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1、利用過(guò)氧化氫酶進(jìn)行探究活動(dòng)利用過(guò)氧化氫酶進(jìn)行探究活動(dòng)課程/課題連繫:所需的已有知識(shí)和技能:ó細(xì)胞能量學(xué)ó酶的性質(zhì)、作用和角色ó氧的測(cè)試概念:酶是生物催化劑,它可以加速生物體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行。一些因素如溫度和pH值會(huì)影響酶的作用。引言過(guò)氧化氫酶是一種常見(jiàn)於動(dòng)物及植物組織內(nèi)的酶。它能催化過(guò)氧化氫分解為水和氧。由於過(guò)氧化氫在一些動(dòng)物和植物體內(nèi)是有毒的代謝物,所以過(guò)氧化氫酶幫助保護(hù)細(xì)胞,免受過(guò)氧化氫的毒性所影響。過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫水+氧過(guò)氧化氫酶常用作探究酶的作用。在實(shí)驗(yàn)中,通常會(huì)利用觀察氣泡的形成來(lái)估量過(guò)氧化氫酶
2、的反應(yīng)速率。然而,所得的結(jié)果往往欠缺客觀性。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)裡,我們將使用一個(gè)簡(jiǎn)單及客觀的方法去估量過(guò)氧化氫酶的反應(yīng)速率。這方法主要是量度滲有酶提取物的小紙塊,從過(guò)氧化氫溶液的底部浮上液面所需的時(shí)間。小紙塊浮上液面是由於過(guò)氧化氫酶釋放氧的反應(yīng)。材料ó鮮組織樣本(例如:蘋(píng)果、馬鈴薯)ó緩衝液(pH7)ó過(guò)氧化氫溶液(1%)ó燒杯(50毫升)ó濾紙ó鑷子圖一活動(dòng)所需的材料ó打孔器ó刀ó小膠瓶ó計(jì)時(shí)器ó研鉢及研杵(非必需的材料)ó離心機(jī)及離心管(非必需的材料)活動(dòng):比較不同活組織樣本中過(guò)氧化氫酶的反應(yīng)速率1.注入少許緩
3、衝液在研鉢內(nèi),將鮮組織樣本研磨。*2.把研磨後的混合物注入離心管內(nèi),然後置於離心機(jī)中轉(zhuǎn)動(dòng),直至在離心管的底部形成一顆粒狀物。*3.提取上層液體,注入另一支清潔的離心管內(nèi)。**(視乎所使用的組織樣本,可省去步驟1至3。)4.用打孔器在一張乾淨(jìng)的濾紙上打出數(shù)個(gè)小紙塊,用鑷子把一小紙塊浸入提取液內(nèi)。若沒(méi)有進(jìn)行步驟1至3,可直接用鑷子將小紙塊放在剛切開(kāi)的蔬果切面上,以吸取蔬果的汁液。然後把浸透汁液的小紙塊置在濾紙上輕輕吸乾。5.將小紙塊放入盛有1%過(guò)氧化氫溶液的小膠瓶?jī)?nèi),瓶?jī)?nèi)的過(guò)氧化氫溶液最少深1厘米。確保小紙塊靜
4、置於瓶底,然後開(kāi)始計(jì)時(shí)。6.記錄小紙塊浮上液面所需的時(shí)間,然後用鑷子把小紙塊移走。7.使用另一種組織樣本,重複步驟1至6。2討論問(wèn)題:1.把鮮組織樣本加入過(guò)氧化氫溶液時(shí),會(huì)釋放甚麼氣體出來(lái)?你會(huì)如何測(cè)試它?2.試從生物化學(xué)的角度,描述過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化氫在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中的變化。進(jìn)一步的探究活動(dòng)1.探討pH值對(duì)過(guò)氧化氫酶反應(yīng)速率的影響pH值會(huì)影響酶的反應(yīng)速率。試設(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)以探究馬鈴薯內(nèi)過(guò)氧化氫酶的活性如何受pH值所影響。進(jìn)行探究前,請(qǐng)與同學(xué)討論你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。撰寫(xiě)報(bào)告以解釋你的結(jié)論。2.探討溫度對(duì)過(guò)氧化氫酶
5、反應(yīng)速率的影響溫度亦會(huì)影響酶的反應(yīng)速率。試設(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)以探究蘋(píng)果內(nèi)過(guò)氧化氫酶的活性如何受溫度所影響。進(jìn)行探究前,請(qǐng)與同學(xué)討論你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。撰寫(xiě)報(bào)告以解釋你的結(jié)論。參考文獻(xiàn)ScienceandPlantsforSchools(2003).Microscaleinvestigationswithcatalase.Osmosis,24,Spring2003.RetrievedApril16,2010,fromhttp://www-saps.plantsci.cam.ac.uk/worksheets/sshe
6、ets/ssheet24.htm3