梅毒實(shí)驗室檢測技術(shù)概述

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1、梅毒實(shí)驗室檢測技術(shù)概述尹建奇河北省人民醫(yī)院皮膚科，石家莊050051摘要：梅毒的實(shí)驗室檢測方法主要有3種，即分泌物病原體、血清及腦脊液檢測。其中最主要的方法為血清學(xué)試驗，其又分為特異性和非特異性梅毒血清學(xué)檢測。這些方法對于各期梅毒的診斷具有極其重要的價值。關(guān)鍵詞梅毒、梅毒螺旋體，血清學(xué)、檢測技術(shù)，實(shí)驗室梅毒(syphilis)是危害人類健康較為嚴(yán)重的性傳播疾病之一，近年來在我國的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，選擇敏感性、特異性均高的梅毒檢測方法有助于梅毒的早期診斷。梅毒的病原體是梅毒螺旋體(treponem

2、apallidum,TP)，其含有表面抗原，能刺激機(jī)體產(chǎn)生兩類抗體，一類為抗密螺旋體的特異性抗體;另一類為非特異性抗體。根據(jù)梅毒螺旋體的生物學(xué)及免疫學(xué)特性，目前國內(nèi)外所用的梅毒螺旋體的檢測方法主要有以下幾種。1病原體的檢測直接觀察分泌物中的梅毒螺旋體，如見到運(yùn)動活潑的蒼白螺旋體可直接診斷梅毒，是最特異、最準(zhǔn)確的診斷方法，但靈敏度低。1.1暗視野顯微鏡檢查梅毒螺旋體(DF)是梅毒病原體檢測的主要方法之一。用暗視野顯微鏡可直接觀察到病灶分泌物中的梅毒螺旋體，結(jié)合臨床癥狀可直接診斷梅毒，適用于早期梅毒的診

3、斷。該方法不僅操作簡單，且經(jīng)濟(jì)、快速，但此法對晚期及隱性梅毒或口腔病灶標(biāo)本不適用。1.2活體組織檢查梅毒螺旋體常用銀染色法(warthinstarry)或熒光抗體染色，可查見梅毒螺旋體，呈黑褐色。銀染色的陽性結(jié)果需謹(jǐn)慎解釋，因為類似梅毒螺旋體的其他物質(zhì)易混淆。1.3多功能顯微診斷儀(multifunctionalmicroscopydiagnosticinstrument，MDI)是近年來國外開發(fā)的一種綜合相差對比、暗視野及偏振光的可變投影顯微鏡，其特點(diǎn)是待檢查標(biāo)本不需染色及任何加工處理，而是將“活

4、的’，真實(shí)的樣品直接進(jìn)行觀察，具有直接、方便、快速的優(yōu)點(diǎn)。但整套儀器價格昂貴，很難普及到各個梅毒檢測實(shí)驗室。2梅毒血清學(xué)試驗是梅毒診斷最主要的實(shí)驗室檢查方法，根據(jù)所用抗原不同可分為兩類。2.1非梅毒螺旋體抗原血清試驗用心磷脂作抗原，測定血清中抗心磷脂抗體，此類試驗為非特異性抗體檢測試驗，目前多數(shù)醫(yī)院列為梅毒的常規(guī)篩查試驗。這類試驗可觀察療效、復(fù)發(fā)及再感染，適于二期梅毒的診斷，而不適于診斷一、三期梅毒，包括潛伏梅毒、神經(jīng)梅毒的診斷。2.1.1康、瓦氏試驗是最早檢測梅毒患者體內(nèi)存在抗體的方法，這兩種試驗

5、的抗原采自牛心肌粉酒精浸液，稱作心肌脂抗原。此類試驗操作復(fù)雜，易出現(xiàn)假陽性。這2種試驗現(xiàn)已被淘汰。2.1.2性病研究實(shí)驗室試驗(venerealdiseaseresearchlaboratorytest，VDRL)美國Pangborn等發(fā)現(xiàn)一種性病研究實(shí)驗室抗原(VDRL)，是從牛心肌中提取的心擬脂，適量加入膽固醇及卵磷脂以提高敏感性，通常稱這種抗原為心擬脂抗原。VDRL試驗屬于微量玻片法，是唯一推薦用于檢測腦脊液反應(yīng)素的試驗，對診斷神經(jīng)梅毒具有重要價值，可作定量及定性試驗，操作簡單，試劑及對照血清

6、已標(biāo)準(zhǔn)化，費(fèi)用低。但對一期梅毒敏感性不高。2.1.3快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR)是80年代問世的非特異性梅毒血清學(xué)試驗，所用抗原為標(biāo)準(zhǔn)的牛心肌脂抗原，該方法操作簡便、迅速，適用于大量標(biāo)本檢測，目前許多血站用RPR試驗對獻(xiàn)血者進(jìn)行梅毒普查。RPR試驗和DF方法對一期梅毒的診斷相互配合，可早期診斷梅毒[’〕。缺點(diǎn)是當(dāng)抗體含量過高時，易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，即前帶現(xiàn)象(prozonephenomenon)，會有漏檢;還易出現(xiàn)生物學(xué)假陽性反應(yīng)。對潛伏期梅毒、神經(jīng)梅毒不敏感。2.1.4不加熱血清反應(yīng)素試驗(

7、USR)是VDRL抗原的改良，本方法在我國目前廣泛采用。血清不需加熱滅活，節(jié)省操作時間，但主觀性強(qiáng)，易出現(xiàn)漏檢。USR與RPR試驗可作為療效觀察或隨訪是否復(fù)發(fā)或再感染的指征。2.1.5甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(TRUST)TRUST試驗所用的抗原是從牛心提取的心磷脂和從雞蛋黃提取的卵磷脂及膽固醇，試驗結(jié)果清晰易讀，簡便快速，穩(wěn)定性好，TRUST法比RPR.USR效價測定高一個滴度[21。缺點(diǎn)是許多因素影響結(jié)果，如高脂血癥和抗心磷脂抗體陽性的血清均可干擾而出現(xiàn)假陽性結(jié)果[[312.2梅毒螺旋體抗原

8、血清試驗用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體。這種試驗敏感性和特異性均高，一般用作確認(rèn)試驗[“〕。這種試驗是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG或IgM抗體，該抗體即使患者經(jīng)過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應(yīng)持續(xù)存在陽性，因此，不能用于觀察療效。2.2.1熒光密螺旋體抗體吸收試驗(fluorescenttreponemalantibodyabsorptiontest,FTAABS)是以Reiter株抗原吸收待檢血清，保證了試驗結(jié)果的特異性;以