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1、VectorNTI7.0User'sManual軟件包中文翻譯者:宋厚輝(浙江大學(xué)),記住這個偉大的人物吧!前言(Introduction)1.程序附帶的數(shù)據(jù)庫(VectorNTIdatabase)包括:DNA/RNA、蛋白質(zhì)、內(nèi)切酶、寡核苷酸、凝膠mark。此外程序還提供數(shù)據(jù)庫開發(fā)(DatabaseExplorer)功能,用戶可以自己修改、添加、拷貝感興趣的各類數(shù)據(jù)庫。2.創(chuàng)建新分子(有四種方法)A.用GenBank/GenPept,EMBL/SWISS-PROTandFASTA、ASCII等格式輸入DNA或氨基酸。B.手工粘帖,然后保存到數(shù)據(jù)庫中C.從其他分子、接頭、載體
2、中剪切、拼接構(gòu)鍵D.從DNA或RNA分子的編碼區(qū)翻譯成蛋白質(zhì)3.關(guān)于新分子的序列特征圖譜:利用GenBank/GenPept,EMBL/SWISS-PROTorFASTA等格式輸入的分子都能顯示出序列和結(jié)構(gòu)圖,但自己手工粘帖的沒有,需要自己編輯第一章Chapter1Tutorial:DisplayWindows(顯示窗口)目的:創(chuàng)建顯示窗口,并對圖、序列和文本進(jìn)行操作·1.登錄VectorNTI安裝后首次登錄,系統(tǒng)將提示是否允許填充空庫,點(diǎn)OK。這樣DNAmolecules,proteins,enzymes,oligos,andgelmarkers將組成NTI的數(shù)據(jù)庫。并出現(xiàn)
3、下列兩個窗口?!?.觀察出現(xiàn)的VectorNTI工作窗口和DatabaseExplorer窗口上面的第一個窗口為工作窗口,由菜單欄和工具條兩欄,移動鼠標(biāo)到工具欄任意選項處,鼠標(biāo)自動顯示每個工具條的功能。第二個窗口為exlporing——localvectorNTIdatabase,顯示的是上次打開的DNA/RNA或蛋白分子。3.CreateaDisplayWindowforpBR322激活exlporing——localvectorNTIdatabase窗口中的DNA/RNAMolecules(MAIN)數(shù)據(jù)庫,找到pBR322分子并雙擊打開。顯示如下窗口:·4.觀察pBR3
4、22顯示窗口上面的窗口由文本區(qū)(對分子信息的文字描述,雙擊文件夾可以看到)、圖形區(qū)(標(biāo)住限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)等)和序列區(qū)(全序列及酶切位點(diǎn))三個部分組成?!?.顯示窗口的管理(通過拖拉標(biāo)尺,改變窗口、或每個顯示區(qū)的相對大?。?.轉(zhuǎn)換pBR322’s圖形區(qū):在工具欄左邊的activepane右側(cè)有三個按鈕,用鼠標(biāo)點(diǎn)當(dāng)中那個(graphicspane)·7.對pBR322’s結(jié)構(gòu)圖進(jìn)行操作:用戶可以嘗試點(diǎn)擊、、,此時圖形的大小會發(fā)生變化。選區(qū)設(shè)定:菜單Edit——>setselection,輸入100bp–1000bp,然后OK.可以看到選取在圖形中用扇型框圈了起來.將鼠標(biāo)移到選取
5、的5’端,可以看到,通過拖拉可以延長或縮短選區(qū)范圍,同樣在3’端也能做到。如果用戶一次只想移動一個堿基用直接拖拉就可能不方便,假如用戶想在5’端移動一個堿基,首先將鼠標(biāo)放到處,然后按住shift和鍵盤右側(cè)的——>或<——箭頭,則按一次箭頭移動一個堿基距離。如果一次想移動10個堿基,則同時按住shift+ctrl+箭頭。如果用戶只是粗略選擇,可以直接將鼠標(biāo)移到圖中,用十字花拖動。將鼠標(biāo)移到圖的TCr處,此時鼠標(biāo)箭頭變成,并顯示TCr代表的含義,如果用戶此時按下鼠標(biāo),則TCr的編碼區(qū)將被選中?!?.檢查pBR322’snucleotide序列移動標(biāo)尺,盡可能將更多的PBR322序
6、列顯示出來,并點(diǎn)擊序列中任何一處。現(xiàn)在對序列顯示的樣式進(jìn)行設(shè)定:點(diǎn)擊(DisplaySetup)按鈕,顯示moleculardisplaysetup對話框:用戶可以對序列的顏色、大小、10個一組顯示還是15個一組(默認(rèn)是10個堿基一組),結(jié)構(gòu)圖的顏色、限制酶切圖譜(注意剛開始顯示的PBR322上限制酶并不多)、ORF、Motif等進(jìn)行設(shè)置?,F(xiàn)在我們打算把序列字體的顏色由黑色變成綠色,顯示全部PBR322的酶切圖。操作如下:在剛才的窗口中點(diǎn)restrictionmap下面的RMapsetup按鈕,在出現(xiàn)的對話框中點(diǎn)Add,再在出現(xiàn)的對話框中點(diǎn)selectall,然后OK。點(diǎn)se
7、quence下面的sequencesetup,可以看到序列長度的設(shè)置等,在color欄中選green,一路點(diǎn)OK。此時顯示如下:我們發(fā)現(xiàn)限制酶是大大的多了,不過美中不足的是序列顯示的是兩條鏈(正鏈和互補(bǔ)鏈),實(shí)際上一條鏈就夠了,還有最好再和編碼的氨基酸一切顯示。這好辦:先選中全序列(Ctrl-A),看到工具條中的(TranslateDirect)圖標(biāo)了沒,點(diǎn)它。哈哈果然翻譯成功了。不要忘了看左右兩側(cè)的圖標(biāo)喲,點(diǎn)點(diǎn)看。(注意用戶在發(fā)表文章的時候,一般在文章中發(fā)表自己克隆或表達(dá)的DNA序列,在DNA序列下面