ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy探素

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ABO血型系統(tǒng)及定型

1正定型（細(xì)胞定型）用已知抗體特異性的試劑血清檢查紅細(xì)胞的抗原玻片法試管法微量板法ABO常規(guī)定型

2ABO常規(guī)定型反定型（血清定型）用已知血型的試劑紅細(xì)胞檢查血清中的抗體試管法微量板法

3正反定型結(jié)果相符時，才可以記錄血型結(jié)果。

4ABO正反不符時受檢紅細(xì)胞是洗滌后懸浮于NS.嗎?是用最敏感的試管法嗎?受檢者年齡<1或>60嗎?病人的丙種球蛋白減低嗎?病人血清與O型普檢紅細(xì)胞的反應(yīng)與試劑紅細(xì)胞一樣嗎?病人是白血病、腸道阻塞、胃癌、結(jié)腸或直腸癌嗎？混合視野反應(yīng)是輸血后標(biāo)本嗎？

5技術(shù)上錯誤的常見來源血液標(biāo)本或試管鑒定不當(dāng)紅細(xì)胞懸浮液過濃或過淡及纖維蛋白、小血凝塊的干擾人為的書寫錯誤標(biāo)本混亂忽略觀察溶血現(xiàn)象未加入試劑未按照試劑生產(chǎn)商的說明操作離心機校準(zhǔn)不良試劑受到污染溫度在離心過程中增高

6造成正反定型不符的4種變異情況減弱的或減少的抗原反應(yīng)未知的抗原反應(yīng)減弱的或缺少的抗體反應(yīng)未知的抗體反應(yīng)

7減弱或減少的抗原反應(yīng)A或B抗原的亞血型A、B及AB型RBC與試劑抗血清作實驗時，預(yù)期反應(yīng)：4＋細(xì)胞分型法減弱的凝集反應(yīng)：健康獻(xiàn)血員可能A/B亞型抗AB血清能檢出某些不與抗A/抗B試劑發(fā)生反應(yīng)的A/B亞型

8減弱或減少的抗原反應(yīng)疾病狀態(tài)下,抗原強度減弱如:A型白血病/腫瘤患者在疾病活動期改變?yōu)锳2或A3亞型,疾病緩解期復(fù)原疾病狀態(tài)下,血型物質(zhì)過量,中和抗A/抗B試劑,造成假陰性/弱凝集:卵巢囊腫胃癌胰腺癌腸道阻塞對策:試管法紅細(xì)胞三洗

9未知抗原反應(yīng)獲得性A奇異變形桿菌感染的O/B:與抗A反應(yīng)呈混合視野

10未知抗原反應(yīng)獲得性BRBC反應(yīng)象AB型,血清中有抗B抗體細(xì)胞分型法:A抗原>B抗原

11獲得性B的成因Gerbal等假設(shè)細(xì)菌的脫乙酰基酶deactetylases可以將A的免疫結(jié)構(gòu)域糖N乙酰氨基半乳糖胺轉(zhuǎn)化為半乳糖胺。這個半乳糖胺與B的免疫多糖半乳糖非常的相似，可以與某些抗－B發(fā)生反應(yīng)。

12抗體致敏的紅細(xì)胞抗體吸附于紅細(xì)胞表面，可顯示直抗陽性自身免疫性溶血性貧血抗高血壓藥物輸血反應(yīng)新生兒溶血病放散技術(shù)移去抗體

13減弱或缺少抗體反應(yīng)年齡<1或>70丙球蛋白過低血癥丙球蛋白缺乏血癥

14未知的抗體反應(yīng)緡錢狀凝集冷自身抗體未知的ABO同種抗體未知的其它同種抗體

15ABO抗體的區(qū)別特異性血清其它來源血型頻率性質(zhì)抗BA全部常屬IgM效價8-512初乳唾液淚液(IgA)抗ABO、Oh全部常屬IgG,與Ax,A3凝集抗A在蝸牛魚卵中也可發(fā)現(xiàn)抗AB全部常屬IgM效價32-2048抗A1A2BA2Ax22-35%1-8%大多數(shù)少數(shù)報告有輸血反應(yīng)用A2細(xì)胞吸收過的抗A血清;雙花扁豆(Doliekosbiflorus)抗HOh非Oh全部部分被H物質(zhì)抑制歐洲荊豆(Ulexeuropaeus)

16天然抗體和免疫抗體天然抗體未經(jīng)可察覺的抗原刺激而產(chǎn)生的抗體O型血清中多為IgG抗A和抗BA/B型血清中大多為IgM抗體免疫抗體妊娠/輸血等

17緡錢狀凝集球蛋白濃度增高:多發(fā)性骨髓瘤/原發(fā)性巨球蛋白血癥纖維蛋白原增高血管擴張劑霍奇金淋巴瘤新生兒臍帶血中的華爾道膠

18冷自身抗體抗I是反定型中最常見的自身抗體有時也見抗i和抗Pr抗I通常凝集所有供者RBC包括患者自身及反定型所用RBC抗I引起的凝集比抗A抗B所引起的凝集弱臍帶血所帶的I抗原量少通常不被凝集

19抗HI與冷凝集有關(guān)的最常見的特異性抗體是抗I有些冷抗體與I和H抗原強的細(xì)胞如（O和A2細(xì)胞）反應(yīng)最強，稱之為抗HI聯(lián)合抗體。

20冷自身抗體之鑒別抗I抗i抗H抗HI抗Pr成OI+-+++成AI+---+臍Oi-++-+酶OI+-+++抗HI：O成>A2成>B/A成>臍O>臍AB

21未知的同種抗體ABO同種抗體:A2/A2B中的抗A1A1/A1B中的抗H未知的同種抗體:篩選細(xì)胞及反定型中的O細(xì)胞一組譜細(xì)胞鑒定抗體特異性

22ABO亞型A抗原中主要為A1和A2其它A亞型：A3、Ax、Aend、Am、Ay、和AelB亞型一般比A亞型更少：B3、Bx、Bm和Bel等

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24判斷ABO亞型:1紅細(xì)胞與抗A抗A1抗B及抗AB的凝集程度2紅細(xì)胞上H物質(zhì)活性的強弱3血清中是否存在抗A14分泌型人的唾液中A、B和H物質(zhì)

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26A1和A2的鑒別項目A1細(xì)胞A2細(xì)胞與抗A反應(yīng)4＋2＋與抗A1反應(yīng)＋－成人抗原位點100萬25萬臍血抗原位點31萬25萬?乙酰D半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶PH6時最多PH7時最多

27各種弱A亞型的鑒別程序紅細(xì)胞弱凝集混合外觀(Mf）A60A3與抗AA3Ax10％紅細(xì)胞呈十分弱的mf凝集Aend及/或抗Aend只與抗AB呈弱凝集AxA1B反應(yīng)不凝集容易吸附放散抗AAm能吸附分泌型唾液中有一定量的A物質(zhì)及放散不容易吸附放散抗AAy抗A分泌型唾液含少量的A物質(zhì)AmAy吸附放散抗AAelAel分泌型唾液只含H物質(zhì)無A物質(zhì)

28A2與人源性抗A試劑的反應(yīng)強度為4＋,與抗H+/2+可能有不規(guī)則抗A1存在(sometimes)1-8%A2和22-35%的A2B存在抗A1血型物質(zhì)AH舉例抗A抗BAcBcOc4+4++--

29A2A1和A2決定簇的區(qū)別是僅存在量的差異還是抗原決定簇結(jié)構(gòu)不同？用A2細(xì)胞重復(fù)吸收來源于B型個體的抗A血清可以移去所有抗體，表明二者之間僅是量的差別。A2和A2B個體常常產(chǎn)生抗A1，說明A2細(xì)胞上缺乏A1細(xì)胞上的一種決定簇。

30血型前體物質(zhì)：Type1Galβ1－3GlcNAcβ1－R（血清）Type2Galβ1－4GlcNAcβ1－R（紅細(xì)胞）Type3Galβ1－3GalNAcａ1－R（紅細(xì)胞）Type4Galβ1－3GalNAcβ1－R（紅細(xì)胞）Type5Galβ1－3Galβ1－R（人工合成）Type6Galβ1－4Glcβ1－R

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32A1和A2同樣存在質(zhì)的區(qū)別A1細(xì)胞出現(xiàn)重復(fù)的3型A抗原結(jié)構(gòu)，但A2細(xì)胞卻沒有。抗A1是3型或4型A特異性的，或者抗A1可以優(yōu)先與3型或4型A反應(yīng)。

33只有A1轉(zhuǎn)移酶能夠轉(zhuǎn)化3型H加一個N－乙酰氨基半乳糖基成為3型A因此A2細(xì)胞上可以檢測到3型H而不是3型A抗原。

34雙花扁豆植物血凝素檢測N－乙酰氨基半乳糖胺，當(dāng)過量的濃度下，它可以凝集A2細(xì)胞，因此將它用作A亞型分型試劑更多是依賴A1和A2表現(xiàn)型數(shù)量上的差異。

35A3最早由Friedenreich在1936年描述與抗A和抗AB共同孵育時：“混合視野外觀”（mixedfieldagglutination）。即：小的凝集塊周圍是大量未凝集的細(xì)胞。與抗A反應(yīng)強度低于A2與抗AB反應(yīng)呈混合視野,但并不增強偶有抗A1(occasionally)血型物質(zhì)AHA3不像是A2和O細(xì)胞的嵌合體

36Aend（Afinn，Abantu）Aend最早由Weiner等于1959年描述類似于A3細(xì)胞：它們與一些抗A和抗AB表現(xiàn)很弱的混合視野外觀Aend分泌型的唾液中只有H物質(zhì)，但是無A物質(zhì)抗A1出現(xiàn)在部分Aend個體的血清中10％細(xì)胞凝集（Mf）

37AmAm細(xì)胞不能被抗A和抗AB凝集，或者僅能發(fā)生很弱的凝集。Am細(xì)胞可以吸附放散抗A。Am分泌型的唾液中包含正常含量的A和H物質(zhì)，Am血清中通常無抗A1。Am作為ABO位點上一個稀有的等位基因遺傳Am在法國獻(xiàn)血者的頻率是150000中有1例。（A型人中占0.0015%），中國臺灣的數(shù)據(jù)是400000萬人中1例。

38Am抗原性較弱抗A:-/w+抗H4+(甚至?xí)^Oc)無抗A1產(chǎn)生,與抗AB反應(yīng)不增強血型物質(zhì):AH

39AxAx表現(xiàn)型最初由Fischer和Hahn于1935年報道，它的主要血清學(xué)特點是：紅細(xì)胞與多數(shù)來源于B型血清的抗A不發(fā)生反應(yīng)，但是可以被大多數(shù)來源于O型個體的抗AB凝集，沒有混合視野表現(xiàn)。血清中含有抗A1，后者有時候可以凝集A1和A2細(xì)胞。除了H物質(zhì)，Ax分泌型個體唾液中可以撿出痕量的A物質(zhì)

40Ax抗A:-/w+抗H:4+(與Oc的抗H差不多)常有抗A1(Frequently),比A2A3都高與抗A+B的反應(yīng)比抗A明顯增強血型物質(zhì)H

41AxAx表現(xiàn)型具有很高的遺傳異質(zhì)性：許多家系資料表明Ax以ABO位點上一種稀有的等位基因的方式遺傳在一些家庭中遺傳背景不清楚在兩項獨立的研究中，法國Ax的頻率為1/77000(A型人中的0.003%)和1/44000

42Aint與抗A1反應(yīng)較弱2+與抗A及抗H反應(yīng)較強4+/3+僅有A1和Aint的細(xì)胞與抗A1發(fā)生反應(yīng)

43AintLandsteiner和Levine：有些A型個體的紅細(xì)胞既不能定義為A1也不能定義為A2Aint在黑人中較白人更為常見，Aint是作為ABO位點上的一個等位基因遺傳的。它的H抗原強度象A2一樣強，甚至更強。

44Ael在通常的條件下，Ael細(xì)胞與抗A和抗AB不發(fā)生凝集，雖然它們可以結(jié)合這些抗體，結(jié)合的抗體可以通過吸收放散技術(shù)檢測到Ael分泌型唾液中無A物質(zhì)，僅有H物質(zhì)，血清中常含有抗A1，也可以含有能夠凝集A2細(xì)胞的抗體

45Ael在Ael血清和紅細(xì)胞膜上不能檢出A轉(zhuǎn)移酶。在法國150000例獻(xiàn)血者中，沒有檢測到Ael表現(xiàn)型，在中國臺灣400000人中撿出5例Ael個體Ael以ABO位點上的一種稀有的等位基因遺傳的。

46AwOlsson等對其它弱A亞型的ABO基因的外顯子、剪切部位和啟動子進(jìn)行序列測定那些表現(xiàn)型不太容易被劃分到任何現(xiàn)存的分類中。這些異常的基因被稱作Aw（1－5）。

47SubgroupsofAPheno-typeRedcellstestedWithanti-seraSerumtestedwithKnownredcellsSalivaofsecretorsAnti-A-B-AB-A1-HA1A2BOA1V_VV___V_AandHAint+++_V+++++__V_AandHA2+++_V_++Some-times.+_V_AandHA3++mf_++mf_+++Occa-sionally.+_V_AandHAm-/w+_-/w+_V__V_AandHAx-/W+_+/++_VFre-quently+_V_H

48B亞型弱的B變異型是很少的?？赡苁怯捎谠谠S多群體中B基因的頻率要相對低得多。弱B亞型較難以分類。Salmon做出結(jié)論：B亞型最好的分類應(yīng)參照A變異型：B3、Bx、Bm和Bel，另外加上那些不符合其它4種類型的Bw。

49B31972年Wiener和Cioffi首先報道一例ABH非分泌型B3。它被作為最稀少的一種B亞型這種表現(xiàn)型以與抗B和抗AB呈現(xiàn)混合視野反應(yīng)為特點血清中缺乏抗B唾液中含有正常含量的B抗原B3通常是由于ABO位點上的稀有等位基因所致。

50Bx一種異質(zhì)性的血型典型的Bx紅細(xì)胞與抗B和抗AB呈弱凝集。血清中含有弱的抗BBx分泌型唾液中含有一些B物質(zhì)，后者常常僅能通過Bx細(xì)胞與抗B的凝集抑制試驗才能檢測到Bx是ABO位點上的一種稀有的等位基因。

51BmBm細(xì)胞不能被抗B或抗AB凝集B抗原僅能通過敏感的技術(shù)比如吸收放散抗B才能檢測到。Bm分泌型唾液中B物質(zhì)的含量接近正常BBm個體的血清中不含有抗B。通常Bm是作為ABO位點上一個變異的基因來遺傳的，但是有幾個例外報道。

52BelBel紅細(xì)胞與抗B和AB不發(fā)生凝集反應(yīng)，但是它們的確可以結(jié)合抗B，抗體可以通過放散技術(shù)被檢測到。Bel分泌型唾液中不出現(xiàn)B物質(zhì)，血清中可能存在抗B抗體。Bel作為ABO位點上的稀有基因而遺傳，

53BwOlsson等確認(rèn)了7種新的等位基因，它們與正常B基因相比有1個核苷酸改變，導(dǎo)致一個氨基酸的取代（見表2.19Bw－2到－8），所有這些等位基因與B的弱表達(dá)相關(guān)，但是沒有做進(jìn)一步分類。

54正反不符的解決正定型中意外陽性或陰性洗滌細(xì)胞加入自身對照增加血清/細(xì)胞比例降低孵育溫度,延長孵育時間4℃/22℃/37℃15min-30min鏡檢用不同來源的抗體試驗用人源性試劑作吸收放散(并作相應(yīng)對照)

55吸收放散試驗檢測紅細(xì)胞上的弱A/B抗原NS.三洗受檢1ml紅細(xì)胞加入等量人源性抗A或抗B充分混勻4℃1小時，離心去上清4℃冷鹽水充分洗滌細(xì)胞5－8次（留末次洗滌液）56℃熱放散檢測放散液及最后一次洗滌液注意：要有陰陽性對照

56正反不符的解決反定型中意外陽性或陰性A1細(xì)胞陽性,A2細(xì)胞和篩選細(xì)胞陰性,自身陰性:可能是含有抗A1的A或AB型部分篩選細(xì)胞陽性,自身陰性:血清中可能含有意外抗體,用一組譜細(xì)胞,確定抗體特異性

57正反不符的解決室溫鹽水反應(yīng)抗體:MN、P、Lewis抗人球試驗陽性抗體：SsRhKellDuffyKidd排除冷抗體及緡錢狀凝集：HI抗體排除多凝集：同型成人新鮮血清、臍帶血清植物血凝素（Tn、T抗原活化）酶處理的成人O細(xì)胞

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