牛大力對小鼠免疫功能的影響

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1、牛大力對小鼠免疫功能的影響韋翠萍，劉丹丹，唐立海，劉亮鋒，賴平，王艷，葉木榮【摘要】【目的】觀察牛大力水提液對小鼠免疫功能的影響?！痉椒ā窟x用SPF級KM小鼠，通過計算小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、廓清指數(shù)和采用血清溶血素試驗法、二硝基氯苯誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗法，觀察高、中、低劑量牛大力(劑量分別為20、10、5g·kg-1·d-1)對正常小鼠免疫調(diào)節(jié)的影響。通過測定免疫抑制小鼠(灌胃給予40mg·kg-1·d-1醋酸潑尼松)脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)以及廓清指數(shù)，觀察高、中、低劑量牛大力(劑量同前)對免疫低下小鼠免疫調(diào)節(jié)的影響?！窘Y(jié)果】牛大力對正常小

2、鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)以及廓清指數(shù)均無顯著性影響，但能不同程度地增加免疫低下小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)及廓清指數(shù)(P005或P001)。牛大力能顯著提高小鼠血清溶血素含量(P005)，不同程度抑制小鼠遲發(fā)型皮膚過敏反應(yīng)，但差異無顯著性意義(與模型組比較，P>005)?！窘Y(jié)論】牛大力能不同程度地提高正常小鼠和免疫功能低下小鼠的免疫功能?！娟P(guān)鍵詞】牛大力/藥理學(xué);免疫功能低下/中藥療法;溶血素/血液;疾病模型，動物;小鼠牛大力(RadixMillettiaeSpeciosae)，載于《陸川本草》，為蝶形花科植物美麗崖豆藤Milletias

3、peciosaChamp的干燥根。功能清肺止咳，清涼解毒，用于治療咳血，痢疾，溫病身熱口渴，頭昏等。本實驗觀察了不同劑量牛大力水提液對小鼠免疫功能的影響，現(xiàn)報道如下?！　?材料與方法　　11動物SPF級KM小鼠,體質(zhì)量18～22g，雌雄各半;SPF級豚鼠，體質(zhì)量250～300g，均由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。合格證號：SCXK粵20030001?！　?2藥物與制備醋酸潑尼松片由廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批號：071104)。牛大力購于廣州致信中藥飲片有限公司(批號：070701),制備方法：取牛大力干燥藥材，用10倍體積的蒸餾水浸泡

4、1h，加熱煮沸2h，趁熱過濾，殘渣再加6倍體積的蒸餾水，加熱煮沸1h，合并2次濾液，濃縮至1g/mL濃度備用，用時加蒸餾水稀釋至所需濃度?！　?3試劑與儀器二硝基氯苯(DNCB)由上海試劑一廠生產(chǎn)(批號：20000101)，丙酮由天津市紅巖化學(xué)試劑廠生產(chǎn)(批號：2006730)。UNICO7200型光柵分光光度計由尤尼柯上海儀器有限公司提供，LDZ5型離心機(jī)由北京醫(yī)用離心機(jī)廠生產(chǎn)，AnkeTGL16G型高速離心機(jī)由上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)，小鼠60只，隨機(jī)分為5組：空白組，醋酸潑尼松組(劑量為40mg·kg-1·d-1)，牛大力高、中、低劑量

5、組(劑量分別為20、10、5g·kg-1·d-1)。每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥12d。末次給藥1h后，將小鼠脫頸椎處死，稱體質(zhì)量，取脾臟和胸腺，用電子天平稱質(zhì)量，計算脾臟和胸腺指數(shù)(脾/mbody，胸腺/mbody?！　?5牛大力對正常小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響[1-3]分組及給藥方法同14。于末次給藥1h后，各鼠尾靜脈注射50g/L中華墨汁生理鹽水液10mL/kg，于注射墨汁后2min及12min，用毛細(xì)玻璃管從小鼠眼眶后靜脈叢取血2～3滴，吸20μL溶于1g/LNa2CO33mL溶液中，搖勻，于分光光度計680nm處測吸光度(D)值

6、，計算廓清指數(shù)(IK)∶IK=(logD2-logD12)/(t12-t2)(D2、D12分別為2min、12min時的吸光度，t12、t2分別為時間12min、2min)?！　?6牛大力對免疫低下小鼠免疫器官質(zhì)量的影響[4]取KM小鼠60只，隨機(jī)分為5組：空白組，模型組，牛大力高、中、低劑量組，給藥劑量同14項下。除空白組外，其他各組小鼠上午灌胃給予40mg·kg-1·d-1醋酸潑尼松，空白組給予等容積的蒸餾水，下午牛大力組小鼠灌胃給予相應(yīng)藥物，空白組和模型組灌服等容積的蒸餾水，連續(xù)12d。末次給藥1h后，處死小鼠，按14項下方法計算脾

7、臟指數(shù)與胸腺指數(shù)?！　?7牛大力對免疫低下小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響[4-5]分組及給藥方法同16項下。按15項下方法檢測IK。　　18牛大力對雞紅細(xì)胞致小鼠血清溶血素抗體形成的影響[6]在雞血中加入5倍體積的滅菌Alsever溶液，離心洗滌，用生理鹽水配成體積分?jǐn)?shù)5%生理鹽水雞紅細(xì)胞混懸液。補體的制備：將2只豚鼠心臟采血，離心后分離血清，用10倍生理鹽水稀釋。取KM小鼠72只，隨機(jī)分為6組：空白組，模型組，醋酸潑尼松組(劑量為40mg·kg-1·d-1)，牛大力高、中、低劑量組(給藥劑量同14項下)。除空白組外，各組小鼠先腹腔注

8、射體積分?jǐn)?shù)5%生理鹽水雞紅細(xì)胞混懸液02mL進(jìn)行免疫，然后灌胃給藥1次，連續(xù)12d。末次給藥后1h，眼眶靜脈取血，3000r/min離心10min，