大孔吸附樹脂法分離純化山茱萸總皂苷

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1、大孔吸附樹脂法分離純化山茱萸總皂苷:吳紅,梁恒,吳道澄,袁忠?!娟P(guān)鍵詞】大孔吸附樹脂  【Abstract】AIM:TooptimizetheextractionandrefinementoftotalsaponinsfromCornusofficinalisbycolumnchromatographyofmacroreticularresin.METHODS:TotalsaponinsL・L-1ofethanolandpurifiedacroreticularresinandelutedL&#

2、12539;L-1,500mL・L-1and700mL・L-1ofethanol.AdsorptioncapabilityandelutionparametersCornusofficinalisenrichedin500mL・L-1ofethanolelutingsolution.Thedosageofelutionreagentsesasthesamplevolumeandtheelutiveratioethodsethodtousemacroreticularr

3、esintoadsorbandpurifytotalsaponinsincornusofficinalis.  【Keyacroreticularresin  【摘要】目的:研究并優(yōu)化大孔樹脂法分離純化山茱萸總皂苷.方法:700mL・L-1乙醇提取后,上HPD300型大孔吸附樹脂,水洗后分別用300mL・L-1,500mL・L-1,700mL・L-1乙醇洗脫,考察大孔樹脂富集、純化山茱萸總皂苷的吸附性能和洗脫參數(shù),并與常規(guī)溶劑提取法相對照.結(jié)果:山茱萸總

4、皂苷富集于500mL・L-1乙醇洗脫液部分,洗脫劑用量為上柱樣品液的8倍,洗脫率達818%.大孔樹脂法與常規(guī)溶劑法提取山茱萸總皂苷的得率分別為249%,219%.結(jié)論:采用大孔吸附樹脂可較好地純化山茱萸總皂苷.  【關(guān)鍵詞】山茱萸;皂苷類;大孔吸附樹脂  0引言  山茱萸CornusofficinalisSieb.etZucc.是我國40種用量大的骨干藥材之一,是中、日、朝三國使用頻率最高的25種植物藥之一[1].近代藥理學研究表明,山茱萸具有抑菌抗病毒,調(diào)節(jié)人體免疫功能,降血糖和抗衰老等作用,

5、其醇水溶液提取物(總皂苷)有明顯的免疫抑制活性[2,3],并對腎陽虛動物模型生命質(zhì)量及多個臟器具有保護作用[4].大孔吸附樹脂(MacroAbsorptionResin)為一種選擇性有機高聚吸附劑,具有吸附快、解吸快、吸附容量大、易于再生、使用壽命長等優(yōu)點.大孔吸附樹脂現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的分離和富集[5,6],如苷與糖類的分離,生物堿的精制等,但在山茱萸總皂苷提取分離方面尚未見報道.本實驗旨在探討HPD300型大孔樹脂富集、純化山茱萸藥材中總皂苷的工藝條件與工藝參數(shù),并與常規(guī)溶劑提取法相對照,從而確立富

6、集、純化山茱萸總皂苷的可行方法.  1材料和方法  1.1材料F120型高速藥物粉碎機(80~200目);Unico2100型紫外可見分光光度計(尤尼柯上海儀器有限公司);DZF型真空干燥箱;SartoriusBP221S電子天平;SB5200D超聲清洗器.山茱萸藥材樣品由漢江制藥廠提供并鑒定;HPD300型大孔吸附樹脂(河北滄州寶恩化工有限公司);人參皂苷Re標準品(中國藥品生物制品檢驗所);香草醛、高氯酸、冰醋酸、甲醇、乙酐、苯胺、鄰苯二甲酸均為分析純;GF254薄層板;展開劑:正丁醇冰醋酸水(4∶1∶5

7、)上清;氯仿甲醇水(65∶35∶10);100g・L-1硫酸乙醇顯色.  1.2方法  1.2.1山茱萸總皂苷樣品液的制備與山茱萸總皂苷的含量測定精密稱定60℃干燥至恒重的山茱萸粉末(80目),700mL・L-1乙醇回流提取3次[7],過濾,減壓濃縮至無乙醇味,加蒸餾水適量,冰箱內(nèi)靜置過夜,離心得山茱萸樣品液(含生藥1kg・L-1).吸取山茱萸樣品液一定量,水浴下?lián)]干,精密加入50g・L-1香草醛冰醋酸02mL,08mL高氯酸,振搖混勻后于65℃水浴加熱

8、20min,冰水冷卻后,加冰醋酸5mL搖勻,隨行試劑做空白,554nm處測定A值[8].  1.2.2大孔吸附樹脂預(yù)處理與再生大孔吸附樹脂一般含有未聚合的單體及殘留溶劑,使用前須先行除去.樹脂用乙醇浸泡2d,傾去上浮物后濕法裝柱,用乙醇洗至流出液與水混合不呈現(xiàn)白色乳濁現(xiàn)象即可,然后以大量蒸餾水洗凈柱中乙醇,水浸泡備用;再生時用900mL・L-1乙醇洗脫至流出液無色,以大量水洗去醇即可.

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