltissueandcellsGrindingCellsrupturedbygrindingwithabrasivesModerateCheapUltrasonicationCellsbrokenwithultrasoniccavitationHarshExpens
5、iveCellsuspensionsatleastonasmallscaleHomogenization(orificetype)CellsforcedthroughsmallholearebrokenbyshearHarshModerateLargescaletreatmentofcellsuspensions,CrushinginballmillCellscrushedbetweenglassorsteelballsHarshCheapLargescaletreatmentofcellsuspensionsa
6、ndplantcellsTABLE4.0-1.MechanicalCellDisintegrationTechniques方法技術(shù)原理效果成本舉例機(jī)械法勻漿法（片型）細(xì)胞被攪拌器劈碎適中適中動物組織及動物細(xì)胞研磨法細(xì)胞被研磨物磨碎適中便宜超聲波法用超聲波的空穴作用使細(xì)胞破碎適中昂貴細(xì)胞懸浮液小規(guī)模處理勻漿法（孔型）須使細(xì)胞通過的小孔，使細(xì)胞受到剪切力而破碎劇烈適中細(xì)胞懸浮液大規(guī)模處理珠磨破碎法細(xì)胞被玻璃珠或鐵珠搗碎劇烈便宜細(xì)胞懸浮液和植物細(xì)胞的大規(guī)模處理表4.0-1.細(xì)胞物理破碎法化學(xué)方法主要的幾種化學(xué)方法，有滲
7、透沖擊法，表面活性劑增溶法、脂溶法。首先簡單的介紹一下酶消化法和堿處理法。酶消化法和堿處理法都是細(xì)胞破碎的有效方法，但是也都有各自的缺點(diǎn)。原理：利用酶反應(yīng)，分解破壞細(xì)胞壁上的特殊鍵，從而達(dá)到破壁的目的。自溶法——控制一定條件，誘發(fā)細(xì)胞自溶酶使細(xì)胞破碎。自溶法常采用加熱法或干燥法。外加酶法——根據(jù)細(xì)胞壁膜的結(jié)構(gòu)及組成選擇合適的酶。細(xì)菌大多用溶菌酶(lysozyme)酵母菌常用溶酶有：β-1,3-葡聚糖酶(glucanase)、β-1,6-葡聚糖酶、蛋白酶(protease)、甘露糖酶(mannanase)、糖苷酶(
8、glycosidase)、肽鍵內(nèi)切酶(endopeptidase)、殼多糖酶等。酶溶法酶溶法需要特定的反應(yīng)條件。酶具有高度專一性，必須根據(jù)細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成選擇適當(dāng)?shù)拿富蛉苊赶到y(tǒng)，并確定相應(yīng)的次序。酶溶法的優(yōu)點(diǎn)是：具有選擇性釋放產(chǎn)物條件溫和，核酸泄出量少，細(xì)胞外形完整。酶溶法的不足：一是溶酶價格高；二是酶溶法通用性差，且不易確定最佳的溶解條件；三是存在產(chǎn)物抑制酶消化法
