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1、ABC-ELISA定量測(cè)定紅細(xì)胞趨化因子受體及其意義作者：張樂(lè)之，盧曉丹，龔燕芳，郭峰【摘要】目的建立ABC-ELISA定量測(cè)定紅細(xì)胞趨化因子受體(ECKR)的方法并探討其臨床意義。方法分離一定數(shù)量紅細(xì)胞與IL-8結(jié)合，離心后取上清液用ABC-ELISA法檢測(cè)IL-8含量，通過(guò)公式計(jì)算紅細(xì)胞趨化因子受體結(jié)合活性；對(duì)該法檢測(cè)IL-8的靈敏度、精密度、準(zhǔn)確度進(jìn)行了探討，并對(duì)31例正常人，25例惡性腫瘤患者和33例銀屑病患者的ECKR進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果該法檢測(cè)IL-8的靈敏度為15.6pg/ml。精密度批內(nèi)平均CV4.69%；批間平均CV9.79%，準(zhǔn)確度平均回收率為97%。31例
2、正常人ECKR為(52.96±10.45)%；25例惡性腫瘤ECKR為(46.07±13.33)%；33例銀屑病人ECKR為(46.87±10.28)%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，惡性腫瘤患者和銀屑病患者ECKR均比正常人ECKR要低(P<0.05)。結(jié)論該法是一種簡(jiǎn)便的定量測(cè)定ECKR的新方法，對(duì)研究紅細(xì)胞免疫、趨化因子及其受體在疾病防治和發(fā)病機(jī)理中的作用有一定價(jià)值。【關(guān)鍵詞】紅細(xì)胞趨化因子受體；鏈霉親和素生物素-ELISA；白介素-8；紅細(xì)胞免疫9【Abstract】ObjectiveTodevelopaquantitativeABC-ELISAandtoinvestigateth
3、eclinicalsignificanceforhumanerythrocytechemokinereceptor.MethodsIsolatederythrocytesboundtoIL-8.AftercentrifugeIL-8levelsweremeasuredwithABC-ELISAinthesupernatant.Activityoferythrocytechemokinereceptorwerecalculatedbyformula.ResultsTheminimumdetectablelimitwas15.6pg/ml.Precision：Themeanco
4、efficientsofvariationwere4.69%forinter-assayand9.79%forintra-assay，respectively.Accuracy：Themeanrecoveryratewas97%.In31normaladults，theECKRbindingactivity(±s%)was52.96±10.45.In25tumors，33psoriasises，itwas46.07±13.33，46.87±10.28respectively.TheECKRbindingactivityofthetumorsandthepsoriasises
5、decreasedsignificantly(P<0.05)compareswithnormalcontrolgroupbystatistics.ConclusionAquantitativeABC-ELISAforerythrocytechemokinereceptorisasimpleandnewmethod.ThedetectionoftheECKRbindingactivityhasavaluetostudyRBCimmune，chemokineanditsreceptorinpreventing，treatingandthepathogenesisofthe
6、disease.【Keywords】erythrocytechemokinereceptor；ABC-ELISA；interleukin-8；erythrocyteimmune91982年郭峰［1］在國(guó)內(nèi)首先建立了測(cè)定紅細(xì)胞免疫粘附功能的方法，并證明紅細(xì)胞的免疫粘附功能主要是通過(guò)CR1實(shí)現(xiàn)的。該法簡(jiǎn)便易行，沿用至今。二十年來(lái)，紅細(xì)胞免疫研究逐漸深入，已發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞表達(dá)多種天然免疫受體和物質(zhì)，如CR1、CR3、CD44、CD58、CD59、DAF、SOD酶和趨化因子受體(CKR)等，其中每個(gè)紅細(xì)胞上的紅細(xì)胞趨化因子受體(ECKR)表達(dá)的數(shù)量比CR1要多［2］，但對(duì)ECKR的作用
7、卻知之甚少。因此我們建立了ABC-ELISA定量測(cè)定ECKR方法并初步應(yīng)用于臨床，現(xiàn)報(bào)告如下。1材料與方法1.1材料1.1.1主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器人重組白介素-8(IL-8)純品(北京醫(yī)科大學(xué)分子免疫室產(chǎn)品)；人鏈霉親和素生物素-ELISA(ABC-ELISA)試劑盒(法國(guó)Diaclone公司產(chǎn)品)；微晶纖維素(上海趙屯藥廠產(chǎn)品)；α-纖維素(浙江湖州食品化工聯(lián)合公司產(chǎn)品)；淋巴細(xì)胞分離液(上海試劑二廠產(chǎn)品)；酶標(biāo)儀(芬蘭Labsystems公司制造)。1.1.2實(shí)驗(yàn)對(duì)象9采自本院體檢健康者和門診或住院患者。正常對(duì)照
