口腔大黃滴劑的實驗研究

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1、口腔大黃滴劑的實驗研究　　摘　要：目的：研制一種新型有效的牙周抗菌制劑，以代替常規(guī)用藥。方法：用瓊脂稀釋法做幾種口腔常見菌對大黃總蒽醌和大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的敏感性試驗。甲殼胺對口腔常見菌的凝集試驗。用齲活性試驗做甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附試驗。用鋼管法做大黃滴劑對口腔常見菌的抑菌試驗。結(jié)果：大黃總蒽醌和大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品對口腔常見菌都有不同程度的抑菌作用。甲殼胺除對齒雙歧外，對其他口腔常見菌均有凝集作用。甲殼胺對變形鏈球菌有解吸附作用。成品大黃滴劑對口腔常見菌有抑菌作用。結(jié)論：大黃滴劑有明顯抑菌作用?！　⊙乐懿∈怯裳谰咭鸬难例X周圍組織的慢性破

2、壞性疾病，選擇有效的抗菌藥物控制引起牙周病的菌斑，收到明顯療效。但目前治療牙周病的抗菌藥物多局限于抗生素類的化學(xué)制劑，而對中藥的研究甚少。我們利用中藥大黃的明顯抗厭氧菌作用和甲殼胺配伍制成中藥大黃滴劑，旨在提出一種新的牙周抗菌制劑?，F(xiàn)就其主要實驗室研究報告如下?！　?　材料與方法　　1.1　標(biāo)準(zhǔn)菌株和培養(yǎng)條件　　1.1.1　標(biāo)準(zhǔn)菌株　選用北京口腔醫(yī)學(xué)研究所微生物室保存的國際標(biāo)準(zhǔn)菌株。牙齦卟啉菌P381和ATCC33277，粘性放線菌ATCC19246，中間型普氏菌ATCC25261，具核梭形菌ATCC10953，伴放線放線桿菌Y4，變

3、形鏈球菌c型和d型，中間型鏈球菌ATCC27335，齒雙歧ATCC27534?！　?.1.2　培養(yǎng)條件　變形鏈球菌和中間型鏈球菌在MSA培養(yǎng)基中微需氧培養(yǎng)2天，余菌株在CDC培養(yǎng)基中厭氧培養(yǎng)5天。　　1.2　主要試劑　　1.2.1　大黃總蒽醌　北京制藥研究所提供?！　?.2.2　大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品　中國藥品生物制品檢定所，0757-9703?！　?.2.3　甲殼胺　取比度0.78粘度45cps灰分0.8%?！　?.2.4　大黃滴劑　北京口腔醫(yī)院藥房配制?！　?.3　實驗方法　　1.3.1　大黃對牙周致病菌的抑菌試驗　取大黃總蒽醌和大黃酸標(biāo)準(zhǔn)

4、品，用瓊脂稀釋法［1］做細(xì)菌敏感性試驗?！　?.3.2　甲殼胺的凝集試驗　將各菌接種在相應(yīng)的液體培養(yǎng)基中，內(nèi)含一定濃度的甲殼胺，培養(yǎng)后觀察各菌生長情況。　　1.3.3　甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附試驗　用齲活性試驗方法，將標(biāo)準(zhǔn)板浸入含變形鏈球菌的液體培養(yǎng)基中，經(jīng)48小時培養(yǎng)后，將有變形鏈球菌附著的板再浸到含甲殼胺的溶液中，連續(xù)觀察附著的變形鏈球菌從板上的脫落情況。　　1.3.4　大黃滴劑的體外抑菌實驗　取成品大黃滴劑，按倍比稀釋的原則，稀釋為原液的100%、50%、25%、12.5%和6.25%。用鋼管法分別加入到各菌的菌平皿中，培養(yǎng)后

5、觀察抑菌結(jié)果?！　?　結(jié)　果　　2.1　大黃抑菌試驗測定結(jié)果　大黃總蒽醌和大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的抑菌效果大致相同，除對變形鏈球菌、中間型鏈球菌和伴放線放線桿菌無作用外，對口腔其他常見菌均有作用。對牙齦卟啉菌ATCC33277和中間型普氏菌ATCC25261作用最強，大黃總蒽醌濃度在1.4μg/ml，大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度在4.17μg/ml時都有抑菌作用?！　?.2　甲殼胺凝集結(jié)果　甲殼胺除對齒雙歧ATCC27534無凝集作用外，對口腔其他常見菌都有不同程度的凝集作用?！　?.3　甲殼胺解吸附試驗結(jié)果　甲殼胺對附著的變形鏈球菌有一定解吸附作用，這一

6、作用的最有效濃度是5mg/ml。應(yīng)用甲殼胺后10min開始起作用，60min后使附著的變形鏈球菌完全脫盡。　　2.4　大黃滴劑的體外抑菌實驗結(jié)果　大黃滴劑對口腔常見菌有明顯抑菌作用，即使稀釋至原液的1/16仍有作用?！　?　討　論　　在我國應(yīng)用大黃治療疾病已有悠久的歷史。大黃有廣譜抗菌作用，大黃中起抗菌作用的有效成分為蒽醌衍生物，而蒽醌衍生物中有抑菌作用的成分為大黃酸、大黃素和蘆薈大黃素。王文風(fēng)等［2］報告，大黃蒽醌衍生物對臨床常見的100株厭氧菌有較強的抑制作用。我們利用大黃的明顯抗厭氧菌作用，尤其是對脆弱類桿菌、產(chǎn)黑色素類桿菌敏感

7、的特性，制成中藥抗菌藥物，治療牙周疾病。　　用瓊脂稀釋法做幾種口腔常見菌對大黃總蒽醌和大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的敏感性，發(fā)現(xiàn)二者的抑菌效果基本相同，對牙周致病菌都有不同程度的抑制作用，尤其是對牙齦卟啉菌ATCC33277和中間型普氏菌ATCC25261，即使?jié)舛仍?.4μg/ml都有抑菌作用。但大黃對變形鏈球菌、中間型鏈球菌和伴放線放線桿菌無抑菌作用，說明對由伴放線放線桿菌引起的青少年牙周炎可能無作用，而對厭氧菌引起的牙周炎作用較好?！　〖讱ぐ纷鰹橐环N生物多糖高分子物質(zhì)，因其可溶性、成膜性、可吸收性和生物相容性，在藥劑中作為填充劑、黏合劑、薄膜包

8、衣材料、緩釋控釋材料等在醫(yī)學(xué)上研究很多［3］。近年來，在口腔方面的應(yīng)用也漸漸受到重視。甲殼胺除對齒雙歧無凝集作用外，對其他口腔常見菌均有凝集作用。這樣，甲殼胺就可把牙周袋內(nèi)的細(xì)菌凝集沉淀在牙周袋的局部，然后局部針對性用藥