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《多重耐藥肺炎克雷伯菌氨基糖苷類藥物耐藥相關基因研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在應用文檔-天天文庫。
1、多重耐藥肺炎克雷伯菌氨基糖苷類藥物耐藥相關基因研究：戴學海，王華鈞，金法祥，陳秋美【摘要】目的：了解多重耐藥肺炎克雷伯菌氨基糖苷類修飾酶基因的存在狀況。方法：自2006年1月至2006年10月住院病人標本中分離并篩選出20株多重耐藥肺炎克雷伯菌，微量肉湯稀釋法檢測20種抗菌藥物的敏感性;PCR法檢測15種氨基糖苷類修飾酶基因。結果：20株多重耐藥肺炎克雷伯菌對氨基糖苷類藥物慶大霉素、妥布霉素、奈替米星及阿米卡星耐藥率分別為75%、80%、65%和60%，其中氨基糖苷類修飾酶aac(3)-Ⅱ基因陽性15株，aac(6’)-Ⅰb基因陽性1株，ant
2、(3”)-Ⅰ基因陽性16株，aph(3’)-Ⅰ基因陽性3株，ant(2”)-Ⅰ基因陽性1株。結論：多重耐藥肺炎克雷伯菌對氨基糖苷類藥物耐藥的主要原因是aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ib、ant(3”)-Ⅰ、aph(3’)-Ⅰ和ant(2”)-Ⅰ等5種氨基糖苷類修飾酶基因的存在;從肺炎克雷伯菌中檢出aac(6’)-Ib-Cr型和aph(3’)-Ⅰ均為國內首次?！娟P鍵詞】肺炎克雷伯菌;氨基糖苷類修飾酶;多重耐藥性 Abstract:Objective:Tounderstandtheexistenceofgenesencodingaminogl
3、ycosidemodifyingenzymeinmulti-resistantKlebsiellapneumoniae.Methods:Samplesof20strainsofmulti-resistantKlebsiellapneumoniaecollectedfromthepatientsfromJanuary2006toOctober2006eansofbrothinductioninoglycosidemodifyingenzymebyerasechainreactionulti-resistantKlebsiellapneumonia
4、etoaminoglycoside，suchasgentamicin，tobramycin，ilmicinandamikacininoglycosidemodifyingenzymeaac(3’)-Ⅱgenepositive，1strainofaac(6’)-Ib，16onesofant(3”)-Ⅰ，3onesofaph(3’)-Ⅰand1strainofant(2”)etime.Conculsion:Themainreasonsofmulti-resistantKlebsiellapneumoniaeresistancetoaminoglyc
5、osidearethepresenceofaminoglycosidemodifyingenzymescalledaac(3)-Ⅱ，aac(6”)-Ib，ant(3”)-Ⅰ，aph(3’)-Ⅰandant(2”)-Ⅰgenes.Genesofaac(6’)-Ib-Crandaph(3’)-ⅠinKlebsiellapneumoniaearebothfirstfoundandreportedinChina. Keyoniae;aminoglycosidemodifyingenzyme;multidrugresistance 肺炎克雷伯菌(K.
6、pneumoniae，KPN)已是醫(yī)院感染的重要病原菌。近年盡管國內已有KPN菌的氨基糖苷類藥物部分耐藥相關基因研究報道[1-2]，但報道所涉及耐藥相關基因較少。我們曾報道了一組老年患者KPN菌分離株β-內酰胺酶基因分型研究[3]，為進一步了解我院多重耐藥KPN菌氨基糖苷類藥物各種耐藥相關基因存在狀況，我們對20株分離自老年病房產β-內酰胺酶的KPN菌進行了15種氨基糖苷類修飾酶基因檢測，現報告如下。 1材料和方法 1.1菌株及鑒定20株均為分離自2006年1月-2006年10月間我院老年病房患者(年齡61～90歲)臨床標本，分別為：痰液1
7、3份，尿液6份，膽汁1份。全部菌株均使用ATB細菌鑒定儀鑒定菌種?！ ?.2抗菌藥物敏感性試驗藥敏試驗按美國CLSI2006年版要求。質控菌株：大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、銅綠假單胞菌ATCC27853購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心，抗菌藥物敏感試驗采用微量肉湯稀釋法?！ ?.3細菌處理挑純培養(yǎng)菌落置入0.5mL離心管內(內預置200ng/mL蛋白酶K溶液200μL)，56℃水浴2h，改95℃水浴10min，離心(15000r/min)30s。上清液即為基因檢測的模板液，-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩！ ?.4基因PCR檢測
8、15種氨基糖苷類修飾酶基因檢測均為PCR法，靶基因引物序列和目的產物長度見表1。各種靶基因PCR擴增體系均為:每反應體系P1引物1μL(1.0μmmo
