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1、VEGF在胰腺缺血再灌注損傷中的作用：湯禮貴，宋勝江，安慧敏，蔡小芳，朱華【摘要】目的：探討血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在缺血再灌注損傷(IRI)胰腺組織中的表達(dá)及其意義。方法：將雄性SD大鼠32只隨機(jī)分為4組(n=8)。A組為對(duì)照組;B組、C組和D組分別通過鉗閉大鼠腹腔干和腸系膜上動(dòng)脈15、30和60min造成胰腺缺血，然后再灌注6h建立缺血再灌注損傷模型。對(duì)各組胰腺組織進(jìn)行濕干質(zhì)量比(ethods:ThirtytaleSDratslydividedintofourgroups(n=8).Gro
2、upAservedascontrolgroup，GroupsB，CandDins，30minsand60minsofischemiarespectivelybyclampingofceliacarteryandsuperiormesentericartery，thenreleasedfor6hourstoproduceischemiareperfusioninjurymodel.Ratsovedforhistologicalinjuryevaluationanddetectionofmunohis
3、tochemicalstainingofVEGF.Results:TheexpressionofVEGFinpancreasincreasedafterischemiareperfusioninjury.Thereongtheisletcells，stromalvascularepithelialcells，acinarandductepithelialcellsofpancreas(P<0.01).Pathologicalscoreandmunohistochemicalstainingo
4、fVEGFintheisletcells(P<0.01)andshoalvascularepithelialcells(P<0.01).Conclusion:TheedemaofthepancreascausedbyischemiareperfusioninjurymayberelatedtotheincreasedexpressionofVEGF. Keyia/reperfusioninjury;pancreas 缺血再灌注損傷(ischemiareperfusioninjury
5、，IRI)是引起胰腺移植后早期功能喪失的主要原因之一。研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrog/kg腹腔注射麻醉。其中B組、C組和D組分別用血管夾阻斷大鼠腹腔干及腸系膜上動(dòng)脈15、30和60min，然后再灌注6h，脊椎脫臼法處死大鼠，取胰腺組織標(biāo)本;A組為對(duì)照組，僅解剖顯露大鼠腹腔干及腸系膜上動(dòng)脈，6h后取胰腺組織標(biāo)本?！ ?.3觀察指標(biāo)和檢測方法①胰腺組織標(biāo)本分成兩份，其中一份用電子分析天平稱濕重，置90℃電熱干燥箱內(nèi)烘烤72h后再稱干重，并計(jì)算胰腺濕/干質(zhì)量比(
6、W/D)。另一份用10%中性福爾馬林磷酸緩沖液4℃固定24h，石蠟包埋切片。②胰腺切片常規(guī)行蘇木素-伊紅染色。采用雙盲法由病理科醫(yī)師在光鏡下觀察胰腺病理變化，根據(jù)胰腺病理評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[2]對(duì)胰腺組織損傷程度進(jìn)行評(píng)分。③采用免疫組織化學(xué)方法檢測胰腺組織VEGF蛋白表達(dá)情況。每張切片隨機(jī)檢查10個(gè)高倍視野，按陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)分值和染色強(qiáng)度分值的乘積記分[3]。其中，陽性細(xì)胞數(shù)計(jì)分為：0(≤5%);1(5%～25%);2(25%～50%);3(50%～75%);4(≥75%)。染色強(qiáng)度計(jì)分為：1(弱陽性);2(
7、中度陽性);3(強(qiáng)陽性)?！ ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法胰腺組織的病理評(píng)分、VEGF染色評(píng)分及濕干質(zhì)量比(W/D)比較用方差分析，組間均數(shù)的兩兩比較方差齊用LSD檢驗(yàn)，方差不齊用Dunt’sT3檢驗(yàn)。VEGF染色評(píng)分與病理評(píng)分、濕干質(zhì)量比(W/D)的相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson法?！ ?結(jié)果 2.1光鏡下病理變化A組：胰腺細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，未見炎性細(xì)胞浸潤。B組：見胰腺細(xì)胞輕度腫脹，間質(zhì)輕度水腫，無明顯細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞及炎性細(xì)胞浸潤。C組：見胰腺細(xì)胞腫脹明顯，空泡變性，胰腺間質(zhì)、被膜下明顯水腫，血管充血、
8、紅細(xì)胞溢出，可見炎性細(xì)胞浸潤，未見壞死細(xì)胞。D組:見胰腺組織局灶性壞死，間質(zhì)出血明顯，大量炎性細(xì)胞浸潤，見圖1。胰腺組織病理評(píng)分各組間兩兩比較差異均有顯著性(均P<0.01)，見表1?！ ?.2胰腺組織W/D比值IRI胰腺組織的W/D比值隨著缺血時(shí)間延長而增大，除B組與A組相比較差異無顯著性(P>0.05)外，各組間相互兩兩比較差異均有顯著性(均P<0.01)，見表1。 2.3VEGF免疫組化VEGF表達(dá)陽性細(xì)胞胞漿被染成黃色或棕黃色，呈點(diǎn)狀或團(tuán)塊狀分布。對(duì)照組
