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《香菇多糖對小鼠巨噬細胞的活化作用.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、香菇多糖對小鼠巨噬細胞的活化作用【摘要】目的探討香菇多糖（LNT）對機體的免疫系統(tǒng)刺激活性。方法（1）615純系小鼠靜脈注射LNT，測定巨噬細胞吞噬功能；（2）腫瘤壞死因子（TNF）的測定；取傳代后3～4天L615小鼠白血病細胞檢測細胞毒；（3）熒光染色和DNA電泳觀察細胞凋亡。結(jié)果LNT能夠誘導體外培養(yǎng)的巨噬細胞、脾細胞和胸腺細胞的培養(yǎng)上清液中TNF含量顯著增加。誘導后的巨噬細胞上清對L615白血病細胞細胞毒活性由對照的11．4%增高到66．2％。且呈LNT劑量依賴性，作用后的白血病小鼠細胞體積
2、顯著縮小，核發(fā)生固縮，呈現(xiàn)凋亡細胞特征。結(jié)論LNT活化后的巨噬細胞對腫瘤細胞有顯著的細胞毒作用，其機制與誘導巨噬細胞產(chǎn)生TNF而介導腫瘤細胞凋亡有著密切的關系【關鍵詞】香菇多糖巨噬細胞腫瘤壞死因子細胞凋亡【Abstract】ObjectiveToresearchoneofitsmechanismsmediatedbytheactivationofmacrophagesinmurinecavityinducedbylentinan（LNT）Methods（1）Observingthephagocyt
3、osisofmacrophagesinmurinecavityinducedbyLNT，（2）Measuringthetumornecrosisfactor（TNF）ofL615leukeamiamiceafterbeinginjectedbyLNT,（3）ApoptosismediatedbyTNFinmacrophagesinducedbyLNT.wasdetectedwithHochest33258fluorochromestainingandDNAelectrophoresis.Resul
4、tsTheratioandindexofphagocytosisofmacrophagesinmurinecavityinducedbylentinan（LNT）wereincreasedsignificantly.Meanwhilecontentoftumornecrosisfactor（TNF）insupernatantofmacrophagesspleniccellsandthymocytesinducedbyLNTwerehigherthanthecontrol.Thecytoxicact
5、ivationofmacrophagesupernatantinducedbyLNTonL615leukeamiacellsroseto66.2%fromthecontrol（11.4%）andexpressedadosedependeantmannerwhenL615leukeamiacellsweretreatedbythemacrophagesupernatantinducedbyLNTDNA,theapoptoticcellswerefound.ConclusionThemacrophag
6、esactivatedbyLNTshowshighcytotoxicactivationontumorcells,andoneofitsmechanismsofanti-tumorcellsistheapoptosismediatedbyTNFinmacrophagesinducedbyLNT.【Keywords】lentinan；macrophage；TNF;apptosis現(xiàn)代研究證明，香菇多糖（LNT）可調(diào)節(jié)人體內(nèi)有免疫功能的T細胞活性，可降低甲基膽蒽誘發(fā)腫瘤的能力。香菇對癌細胞有強烈的抑制
7、作用。從細胞凋亡（Apoptosis）的角度探討抗腫瘤途徑是目前醫(yī)學研究的熱點。細胞凋亡機制比較復雜，而且不單純是一個生理過程，它與很多免疫的發(fā)生發(fā)展有著重要的關系［1,2］。利用某些手段誘導腫瘤細胞凋亡進而發(fā)揮抗腫瘤目的是本課題出發(fā)點。我們利用LNT誘導活化巨噬細胞進而介導腫瘤細胞凋亡，起到抗腫瘤效果，更符合生物自身防御原則，達到扶正固本的作用。31材料與方法1.1巨噬細胞功能測定615純系小鼠（4～6周齡，中國醫(yī)科院血研所動物中心）靜脈注射LNT［Lentinusedodes（Berk）Sin
8、g干燥子實體中提取，福建梅峰制藥廠］66.7mg/㎏體重，qd×7d，停藥第2天，腹腔注射5％雞紅細胞（CRBC）生理鹽水0.5ml／只，8～12h后收集腹腔巨噬細胞。于載玻片上37℃溫育30min，甲醇固定Giemsa－wright染液染色，油鏡觀察，計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)，進行組間t檢驗。1．2腫瘤壞死因子（TNF）的測定收集，腹腔巨噬細胞，800g離心20min，沉淀細胞經(jīng)Hank’s液（含10%的FBS）沉淀2次。用CM調(diào)細胞濃度為5×106/ml，于24孔培養(yǎng)孔板37℃
