急性腦梗死患者外周血單個(gè)核細(xì)胞toll樣受體4的表達(dá)與臨床的相關(guān)性

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1、急性腦梗死患者外周血單個(gè)核細(xì)胞Toll樣受體4的表達(dá)與臨床的相關(guān)性【摘要】目的:探討急性腦梗死患者外周血單核細(xì)胞Toll樣受體4(TLR4)的表達(dá)及其與患者的臨床亞型及病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性。方法:采用流式細(xì)胞儀分析技術(shù)和實(shí)時(shí)定量RTPCR技術(shù)分別測(cè)定66例急性腦梗死患者外周血單核細(xì)胞Toll樣受體4的表達(dá)水平,于入院3d內(nèi)病情穩(wěn)定后對(duì)患者進(jìn)行臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分,并按照OxfordmunityStrokeProject完成腦梗死患者的臨床分型。結(jié)果:與健康對(duì)照組相比,急性腦梗死患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中TLR4蛋白

2、表達(dá)的陽(yáng)性率(66.87±16.27)%及表達(dá)量(即熒光強(qiáng)度,11.62±4.39)均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。66例腦梗死按照OxfordmunityStrokeProject臨床分型,分為T(mén)ACI9例、PACI39例、POCI7例和LACI11例,PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表達(dá)量在各組間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;按神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)將66例患者分為輕型27例、中型30例和重型9例,各組PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PBMC中TLR4蛋白和mR

3、NA的表達(dá)量與病情的嚴(yán)重程度均呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論:外周血單核細(xì)胞Toll樣受體4的表達(dá)增高與急腦梗死的發(fā)生和嚴(yán)重程度有密切關(guān)系,是腦梗死發(fā)病的一個(gè)危險(xiǎn)因素。【關(guān)鍵詞】Toll樣受體4;急性腦梗死;腦梗死臨床分型;神經(jīng)功能缺損程度  [Abstract]AIM:ToinvestigatetheexpressionofTolllikereceptor4(TLR4)inperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)ofpatientsRNAandproteinofTLR4inPBMCof

4、66patientsinedbyrealtimequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)andfloetry(FCM),respectively.ClinicalneurologicaldeficitscoreandOCSP(OxfordmunityStrokeProject)clinicalsubtypeedinthepatientsission.RESULTS:TheexpressionofTLR4inPBMCofpatientsalco

5、ntrols(P<0.01,respectively).66patientsRNAinthesegroupshavenostatisticsignificance.Meanildcases,30mediancases,and9severecasesaccordingtotheneurologicaldeficitscore.ThedifferencesintheexpressionlevelsofTLR4proteinandmRNAinthesegroupshavestatisticsignificance(P<0.

6、05).TheexpressionofTLR4proteinandmRNAaybeassociatedaybeariskfactorofacutecerebralinfarction.  [Keyononuclearcells,PBMC)中的表達(dá)及其與患者臨床亞型及病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性進(jìn)行研究,探索急性腦梗死患者體內(nèi)炎癥的調(diào)節(jié)機(jī)制?! ?對(duì)象和方法  1.1對(duì)象2006-10/2009-02收集我院神經(jīng)內(nèi)科的急性腦梗死患者66例,其中男38例,女28例,年齡63.16±9.45歲。臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)1995年全國(guó)第4屆腦血管病學(xué)術(shù)

7、會(huì)議制定的標(biāo)準(zhǔn)。排除既往有腦卒中、短暫性腦缺血發(fā)作、心肌梗死、糖尿病、甲狀腺疾病、肝腎功能不全、自身免疫性疾病、使用激素或免疫抑制劑者、胃部疾病及巨幼細(xì)胞貧血病史者。入院3d內(nèi)病情穩(wěn)定后完成腦血栓形成患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分[6]和按OCSP(OxfordmunityStrokeProject)[7]完成腦梗死臨床分型。對(duì)照組為同期體檢證實(shí)的健康者,共60例,其中男36例,女24例,年齡(61.08±11.26)歲?! ?.2方法  1.2.1標(biāo)本采集及處理取禁食12h以上、清晨空腹肘靜脈血5mL,以EDTA二鉀鹽抗凝。0.

8、4mL用于流式細(xì)胞儀檢測(cè),其余樣品250g/min離心5min,吸出血漿,加入與血漿等體積的生理鹽水,旋渦器上混勻,以Ficoll分層液(為中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院血液學(xué)研究所產(chǎn)品)分離收獲單個(gè)核細(xì)胞,加入RNAlater200μL,打散細(xì)胞沉淀,4℃保存2~3h,轉(zhuǎn)

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