紫杉醇誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖凋亡的實(shí)驗(yàn)研究

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1、紫杉醇誘導(dǎo)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖凋亡的實(shí)驗(yàn)研究作者:甘泉,辛?xí)匝?,劉玉,王德堂,郭?huì)玲【關(guān)鍵詞】紫杉醇;子宮內(nèi)膜腫瘤;,子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞珠;,增殖;,凋亡;,caspase  Experimentalstudyonhumanendometrialadenocarcinomacellapoptosisinducedbytaxol  【Abstract】AIM:Toinvestigatetheinhibitionofproliferationandinductionofapoptosisinvitroculturedhumanendometrialadenocarcinom

2、acell(HEC1B)bytaxol.METHODS:HumanendometrialadenocarcinomaHEC1Bcellsol/Ltaxolfor48h.Cellapoptosisicroscopyandintracellularcalciumfluorescencepixelvaluesoflivecellsicroscope.RESULTS:Throughtheblockageofcaspasepathetrialcarcinomacells.CONCLUSION:Taxolinhibitstheproliferationandinducesthe

3、apoptosisofhumanendometrialadenocarcinomaHEC1Bcells.  【Keyetrialneoplasms;HEC1B;proliferation;apoptosis;caspase3  【摘要】目的:探討紫杉醇對(duì)體外培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞(HEC1B)凋亡的誘導(dǎo)作用.方法:體外培養(yǎng)的HEC1B細(xì)胞,用終濃度2,4,8,16,20nmol/L的紫杉醇作用48h后,熒光染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生情況、caspase3及其抑制劑紫杉醇在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中的作用.結(jié)果:共聚焦檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)鈣離子的動(dòng)態(tài)變化與Caspase3半胱氨酸蛋白酶中細(xì)胞

4、凋亡,使HEC1B細(xì)胞在活化過程中起了關(guān)鍵性的因素.結(jié)論:HEC1B對(duì)紫杉醇具有藥物敏感性,紫杉醇對(duì)HEC1B細(xì)胞的殺傷作用,是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡途徑實(shí)現(xiàn)的.  【關(guān)鍵詞】紫杉醇;子宮內(nèi)膜腫瘤;子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞珠;增殖;凋亡;caspase3  0引言  子宮內(nèi)膜癌(endometrialcancer,EC)是女性生殖器官三大惡性腫瘤之一,占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的20%~30%[1].在治療方面一直沿用傳統(tǒng)的手術(shù)、手術(shù)加放療或激素治療.因此,療效及治愈率無提高.化療在惡性腫瘤的治療中具有重要作用,在晚期腫瘤的治療中尤為重要.近年來,EC的發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)[2],為了

5、進(jìn)一步提高子宮內(nèi)膜的療效,探索紫杉醇對(duì)子宮內(nèi)膜癌在臨床上的應(yīng)用提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù).  紫杉醇(taxol,paclitaxe1)是一種新的抗微管藥物.紫杉醇作為抗癌藥,對(duì)前列腺癌、乳腺癌等治療已有廣泛的應(yīng)用.新輔助化療對(duì)子宮內(nèi)膜癌的療效不斷肯定[1],腫瘤的發(fā)生及發(fā)展是細(xì)胞無限制過度增殖的過程,化療對(duì)腫瘤的作用應(yīng)包括殺傷腫瘤和抑制腫瘤細(xì)胞分裂,增殖及促進(jìn)調(diào)亡兩方面.本文探討了新輔助化療對(duì)HEC1B細(xì)胞調(diào)亡及增殖的影響,現(xiàn)報(bào)道如下.  1材料和方法  1.1材料  1.1.1細(xì)胞株從美國(guó)AmericanTypeCultureCollection(ATCC)引進(jìn)的HEC

6、1B細(xì)胞株購(gòu)自中科院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞所.培養(yǎng)基:EMEM培養(yǎng)基(美國(guó)Gibco公司);血清:胎牛血清(杭州四季清).細(xì)胞培養(yǎng):按照ATCC提供的培養(yǎng)傳代方法[6]培養(yǎng)于含100mL/L胎牛血清、1.0mmol/L丙酮酸鈉,1.0mmol/L非必需氨基酸和1.5g/L碳酸氫鈉的EMEM培養(yǎng)液中,在37℃,50mL/LCO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng).  1.1.2藥物與試劑抗體①Taxol:北京四環(huán)醫(yī)藥科技股份有限公司產(chǎn)品;②caspase3多克隆抗體(SantaCruzBiotec,CAUSA).  1.1.3細(xì)胞培養(yǎng)用品EMEM培養(yǎng)基:美國(guó)Gibco公司產(chǎn)品.用時(shí)按說明用

7、三蒸水配制,并加入100mL/L非必需氨基酸和1.5g/L碳酸氫鈉的EMEM培養(yǎng)液用0.22μm濾器除菌,4℃冰箱保存.胎牛血清:杭州四季青生物工程材料研究所生產(chǎn).胰蛋白酶:美國(guó)Gibco公司產(chǎn)品.用無血清培養(yǎng)液配成2.5g/L濃度,0.22μm濾器除菌,4℃冰箱保存.40cm培養(yǎng)皿:中間有9mm小孔.Costar公司產(chǎn)品.(以上試劑均購(gòu)于博微生物科技有限公司).  1.2方法 1.2.1子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC1BGIBCOEMEM培養(yǎng)液中(含100mL/L胎牛血清、100μm/mL青霉素,100μm/mL鏈霉素,丙酮酸鈉1.0mmol/L,非必需1.0mmol

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