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1、D二聚體的檢測及臨床應(yīng)用纖維蛋白原和纖維蛋白被降解，所產(chǎn)生的各種碎片、二聚體、多聚體及復(fù)合物，即FgDP和FbDP統(tǒng)稱為纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP）D-二聚體是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子FXⅢa交聯(lián)形成纖維蛋白后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的特異性降解產(chǎn)物?！锊∪藴?zhǔn)備（受檢者狀態(tài)的影響）①隨年齡的增長特別是老年人D-二聚體的水平有所升高，與年輕人相比有顯著性差別。隨孕期的延長妊娠婦女的D-二聚體水平也升高，且雙胎妊娠升高的更明顯。②在腦血管卒中、溶血栓治療、嚴(yán)重感染、膿毒血癥、組織壞疽、先兆子癇、甲狀腺功能減低、重癥肝病
2、、結(jié)節(jié)病等情況下，常有凝血和纖溶系統(tǒng)的激活，也可見D-二聚體升高。因此，在進(jìn)行某種疾病診斷時，應(yīng)考慮病人已患疾病及病情對診斷的影響。③高脂血癥患者纖溶系統(tǒng)活性受到抑制，血漿D-二聚體結(jié)果常偏低，易造成假陰性。也有報道，飲酒者較不飲酒者D-二聚體水平有顯著升高。④藥物影響使用尿激酶進(jìn)行溶栓治療時，D-二聚體水平顯著升高。尿激酶（UK）、鏈激酶（SK）等能直接將纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶，促使體內(nèi)纖維蛋白溶解系統(tǒng)活性的增強(qiáng)；口服避孕藥和雌激素能增加凝血活性，降低纖溶活性；肝素則可促進(jìn)組織纖溶酶原激活物（t-PA）的釋放，而增
3、強(qiáng)纖溶活性。★檢驗(yàn)樣本的采集①采血方法：采血時，一般要在病人空腹、安靜狀態(tài)下進(jìn)行，以早晨07:00至09:00最為適宜，因?yàn)樯镧姇r間對檢測指標(biāo)有一定的影響。對于多次反復(fù)采血的病人最好在同一固定時間和同一條件下采血。②止血帶：一針見血，見血即去③采血順序：血培養(yǎng)——凝血項(xiàng)目——不抗凝項(xiàng)目——抗凝項(xiàng)目④采完血后應(yīng)拔掉針頭，將血液沿管壁緩緩注入試管，要避免產(chǎn)生氣泡，因?yàn)榕菽漠a(chǎn)生可使纖維蛋白原變性。血液和抗凝劑混勻時應(yīng)輕輕顛倒，避免用力振蕩而破壞凝血蛋白。⑤抗凝劑⑥標(biāo)本的貯存：血液要求采集于塑料或硅化試管中，并采用塑料
4、移液管分離血漿。血漿貯存在塑料或硅化、帶塞子的試管中，因?yàn)椴ＡЭ梢约せ钜蜃英?，從而可以激活纖溶酶原，啟動纖溶系統(tǒng)，而影響檢測結(jié)果?！锔蓴_物質(zhì)的影響D-二聚體在測定過程中易受血漿中多種干擾物質(zhì)的影響，如類風(fēng)濕因子（RF）、膽紅素、肝素、血脂等。不同測定方法和試劑，受干擾的程度也不一致。一般認(rèn)為，總膽紅素＜17μmol/L，結(jié)合膽紅素＜6.8μmol/L，非結(jié)合膽紅素＜10.2μmol/L，血紅蛋白＜150g/L，乳糜＜1960濁度單位，類風(fēng)濕因子＜5KU/L，對測定值無影響。 研究表明，測定D-二聚體時，當(dāng)血漿中類風(fēng)
5、濕因子（RF）增高時，會導(dǎo)致D-二聚體測定結(jié)果偏高，引起D-二聚體陽性率明顯升高；建議當(dāng)臨床上依據(jù)D-二聚體實(shí)驗(yàn)結(jié)果作為排除靜脈血栓性疾病時，應(yīng)排除RF的存在。D-二聚體檢測的方法★膠乳凝集法：經(jīng)典膠乳凝集法是將被檢血漿中D-二聚體與包被在乳膠顆粒上的單克隆抗體相作用，產(chǎn)生絮狀沉淀反應(yīng)進(jìn)行定性或半定量測定。該法操作簡便、快速，適用于床邊檢測（POCT），常作為篩查試驗(yàn)用?！锩嘎?lián)免疫吸附法（ELISA）：ELISA法檢測原理是包被抗人D-二聚體與待測標(biāo)本中抗原結(jié)合，加入酶標(biāo)抗體后形成復(fù)合物，再加入底物呈顯色反應(yīng)，測得
6、的吸光度值與標(biāo)本中抗原量成正比。該法具有靈敏度高、定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)，但經(jīng)典ELISA法操作步驟復(fù)雜、費(fèi)時，不適合急診使用?！镒陨砑t細(xì)胞凝集法：自身紅細(xì)胞凝集法采用分別針對D-二聚體和紅細(xì)胞膜上表位的雙抗體，當(dāng)血中D-二聚體水平升高時，抗原-抗體結(jié)合的增多而導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集，2min內(nèi)可以判斷結(jié)果，為半定量的自身紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)。其優(yōu)點(diǎn)是可用全血檢測，省去了離心制備血漿的麻煩?！锬z體金顯色反應(yīng)法：該法是將單克隆抗體吸附在多孔薄膜并粘放在有多層吸收墊的塑料盤上，被檢標(biāo)本加入后即與該抗體結(jié)合，然后加入膠體金標(biāo)記的抗體，在薄膜上
7、即產(chǎn)生紅色強(qiáng)度，紅色強(qiáng)度與血漿中抗原成比例，在幾分鐘內(nèi)即可完成。該法易受白細(xì)胞、血小板、類風(fēng)濕因子、肝素及血脂等物質(zhì)的干擾，特異性不強(qiáng)，在不同的報道中其敏感性和陰性預(yù)測值（NPV）差別較大，并且廠商和實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果存在較大的差異。★膠乳免疫比濁法：膠乳免疫比濁法是樣本中抗原與包被在膠乳顆粒上的單克隆抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)，在一定的緩沖體系中產(chǎn)生凝集而導(dǎo)致濁度增大，濁度的變化率與抗原濃度成正比。目前，已有多種全自動血凝儀用于免疫比濁法D-二聚體的檢測，整個檢測過程可以由儀器自動完成，檢測效率高，除去準(zhǔn)備標(biāo)本的時間，一般
8、只要5min便可報告準(zhǔn)確的定量結(jié)果。該法有操作簡便、快速、定量準(zhǔn)確、敏感度高等優(yōu)點(diǎn)，可滿足POCT等需要，在臨床研究中應(yīng)用越來越廣泛。D-二聚體檢測的技術(shù)現(xiàn)狀★制備單克隆抗體，針對的只是某類D-二聚體亞型?！锊±磉^程中可產(chǎn)生多種D-二聚體亞型，由于不同檢測試劑只測定其中某種降解片段（亞型），而非降解片段的全部，因此各類試劑在對同一標(biāo)本進(jìn)行測定時，其敏感性顯著
