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1、貫葉金絲桃總黃酮提取工藝研究的論文【摘要】目的對(duì)貫葉金絲桃中總黃酮的提取工藝進(jìn)行優(yōu)選。方法采用正交試驗(yàn)法,以總黃酮為指標(biāo),對(duì)乙醇濃度、溶劑量、提取時(shí)間及提取次數(shù)4種因素進(jìn)行了研究。結(jié)果將貫葉金絲桃用8倍70%乙醇提取3次,每次2h,可以獲得較高的提取率。結(jié)論此工藝有效成分提取率較高,重復(fù)性好,穩(wěn)定可行。【關(guān)鍵詞】貫葉金絲桃；總黃酮；金絲桃苷；提取工藝abstract：objectivetooptimizetheextractionprocessoftotalflavonoidsinhypericump
2、erforatuml..methodstheconcentrationandvolumeofalcohol,extractiontimeandfrequencyaticallystudiedbythetotalflavonoidsasthemarker.resultsthemoreeffectiveesamountof70%alcoholunderrefluxfor3timesand2hforeachtime.conclusionthismethodobtainsmoreeffectiveponent
3、s.itisstableandreliable.keyperforatuml.；totalflavonoids；hyperoside；extractionprocess貫葉金絲桃為2005年版《中華人民共和國(guó)藥典》(一部)新增的藥材品種,是藤黃科金絲桃屬植物貫葉金絲桃hypericumperforatuml.的干燥地上部分,具有舒肝解郁、清熱利濕、消腫止痛等功效,用于情志不暢、氣滯郁悶、關(guān)節(jié)腫痛、小便不利等。.有研究表明,貫葉金絲桃總黃酮具有保肝、抗乙肝病毒和利膽作用,且其中的金絲桃苷效果最好。我們?cè)?/p>
4、以往研究的基礎(chǔ)上,對(duì)貫葉金絲桃總黃酮的提取工藝進(jìn)行了進(jìn)一步的研究,現(xiàn)報(bào)道如下。 1儀器與試藥貫葉金絲桃hypericumperforatuml.購(gòu)自亳州九方藥材公司,產(chǎn)地為四川古藺地區(qū),安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院中藥教研室潘魯敏副教授鑒定為藤黃科金絲桃屬植物貫葉金絲桃的上枝葉。金絲桃苷對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào)111521-200303)。乙醇購(gòu)自合肥酒精廠,其他試劑均為分析純,重蒸餾水自制?！ ?含量測(cè)定 2.1金絲桃苷含量測(cè)定采用高效液相色譜法測(cè)定金絲桃苷的含量，計(jì)算金絲桃苷提取率?！ ?
5、.1.1對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取干燥至恒重的金絲桃苷對(duì)照品5.2mg,置25ml量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,制成0.208mg/ml金絲桃苷對(duì)照品溶液。 2.1.2供試品溶液的制備 取貫葉金絲桃提取物約40mg,精密稱(chēng)定,加甲醇溶解后濾過(guò),定容至50ml量瓶中,制成供試品溶液?！ ?.1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密吸取金絲桃苷對(duì)照品溶液0.5、1、2、3、4ml,分別用甲醇定容至10ml,制得系列對(duì)照品溶液。分別進(jìn)樣20μl,記錄峰面積值y,以c為橫坐標(biāo),y為縱坐標(biāo),得回歸方程：y＝1752
6、33c＋9464.6,r＝0.9999,說(shuō)明金絲桃苷在10.4～83.2μg/ml范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。 2.1.4精密度試驗(yàn) 取同一份對(duì)照品溶液,濃度為20.8μg/ml,進(jìn)樣20μl,重復(fù)6次,測(cè)定峰面積,結(jié)果rsd＝1.47%,說(shuō)明精密度良好?！ ?.1.5重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批貫葉金絲桃藥材提取物6份,制備樣品溶液,分別進(jìn)樣20μl,測(cè)得峰面積rsd＝1.36%,表明該法重復(fù)性較好。 2.1.6穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液,分別在0、2、4、6、8h進(jìn)樣20μl,測(cè)定峰面積,rsd＝1
7、.24%,結(jié)果表明在8h內(nèi)樣品溶液穩(wěn)定性較好?！ ?.1.7加樣回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取已知金絲桃苷含量的貫葉金絲桃提取物40mg,精密加入金絲桃苷對(duì)照品(0.235mg/ml)5ml,依法制備供試品溶液。分別進(jìn)樣20μl測(cè)定峰面積,計(jì)算回收率,結(jié)果見(jiàn)表1。表1金絲桃苷加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（略） 2.1.8樣品含量測(cè)定 按供試品溶液制備方法制備樣品溶液,精密吸取20μl,注入高效液相色譜儀,測(cè)定金絲桃苷含量,見(jiàn)圖1,計(jì)算金絲桃苷的提取率?！ ?.2總黃酮含量測(cè)定 采用nano2-al(no3)3-na
8、oh比色法測(cè)定貫葉金絲桃總黃酮含量,計(jì)算總黃酮提取率?！ ?.2.1測(cè)定波長(zhǎng)的選擇 取金絲桃苷對(duì)照品、供試品溶液,比色后,進(jìn)行紫外光譜掃描,其在510nm附近有最大吸收峰,因此,選擇510nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)?！ ?.2.2測(cè)定方法 精密吸取甲醇、蘆丁對(duì)照品溶液和供試品溶液1.0ml,分別置于25ml量瓶中,各加蒸餾水5ml,搖勻；加5%nano2溶液1.0ml,搖勻,放置6min；加10%al(no3)3溶液1.0ml,搖勻,放置6min；加4%nao
