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1、黃芪中黃芪總皂苷大孔樹(shù)脂純化工藝探究【摘要】目的優(yōu)選出分離純化黃芪中黃芪總皂苷的最佳工藝條件。方法采用動(dòng)態(tài)吸附?解析法,用超高效液相色譜法測(cè)定黃芪甲苷的含量,優(yōu)選出最佳純化條件。結(jié)果D101樹(shù)脂對(duì)黃芪總皂苷的純化最優(yōu),以2BV/h吸附速率吸附,5BV70%乙醇以3BV/h的流速進(jìn)行洗脫效果最佳,黃芪甲苷的精制度為446.28%。結(jié)論D101大孔吸附樹(shù)脂可用于黃芪總皂苷的純化?！娟P(guān)鍵詞】黃芪;黃芪總皂苷;大孔樹(shù)脂PurificationoftotalsaponinsofAstragalusinRadixAstragaliSUIYu?lan,LIZhao
2、?yi.People’sHospitalofJining,ShandongJining272000,China【Abstract】ObjectiveTooptimizethetechnologicalparameterofpurificationoftheastragalosideⅣ.MethodsWiththeextractionrateoftheastragalosideⅣ,theoptimizedtechnologicalparameterwasselectedbyUPLC.ResultsD101wasfoundtoprovidethebest
3、fitofseparationandpurification,takethebestconditionof2BV/hcurrentvelocity,70%ethanolastheeluting8reagent,andtheelutingvelocitywas3BV/h.ThismethodmadetheastragalosideⅣhavearefineddegreeof446.28%.ConclusionD101resincouldbeusedtorefinetheastragalosideⅣinRadixAstragali.【Keywords】Ra
4、dixAstragali;TotalsaponinsofAstragalus;Macroporousresin黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根[1],其主要成分為黃芪總皂苷,具有廣泛的藥理作用,如強(qiáng)心、抗胃潰瘍、對(duì)外周神經(jīng)系統(tǒng)的再生具有雙重調(diào)節(jié)作用、降血壓等作用[2-5]。本文以黃芪甲苷為指標(biāo)對(duì)黃芪中黃芪總皂苷的純化進(jìn)行了研究,為以后黃芪的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)做基礎(chǔ)。
5、?1材料與儀器黃芪甲苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)110781?200613);黃芪藥材(浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片廠),經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)資源鑒定教研室陳孔榮副教授鑒定為膜莢黃芪Astragalus8membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根?；瘜W(xué)試劑均為分析純。D201、D101、DM130(天津南開(kāi)大學(xué)化工廠)。賽多利斯分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司);RE?52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠),WatersAcquityTMUltraperformanceLC色譜儀、AcquityTMTUV檢測(cè)器;?2方法與結(jié)果?
6、2.1色譜條件色譜柱:ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×100mm,1.7μm);流動(dòng)相:乙腈-水(35∶65);漂移溫度:50℃;流速:0?2ml/min;柱溫:30℃;氮?dú)鈮毫?45PSI。?2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品適量,用甲醇制成濃度為0?066mg/ml的溶液,作為對(duì)照品溶液。?2.3供試品溶液的制備取黃芪粗粉約3g,精密稱定,加甲醇24ml加熱回流2次,每次2h,過(guò)濾合并濾液,減壓回收并用甲醇定容至50ml量瓶中,備用。?2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取“2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣0?5、1、1.5、2.0、
7、2.5μl,以對(duì)照品峰面積的常用對(duì)數(shù)值(Y)為縱坐標(biāo)、進(jìn)樣量(μg)的常用對(duì)數(shù)值(X)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為Y=39921X?16698(r=0?9997)。結(jié)果表明,黃芪甲苷進(jìn)樣量在0?033~0?165μg范圍內(nèi)的對(duì)數(shù)值與峰面積對(duì)數(shù)值呈良好線性關(guān)系。?2.5精密度實(shí)驗(yàn)取2.2項(xiàng)下的對(duì)照品溶液進(jìn)樣,重復(fù)測(cè)定6次,每次進(jìn)樣3μl,記錄峰面積,計(jì)算得RSD為0?51%。8?2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)按照“2.3”項(xiàng)下制備樣品一份,分別于0h、4h、6h、8h、10h進(jìn)樣,每次進(jìn)樣3μl,依法測(cè)定,記錄峰面積。計(jì)算得RSD為3.14%,表明樣品在10h
8、內(nèi)穩(wěn)定。?3上柱藥液的制備取黃芪粗粉約80g,精密稱定,加甲醇240ml加熱回流2次,每次2h,過(guò)濾,合并濾
