梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與技術(shù)規(guī)范

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1、梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范朱穗蘭2013年3月2日主要內(nèi)容梅毒概述梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范梅毒概述（一）性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來(lái)越小到感染后2年，通過(guò)性接觸一般無(wú)傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過(guò)胎盤(pán)傳染未經(jīng)治療者，雖已無(wú)性傳播（病期>2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒,病期越長(zhǎng)，傳染性越小;梅毒概述（二）一期梅毒硬下疳和(或)腹股溝淋巴結(jié)腫大二期梅毒可有一期梅毒史，病期在2年以內(nèi)有多形性皮疹、扁平濕疣等三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮膚黏膜損害等，包括神經(jīng)梅毒、心血管梅

2、毒隱性（潛伏）梅毒早期：病期在2年以內(nèi)；晚期：病期在2年以上。無(wú)任何梅毒性的癥狀和體征胎傳（先天）梅毒早期：在2歲前發(fā)生；晚期：在2歲以后發(fā)病。胎傳隱性梅毒：無(wú)臨床表現(xiàn)梅毒概述（三）疑似病例、確證病例診斷依據(jù)：病史癥狀實(shí)驗(yàn)室檢查梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）兩類方法。為什么梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷需要兩類血清學(xué)檢測(cè)方法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來(lái)的一種類脂成

3、分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體在3周-4周產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w的作用無(wú)保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)煞N檢測(cè)法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣方法包括：（1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）（3）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所

4、見(jiàn)上述方法的敏感性和特異性都基本相似試驗(yàn)特點(diǎn)原理和成分與試驗(yàn)相同血清不需要滅活不需要顯微鏡觀測(cè)結(jié)果可作定量試驗(yàn)有現(xiàn)成的試劑盒攜帶方便操作簡(jiǎn)單價(jià)格便宜操作要點(diǎn)儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀。定性實(shí)驗(yàn)加樣：吸取50ul血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號(hào)針頭加1滴抗原反應(yīng)：將卡片置水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘，立即在亮光下觀察結(jié)果3.定量試驗(yàn)稀釋夜準(zhǔn)備：在圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開(kāi)。加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個(gè)圈內(nèi)。下同定性試驗(yàn)。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果判斷RPRTRUST非梅毒螺旋體抗原

5、血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽(yáng)性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。為什么要做定量檢測(cè)？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽(yáng)性。TRUST結(jié)果解釋示意圖假陽(yáng)性問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽(yáng)性①技術(shù)性假陽(yáng)性由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過(guò)期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。②生物學(xué)假陽(yáng)性是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性某些疾?。航Y(jié)核、瘧疾、肝病、紅斑狼

6、瘡、流感、肺炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、風(fēng)疹、系統(tǒng)性硬化癥等，疾病發(fā)展過(guò)程中釋放心磷脂到血液中呈假陽(yáng)性。老年人。生理機(jī)能發(fā)生變化：少數(shù)孕婦也可發(fā)生生物學(xué)假陽(yáng)性。梅毒假陽(yáng)性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽(yáng)性反應(yīng)，經(jīng)過(guò)重復(fù)試驗(yàn)即可除外。對(duì)生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，應(yīng)做TPHA（TPPA）等試驗(yàn)進(jìn)行排除。前帶現(xiàn)象指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)了陽(yáng)性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象。處理：將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)。耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非

7、梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT)熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）TPPATPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒，此致敏顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生