番荔枝開花調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子基因asleafy的克隆與表達(dá)分析

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1、園藝學(xué)報(bào)，2015，42(8)：1467–1476.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0162；http：//www.ahs.ac.cn1467番荔枝開花調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子基因AsLEAFY的克隆與表達(dá)分析1,*121111劉鍇棟，黃素娜，姜艷，黎海利，袁長(zhǎng)春，劉金祥，陳燕12（嶺南師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣東湛江524048；浙江省中藥研究所有限公司，杭州310023）摘要：利用同源克隆和RACE-PCR獲得番荔枝LEAFY基因的全長(zhǎng)cDNA序列，命名為AsLEAFY，GenBank登錄號(hào)為KP8661

2、45。序列分析表明，克隆獲得的番荔枝AsLEAFY基因長(zhǎng)為1236bp，編碼411個(gè)氨基酸，該氨基酸序列含有5′-N端脯氨酸富集區(qū)和中央酸性區(qū)，具有LEAFY（FLO）家族的典型結(jié)構(gòu)特征。同源分析表明，該氨基酸序列與多種木本植物L(fēng)EAFY類蛋白的同源性較高。進(jìn)化樹分析表明AsLEAFY與木本植物的親緣關(guān)系高于草本植物。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表明，AsLEAFY在番荔枝花發(fā)育的整個(gè)過(guò)程中都有表達(dá)，在初期的花芽中表達(dá)量最高，在不同組織器官中表達(dá)量存在差異，在枝條去葉后的腋芽中的表達(dá)量最高。推測(cè)該基因在番荔枝花器官形成初期發(fā)揮重要作用。關(guān)鍵詞：番荔枝；LEAFY；花發(fā)育；表達(dá)模式中圖分類號(hào)：S

3、667.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：0513-353X（2015）08-1467-10CloningandExpressionAnalysisofFloweringRelatedTranscriptionFactorAsLEAFYfromSugarApple1,*12111LIUKai-dong，HUANGSu-na，JIANGYan，LIHai-li，YUANChang-chun，LIUJin-xiang，and1CHENYan12（LifeScienceandTechnologySchool，LingnanNormalUniversity，Zhanjiang，Guangdong52

4、4048，China；ZhejiangResearchInstituteofTraditionalChinesemedicineCo.，LTD，Hangzhou310023，China）Abstract：Afull-lengthcDNAsequenceofthehomologousLEAFYgenefromsugarapple（AnnonasquamosaL.），whichwasnamedasAsLEAFY（GenBankaccessionKP866145），wasclonedbyemployinghomologygenecloningandRACEapproaches.Sequen

5、ceanalysisshowedthattheAsLEAFYgenecontainsa1236bpopenreadingframe（ORF）encoding411aminoacids.AsthetypicalstructurefeaturesofLEAFY（FLO）family，a5′-Npraline-richregionandacentralacidicregionwereidentifiedintheaminoacidsequenceofAsLEAFYprotein.ThededucedAsLEAFYproteinishighlyhomologoustotheLEAFYprot

6、einsfromothervariouswoodyplants.PhylogenetictreeanalysisindicatedthatAsLEAFYshowscloserrelationshipwiththeLEAFYsinwoodyplantsthaninherbs.Thereal-timePCRresultssuggestedthattheAsLEAFYgenecouldbedetectedduringthewholeperiodofflowerdevelopment.Interestingly，收稿日期：2015–04–17；修回日期：2015–07–06基金項(xiàng)目：國(guó)家自然

7、科學(xué)基金項(xiàng)目（31201586）；廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013B020304008）；廣東省教育廳科技創(chuàng)新項(xiàng)目（2013KJCX0124）；湛江市熱帶特色資源植物技術(shù)開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目（2014A06008）；湛江市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目（2012C3102019）；湛江師范學(xué)院科研創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目（2013CXTD05）*E-mail：liukaidong2001@126.com；Tel：0759-3183086LiuKai-dong，HuangSu-na，J